郝军元
- 作品数：30 被引量：102H指数：6
- 供职机构：河西学院农业与生物技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省科技支撑计划云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 葡萄籽原花青素抑制小鼠B16-F0黑色素瘤细胞黑色素生成的影响被引量：6
- 2017年
- 目的:研究葡萄籽原花青素对小鼠B16-F0黑色素瘤细胞黑色素生成的抑制作用,并对其机理进行初步探究。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测小鼠B16黑色素瘤细胞增值率;左旋多巴氧化法测定酪氨酸酶活;Na OH裂解法测定黑色素合成;分别采用RT-PCR法和Western-blotting法检测B16-F0细胞中TYR、TRP-1、TRP-2mRNA和蛋白表达水平。结果:葡萄籽原花青素显著抑制B16黑色素瘤细胞的增殖,且与浓度和作用时间相关;12.5~200μg/ml浓度范围的葡萄籽原花青素显著抑制细胞酪氨酸酶活性及黑色素生成。当葡萄籽原花青素浓度为200μg/ml作用时间为48 h时,对B16-F0细胞内酪氨酸酶活性及黑色素合成抑制效果最佳。此外,与对照组相比,经浓度为100μg/ml和200μg/ml,作用时间为48 h的葡萄籽原花青素处理,B16-F0细胞内TYR、TRP-1、TRP-2的mRNA和蛋白表达水平显著降低。结论:葡萄籽原花青素抑制B16黑色素瘤细胞的增殖及黑色素的合成,其机制可能是通过抑制TYR、TRP-1、TRP-2的表达,进而抑制酪氨酸酶活性实现的。
- 张慧瑛邢芙玲罗光宏叶生宝张泽星邓世川郝军元
- 关键词：葡萄籽原花青素酪氨酸酶
- 水飞蓟宾体外诱导人肺癌A549细胞凋亡作用研究被引量：2
- 2016年
- 目的：研究水飞蓟宾对人肺癌A549细胞凋亡的影响。方法：采用MTT法测定水飞蓟宾在不同浓度下对A549细胞的抑制率;分别采用q TR-PCR及Western blot检测细胞中Capase-3、Caspase-9及Bcl-2的mRNA及蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果：10、20、40、80、160μg/ml水飞蓟宾对A549细胞的增殖有明显的抑制作用,最高抑制率为46.61±3.70。qRTPCR及Western blot结果显示,与对照组相比,当水飞蓟宾浓度为40-160μg/ml剂量范围时,显著上调Capase-3、Caspase-9的mRNA及蛋白表达水平,下调Bcl-2的mRNA及蛋白表达水平;流式细胞术检测发现,40-160μg/ml剂量范围的水飞蓟宾显著增加了A549细胞的凋亡率。结论：水飞蓟宾能够抑制人肺癌A549细胞株的体外增殖并促进细胞凋亡,其机制可能是通过上调Capase-3、Caspase-9的表达,下调Bcl-2的表达实现的。
- 张慧瑛罗光宏张圆圆张杰杨艳郝军元
- 关键词：水飞蓟宾A549细胞凋亡率
- 凋亡素重组蛋白导向治疗肿瘤的研究
- 郝军元
- 关键词：凋亡素重组蛋白肿瘤细胞凋亡
- 文献传递
- 猪脂肪细胞特异膜蛋白的分离鉴定被引量：2
- 2004年
- 用蔗糖密度梯度离心制备脂肪细胞及其他组织细胞膜蛋白 ,通过 SDS- PAGE分离并用薄层扫描测定不同组织细胞膜蛋白的组成、相对分子质量及含量。结果表明 ,猪皮下脂肪细胞有 19种膜蛋白 ,心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉细胞及其他脂肪细胞有 13～ 2 4种膜蛋白 ,红细胞膜有 6种膜蛋白。经 Western- blot鉴定 ,猪皮下脂肪细胞有 8种特异性膜蛋白 ,分别为 110 770、10 3910、39970、3110 0、2 94 2 0、2 5 4 80、2 35 4 0和 2 2 0 0 0。结果显示 。
- 郝军元高士争汪磊张曦张玉静
- 关键词：脂肪细胞
- 黑果枸杞愈伤组织制备原生质体条件优化
- 2017年
- 通过研究酶解时间、甘露醇浓度、酶液组成和离心速度对黑果枸杞愈伤组织制备原生质体分离效果的影响,并对制备原生质体用FAD染色检测活力.结果表明:黑果枸杞的原生质体分离最佳条件为酶解时间12h,甘露醇浓度0.4mol/L,酶液组成为纤维素酶1.8%+果胶酶0.3%+离析酶0.5%,离心速度800r/min,在此条件下原生质体产量为2.65×10~6个/gFW,FDA荧光检测活力在80%以上.
