郁飞
- 作品数：10 被引量：32H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学文化科学农业科学更多>>
- 谈研究生职业生涯规划教育的必要性与措施被引量：4
- 2011年
- 研究生就业难的根本原因之一在于研究生职业生涯教育缺乏。做好研究生职业生涯规划不仅为研究生的未来发展提供了方向,更为学校和社会的稳定发展提供了条件。本文强调研究生开展职业生涯规划的必要性和迫切性,分析了研究生职业生涯规划的内涵,并提出研究生职业生涯规划的具体实施步骤,以期解决研究生职业生涯规划问题。
- 房春红郁飞撒文清
- 关键词：职业生涯规划
- 拟南芥细胞周期基因AtCDC5的功能研究及抗体制备被引量：2
- 2019年
- MYB相关CDC5 (Cell division cycle 5)蛋白对于细胞周期G2期的正常进行是必须的,但是在植物中对这种蛋白质的研究还较少涉及。本试验测量比较野生型拟南芥(Col-0生态型)和At CDC5 T-DNA插入缺失突变体(GK_278B09)的主根生长速度和长度,利用瞬时表达At CDC5-GFP研究At CDC5在拟南芥叶片叶肉细胞中的定位,同时利用At CDC5 N端144个氨基酸在大肠杆菌中进行原核表达和纯化,免疫家兔获得针对At CDC5的多克隆特异性抗体,从表型、细胞和蛋白质水平研究At CDC5基因的功能。结果表明,GK_278B09的主根因发育受到抑制而生长速度缓慢; At CDC5-GFP融合蛋白主要定位于细胞核中;经过分离得到的At CDC5蛋白抗血清能够有效地检测出10 ng原核表达的At CDC51-144抗原,并在原生质体At CDC5过表达体系中检测出1条分子量约为120 000的条带,此条带与At CDC5-GFP大小相近。本研究成功制备出At CDC5蛋白的多克隆抗体,为进一步研究At CDC5蛋白影响细胞周期从而影响植物生长发育提供了研究基础。
- 徐金龙梁爽郁飞
- 关键词：亚细胞定位原核表达抗体制备
- 拟南芥乙烯应答基因HLS1的原核表达及多克隆抗体制备被引量：2
- 2020年
- 【目的】制备乙烯应答基因HLS1多克隆抗体,在过表达植物中检测HLS1的积累,为深入研究HLS1响应乙烯信号通路的分子机制奠定基础。【方法】构建pET28a-HLS1c原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导获得重组蛋白HLS1c-His;镍柱亲和纯化重组蛋白后免疫家兔获得抗HLS1血清,利用抗原亲和纯化抗血清获得高纯度的HLS1多克隆抗体;用HLS1抗体和GFP抗体,检测原生质体瞬时转化体系中GFP-HLS1c融合蛋白的表达;用农杆菌蘸花法获得过表达GFP-HLS1g的转基因植物,用HLS1抗体和GFP抗体检测GFP-HLS1g融合蛋白的表达。【结果】成功构建了原核表达载体pET28a-HLS1c,并在大肠杆菌系统中诱导获得重组蛋白HLS1c-His,且多以包涵体形式存在。纯化的HLS1c-His多克隆抗体,能清晰检测到约80 ng原核表达的HLS1抗原。纯化的HLS1抗体不仅能检测到原生质体中瞬时表达的GFP-HLS1c融合蛋白,也能检测到过表达转基因植物株系中的GFP-HLS1g融合蛋白,并且与标签蛋白GFP对应抗体所检测到的特异性条带大小一致。【结论】成功制备了拟南芥HLS1蛋白多克隆抗体,为HLS1蛋白在植物发育中的功能研究奠定了基础。
- 郭佳郁品泽贾敏郁飞
- 关键词：拟南芥原核表达蛋白纯化多克隆抗体
- 研究生课程教学存在的主要问题及解决途径探讨被引量：11
- 2018年
- 研究生课程教学是研究生教育的重要环节,对于形成研究生宽广扎实的专业背景,提高科研创新能力和培养质量具有现实意义。针对课程教学中存在课程设置存在系统性、教师投入不足和其他影响教学效果等问题,探讨了解决途径与措施及取得的效果。
- 撒文清任娟林雁冰郁飞
- 关键词：课程教学
- 拟南芥表皮毛发育突变体abt3-1的基因定位及表型分析被引量：2
- 2017年
- 在发掘和鉴定调控植物表皮毛发育的新因子过程中,获得了一个表皮毛发育异常的拟南芥隐性突变体abt3-1(aberrantly branched trichome 3-1)。与野生型拟南芥(Col-0)相比,其表皮毛分支数目明显增加。另外,abt3-1还表现出植株小、叶形宽、叶色发灰、主根短等发育缺陷。利用图位克隆技术将该突变基因ABT3定位在1号染色体上,分子标记在F28G11#3与F4N21#1之间,物理距离为134kb。该研究将为进一步克隆ABT3基因及研究其在调控植物生长发育过程中的作用奠定基础。
- 李东亚梁爽席阿利安丽君郁飞
- 关键词：表皮毛拟南芥图位克隆细胞周期
- 修订培养方案优化课程体系提高研究生创新能力——以生物学一级学科为例被引量：6
- 2012年
- 研究生培养方案是实施研究生教育的质量保证体系和最基本的质量标准。通过分析培养方案课程体系存在的问题,提出培养单位在研究生教育中,要根据学科发展水平,不断地修订、完善培养方案,打破原有学科局限和视野,优化设置层级明确的课程体系,整合教学资源,加强课程教学团队建设,培养研究生创新能力,保证培养目标实现。
