雷宁静
- 作品数：15 被引量：43H指数：4
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：河南省高校青年骨干教师资助项目国家教育部“211”工程更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学环境科学与工程更多>>
- 经血源性子宫内膜间充质干细胞的分离、培养与鉴定被引量：14
- 2010年
- 背景:目前用于干细胞研究的主要来源为胚胎干细胞和骨髓干细胞,但这两种来源都存在着部分局限性,因此需要寻找一种新型的干细胞以克服肿瘤形成的潜在性、标本来源的缺乏及伦理学的争议等弊端。目的:分离培养经血源性子宫内膜间充质干细胞并进行鉴定。方法:采用Ficoll密度梯度离心法分离出人经血源性子宫内膜间充质干细胞,对细胞的形态及生长特性进行观察;采用流式细胞仪对细胞表面抗原CD29、CD44、CD34、CD45、HLA-ABC及HLA-DR进行表型鉴定;免疫细胞化学法测定经血源性子宫内膜间充质干细胞中nestin阳性细胞表达。结果与结论:应用Ficoll密度梯度离心法可以从女性月经血中分离培养出干细胞,约2周原代细胞达到80%～90%融合,细胞呈漩涡状、网状、辐射状。传代后能稳定生长,可见纤维样细胞形态为主导。流式检测结果显示,经血源性子宫内膜间充质干细胞表现出CD29强阳性,CD44阳性,CD34、CD45、HLA-DR阴性,低表达HLA-ABC。染色显示nestin抗原在经血源性子宫内膜间充质干细胞中有表达,约占经血源性子宫内膜间充质干细胞的(10.35±0.51)%。结果表明经血源性子宫内膜间充质干细胞表达间充质干细胞的标记物,具低免疫源性;经血源性子宫内膜间充质干细胞表达nestin抗原,为经血源性子宫内膜间充质干细胞在神经系统应用提供一定的理论依据。
- 周云帆杨波胡祥焦洪亮周长辉田毅雷宁静谷晨熙许予明戴建武关方霞
- 关键词：经血子宫内膜间充质干细胞表型鉴定巢蛋白
- 改良法培养人牙髓间充质干细胞及其向神经样细胞的分化被引量：1
- 2010年
- 背景:应用改良组织原位培养法后,牙髓间充质干细胞的提取成功率显著提高,但鲜有文献报道其与酶消化法提取干细胞生物学特性的异同。目的:观察改良组织原位培养法与传统酶消化法所获得的牙髓间充质干细胞向神经样细胞分化上的差异。方法:将同一组织来源的标本随机分成两组,分别用改良的组织原位培养法及常规的酶消化法提取人牙髓间充质干细胞,通过免疫组化、流式细胞检测及RT-PCR等比较观察其生长情况、抗原表达及向神经样细胞分化能力。结果与结论:改良法原位培养组分离牙髓间充质干细胞与常规分离培养组分离的干细胞在形态学表现,抗原表达及神经向分化能力上无明显区别,但简化了操作流程,且所得细胞数量大。
- 李远关方霞李季杨波胡祥杜英谷晨熙雷宁静王晓薇
- 关键词：改良法干细胞牙髓神经分化
- 人脐带Wharton’s jelly源间充质干细胞培养中碱性成纤维细胞生长因子的作用被引量：3
- 2010年