- 张慧瑛罗光宏卢妹妹胡雪马芳芳郝军元
- 关键词：黑果枸杞愈伤组织原生质体FDA
- hTERT核心启动子调控HSV-TK自杀基因系统诱导肿瘤细胞的凋亡
- 2008年
- 目的观察人端粒酶催化亚单位(hTERT)启动子调控逆转录病毒介导的单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因/丙氧鸟苷(HSV-TK/GCV)自杀基因系统诱导肿瘤细胞凋亡的效果。方法采用PCR方法扩增胸苷激酶(TK)基因,并构建由hTERT核心启动子调控的胸苷激酶重组逆转录病毒载体pLNC-hTERTp-TK,转染包装细胞PT67,G418筛选阳性细胞克隆,检测病毒滴度,PCR法检测转染细胞中的TK基因。将获得的重组逆转录病毒感染人肺癌细胞株A549、肝癌细胞株SMMC-7721、宫颈癌细胞株HeLa和正常人成纤维细胞系WI-38,G418筛选阳性克隆,MTT法检测重组逆转录病毒对肿瘤细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡。结果重组逆转录病毒载体pLNC-hTERTp-TK经双酶切,可见1402bp的目的基因片段,表明质粒构建正确。从转染的PT67细胞中扩增出1131bp的基因片段,与TK基因大小一致。在成功转染重组逆转录病毒的PT67细胞中,病毒滴度最高者可达7.8×105CFU/ml。重组逆转录病毒感染的3种肿瘤细胞的增殖均受到抑制,且生长抑制率随着GCV浓度的增加而升高,经较低浓度GCV(10μg/ml)处理的3种肿瘤细胞,凋亡率分别可达37.06%、34.88%和33.59%。结论由hTERT启动子调控的逆转录病毒介导的HSV-TK/GCV自杀基因系统可诱导肿瘤细胞凋亡,且具有较强的特异性和高效性。
- 胡薇郝军元张惠英艾永兴
- 关键词：胸苷激酶逆转录病毒肿瘤
- 凋亡素原核表达及纯化
- 2007年
- 为进一步研究凋亡素结构与功能和制备凋亡素单克隆抗体,本试验构建了凋亡素的原核表达载体pET-28a-VP3,并将该质粒转化到大肠杆菌E.coliBL21中,以IPTG对其进行诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析蛋白。结果证明在E.coliBL21中正确表达了凋亡素,同时对表达蛋白进行纯化,SDS-PAGE显示在1.4 kD处出现目的蛋白带与预期相符。
- 郝军元胡薇张英波艾永兴张玉静
- 关键词：凋亡素原核表达载体纯化
- 动物脂肪细胞膜蛋白组成及猪脂肪细胞特异膜蛋白的分离鉴定
- 脂肪细胞具有蓄积脂肪的独特功能。多年来，为了解其功能的控制机制，人们一直致力于研究脂肪细胞的代谢和结构特点。目前通过SDS-PAGE、Western-blot和单克隆抗体等技术，发现不同动物脂肪细胞膜蛋白的组成存在差异。...
- 郝军元
- 关键词：脂肪细胞膜蛋白抗体
- 文献传递
- 本科院校生物工程专业实习的探索与思考
- 2018年
- 专业实习在生物工程教学体系中具有重要的地位和作用。本文结合学校多年的实习实践,分析了该专业的学科特点及专业实习教学中存在的问题和不足,通过提高实习认识、调整培养方案、加强实习基地建设、优化带队教师结构、强化实习管理、严格实习考核等教学环节的改革措施,为提升学生的工程实践能力做出了一些专业性的探索和实践。
- 曹礼焦扬郝军元崔玮高慧娟
- 关键词：生物工程教学改革
- 应用Drug-western法从cDNA表达文库中筛选青蒿素类抗疟药靶标蛋白基因
- 构建恶性疟原虫海南株红内期cDNA表达文库提取红内期恶性疟原虫海南株总RNA,直接以总RNA为模板使用cDNA文库构建试剂盒,首先反转录合成ss-DNA,再扩增合成ds-DNA(cDNA),对扩增产物用蛋白酶K消化及Sf...
- 傅作申张玉静郝军元
- 文献传递