- 撒文清房春红郁飞韦革宏
- 关键词：课程体系
- 拟南芥自噬蛋白ATG8e的原核表达及多克隆抗体制备被引量：2
- 2018年
- 构建拟南芥自噬相关基因ATG8e的原核表达载体p GEX-4T-1-ATG8e,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导得到融合蛋白GST-ATG8e。GST-ATG8e蛋白首先用谷胱甘肽琼脂糖凝胶树脂亲和纯化,然后用凝血酶酶切去除谷胱甘肽S移换酶(glutathione S-transferase,简称GST)标签,最后十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,简称SDS-PAGE)割胶纯化,用纯化后14 ku的ATG8e蛋白免疫家兔4次得到抗血清,纯化抗血清制备高效ATG8e多克隆抗体。提取野生型拟南芥和ATG8e超表达植株叶片总蛋白做免疫印迹检测,结果在2种基因型植物叶片蛋白样品中均能检测到与ATG8e分子量大小一致的条带,且ATG8e超表达植物中ATG8e积累量明显高于野生型。成功制备了拟南芥ATG8e蛋白多克隆抗体,为研究ATG8e在自噬中的作用奠定了试验基础。
- 刘希李远凤齐亚飞郁飞
- 关键词：蛋白纯化多克隆抗体制备免疫印迹
- 拟南芥叶绿体发育必需蛋白PAC的原核表达及多克隆抗体制备被引量：1
- 2016年
- 【目的】将拟南芥叶绿体发育必需蛋白PAC进行大肠杆菌原核表达和纯化,并免疫家兔,获得针对PAC蛋白的多克隆特异性抗体,为进一步研究PAC蛋白在叶绿体发育中的功能提供保证。【方法】将编码拟南芥PAC蛋白的cDNA克隆至原核表达载体pET-28a中,转化BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导后,对诱导产生的PAC蛋白进行镍柱亲和纯化和SDS-PAGE割胶纯化,并将纯化的PAC蛋白通过皮下注射免疫家兔,利用分离得到的抗血清,针对拟南芥野生型、PAC敲除突变系pac-1和PAC过表达系PACOE的总蛋白进行免疫印迹检测。【结果】成功构建了拟南芥基因PAC的原核表达载体pET-28a-PAC,在37℃、1mmol/L IPTG诱导4h的大肠杆菌细胞中,可检测到分子质量为38.9ku的重组蛋白,其大部分以可溶形式存在。用纯化诱导后的重组蛋白免疫家兔获得PAC抗血清,该抗血清能够有效地检测出1ng原核表达的PAC重组蛋白,并在植物样品中检测出1条分子质量约为35ku的条带。【结论】成功制备了PAC蛋白的多克隆抗体,可用于植物中PAC蛋白含量的检测。
- 王玥梁爽梁慧珂郁飞齐亚飞
- 关键词：叶绿体原核表达抗体制备
- 红色荧光蛋白融合表达载体的构建和蛋白质细胞内定位研究被引量：2
- 2019年
- 为进一步研究目的蛋白质在细胞内的定位,构建融合了红色荧光蛋白mCherry或mScarlet的表达载体。选取VTI12、RabD2a、ARA7以及SYP61等4个定位基因来构建红色荧光蛋白融合表达载体。根据TAIR数据库中相关蛋白质的基因序列设计引物,通过PCR技术扩增序列并将其分别连接到已制备好的红色荧光蛋白融合表达载体上,制备得到质粒后转化入原生质体进行瞬时表达。结果表明,成功构建了pUC18HE-NmCherry-VTI12、pUC18HE-NmCherry-RabD2a、pUC18-mScarlet NT-ARA7以及pUC18-mScarlet NT-SYP61等4个红色荧光蛋白融合表达载体,并且成功在拟南芥叶肉细胞原生质体中瞬时表达。
- 王文旭郁飞
- 关键词：红色荧光蛋白融合表达载体亚细胞定位
- 玉米MATE基因在植物生长发育和下胚轴伸长中的调控作用
- 2018年
- 【目的】研究玉米多药及有毒化合物外排家族(multidrug and toxic compound extrusion,MATE)基因ZmMATE884(GRMZM2G423884)在植物生长发育阶段的功能。【方法】以玉米全基因组DNA为模板克隆玉米MATE蛋白家族基因ZmMATE884,通过蛋白同源比对,预测其可能的跨膜结构域,并通过定量RT-PCR分析该基因的表达模式;构建ZmMATE884融合荧光蛋白瞬时表达载体,转化拟南芥叶肉细胞原生质体,进行亚细胞定位分析;通过农杆菌侵染技术,构建ZmMATE884基因的拟南芥转基因过表达系,观察表型;将ZmMATE884基因的拟南芥转基因过表达系与野生型种子分别种植于含质量分数1%蔗糖和不含糖的1/2 MS固体培养基上,分别黑暗培养6d和光照培养7d后,观测统计下胚轴的伸长情况。【结果】ZmMATE884基因在玉米根、上枝叶、下枝叶和胚中有较高表达;ZmMATE884蛋白部分定位于高尔基体/内体上;ZmMATE884基因的拟南芥过表达转基因植株表现为莲座叶发生速率加快且开花提前;在无糖和含质量分数1%蔗糖的1/2 MS固体培养基上黑暗生长6d及光下生长7d后,ZmMATE884基因的拟南芥转基因过表达系下胚轴明显短于野生型。【结论】玉米ZmMATE884基因参与了植物生长发育的调控,可加快莲座叶发生,促使植物提前开花,同时还参与下胚轴伸长的负调控。
- 薛盛祥贾敏郁飞
- 关键词：玉米下胚轴