- 背景：培养脐带源间充质干细胞过程中,细胞形态常易变得宽大不规则,传代不易贴壁,死亡率高,找到一个维持细胞稳定的方法是有必要的。目的：拟采用组织块培养法从人脐带Wharton’s jelly中分离培养间充质干细胞,观察碱性成纤维细胞生长因子对其生物学特性的影响。方法：采用组织块法分离培养和扩增脐带组织间充质干细胞,对照组用DMEM/F12培养基＋体积分数为10%胎牛血清培养,实验组用DMEM/F12培养基＋体积分数为10%胎牛血清＋20μg/L碱性成纤维细胞生长因子培养。观察组织块游出细胞的时间和细胞形态,每隔3d或4d更换培养液,待细胞达到80%~90%融合时,用0.25%胰酶消化后,按1：2或1：3的比例传代。结果与结论：倒置显微镜下观察对照组中从8~10d开始有细胞从组织块四周游出贴壁,实验组中从6~8d开始有细胞从组织块四周游出贴壁,1周后可见多数呈长梭形或扁平形的成纤维样细胞,围绕组织块成旋涡状,前3代细胞形态及传代间隔时间两组基本相同;3代以后实验组细胞较对照组易于贴壁,传代死亡率低,生长曲线提示增殖能力强。流式细胞术分析两组细胞周期显示第3,6代70%以上的细胞处于G0/G1期,且第3,6代细胞均阳性表达CD29,CD44,弱表达HLA-ABC,不表达CD34、CD45和HLA-DR。结果提示采用组织块培养法可从人脐带Wharton’s jelly中分离出具有间充质干细胞特性的细胞,且碱性成纤维细胞生长因子能使细胞从组织块游出时间提前和有助于促使细胞贴壁,一定程度上维持细胞形态稳定性,提高增殖能力,并且不改变细胞的表面标志物表达。
- 巴云涛关方霞胡祥杨波杜英张天祥田毅乔晓俊王成春谷晨熙雷宁静王晓薇
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子间充质干细胞人脐带JELLY干细胞
- 消毒湿巾包
- 本实用新型公开了一种消毒湿巾包，包括一侧设置有撕口、由弹性橡胶材料制成的包体和密封装于其内经臭氧水浸泡的湿巾，在所述包体上设置有圆形撕痕线。所述圆形撕痕线设置在所述包体一侧的中部。本实用新型优点在于将包体上设置有圆形撕痕...
- 关方霞吴建春杨波吴迪谷晨熙雷宁静
- 文献传递
- 生物实验室废液褪色装置
- 本实用新型公开了一种生物实验室废液褪色装置，它包括反应室，开设在所述反应室底部的出水口；在反应室内位于顶部位置处设置有与外接生物实验室废液收集容器相连通的喷淋管；在反应室底壁或侧壁上设置有臭氧发生器，所述臭氧发生器臭氧出...
- 关方霞杨波吴迪谷晨熙雷宁静杜廷海
- 文献传递
- 生物实验室废水固、液分离装置
- 本实用新型公开了一种生物实验室废水固、液分离装置，它包括设置有盖体的分离室，设置在所述分离室盖体上的水蒸气出口，在分离室内设置有与其内腔相适应的塑料袋，在分离室侧壁或底壁上设置有用于加热的微波发生器。本实用新型优点在于实...
- 关方霞杨波吴迪谷晨熙雷宁静杜廷海
- 文献传递
- 生物实验室废液专用紫外线照射装置
- 本实用新型公开了一种生物实验室废液专用紫外线照射装置，它包括腔体，设置在所述腔体底部的进水口和顶部的出水口；在腔体内自上而下间隔绝缘设置多层紫外线发射灯管。本实用新型优点在于将由固液分离器分离后的生物实验室废液，自所述腔...
- 关方霞杨波吴迪谷晨熙雷宁静杜廷海
- 文献传递
- 生物实验室废液处理方法
- 本发明公开了一种生物实验室废液处理方法，按照下述步骤进行：第一步、将收集的生物实验室废液采用离心机、过滤膜或加热蒸发方法使废液中的固体和液体分离；第二步、将第一步分离出来的固体经杀菌消毒后打包处理；将分离出来的液体导入到...
- 关方霞杨波吴迪谷晨熙雷宁静杜廷海
- 人羊膜间充质干细胞静脉移植治疗转基因APP^+小鼠的机制被引量：3
- 2010年
- 背景:研究发现APP基因与阿尔茨海默病发病密切相关。课题组前期实验发现人羊膜间充质干细胞静脉移植可以促进阿尔茨海默病APP+转基因小鼠的学习,记忆能力改善。目的:探讨人羊膜间充质干细胞尾静脉移植后,能否归巢到小鼠脑组织中,并分化为相关的中枢神经细胞,治疗阿尔茨海默病。方法:无菌条件下体外分离培养人羊膜间充质干细胞,传至第3代将细胞浓度调整为1×109L-1,经尾静脉注入0.5mL至细胞移植组转APP+基因小鼠体内;对照组经尾静脉注入同体积的生理盐水;正常组转APP-基因小鼠不给予任何干预措施。采用免疫组化方法检测、测定Brdu标记的人第3代羊膜间充质干细胞在小鼠脑组织中的表达,各组小鼠脑组织中GFAP、Nestin和NSE的表达。结果与结论:光镜下观察可见,移植组小鼠脑组织中大部分细胞核被染成蓝色,但有一些细胞核被染成棕色或褐色,Brdu呈阳性。与对照组相比,移植组小鼠脑组织中的GFAP增加了近4倍,表达显著增加,甚至超过正常组的表达(P<0.05);Nestin的表达则显著升高,增加了近10%,但是还比正常组低了近20%(P<0.05)。NSE的表达降低了近1/3,但仍高于正常组(P<0.05)。表明人羊膜间充质干细胞尾静脉移植治疗阿尔茨海默病可能是通过羊膜间充质干细胞归巢到转基因APP+小鼠脑组织中,并分化成中枢神经细胞的途径实现的。
- 王成春杨波关方霞李国栋周长辉周云帆胡祥谷晨熙雷宁静
- 关键词：人羊膜间充质干细胞巢蛋白神经元特异性烯醇化酶
- 人脐带沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞的共培养被引量：2
- 2010年
- 背景:人脐带沃顿胶间充质干细胞满足了国际细胞治疗协会规定的间充质干细胞的特点,能够向骨、软骨、脂肪、肌肉、神经细胞诱导分化并支持其他干细胞的扩增,对免疫系统有良好的耐受性,对肿瘤有定向迁徙性。目的:观察人脐带沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞体外共培养后,脑肿瘤干细胞的生物学变化。方法:以原位法培养人脐带沃顿胶间充质干细胞,以酶消化法培养人脑肿瘤组织脑肿瘤干细胞,以细胞传代法获取第3代细胞。应用不添加任何生长因子的无血清培养基将两种细胞在24孔板中进行直接共培养。第3,7天应用流式细胞术检测细胞CD133表达;应用免疫荧光法检测贴壁细胞巢蛋白和胶质纤维酸性蛋白表达;将第3天离心所得的共培养上清液重悬第3代脑肿瘤干细胞并与正常培养悬浮的第3代脑肿瘤干细胞置入96孔板中,应用酶标仪检测两组细胞生长曲线的差异。结果与结论:两种细胞共培养后在倒置显微镜下可见脑肿瘤干细胞球随着培养时间的增加出现分解、贴壁、分化现象;贴壁的脑肿瘤干细胞免疫荧光染色胶质纤维酸性蛋白和巢蛋白均阳性。恶性程度高的脑肿瘤组织培养的脑肿瘤干细胞表达CD133量越高,而与沃顿胶间充质干细胞共培养后随着时间的变化均出现CD133表达量降低。共培养3d的上清液培养的脑肿瘤干细胞与正常培养基培养的脑肿瘤干细胞相比,增殖明显受到抑制。结果显示沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞体外共培养后可限制脑肿瘤干细胞表面标记物CD133的阳性率以及细胞增殖能力并促使其分化。
- 田毅关方霞胡祥杨波杜英周长辉巴云涛谷晨熙雷宁静王晓薇
- 关键词：共培养脑肿瘤干细胞CD133人脐带
