赵志荀 作品数:126 被引量:128 H指数:6 供职机构: 中国农业科学院兰州兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 甘肃省自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
一种猪A型塞内卡病毒中和性抗体、竞争ELISA检测试剂盒及检测方法 本发明提供了一种猪A型塞内卡病毒中和性抗体,利用上述抗体制备的SVA竞争ELISA检测试剂盒及相应检测方法,所述检测试剂盒包括:包被有猪A型塞内卡病毒中和性单克隆抗体1M5并捕获抗原的反应板,生物素标记的猪A型塞内卡病毒... 孙普 马雪青 卢曾军 付元芳 黄嘉馨 李坤 李冬 宋雅丽 李平花 张婧 包慧芳 曹轶梅 赵志荀 王健 白兴文 刘在新一种检测口蹄疫A型病毒的试剂盒及制备和使用方法 本发明公开一种用于检测口蹄疫A型病毒的试剂盒,及试剂盒制备方法和这种试剂盒的非疾病诊断目的的使用方法。本发明的扩增口蹄疫A型病毒的引物的基因序列有四条;本发明的检测口蹄疫A型病毒的试剂盒内包括有前述基因序列的四条引物。相... 张强 卢昌 赵志荀 吴国华 颜新敏 李应国 岳华 周晓黎 李健 朱海霞 代雪玲 田波 芦晓立 高顺平 王曼文献传递 鉴别检测绵羊痘病毒和山羊痘病毒的试剂盒 本发明公开一种用于鉴别检测绵羊痘病毒和山羊痘病毒的试剂盒。本发明的鉴别绵羊痘病毒和山羊痘病毒检测盒内包括有三组引物:SEQID№1、SEQID№2、SEQID№3、SEQID№4、SEQID№5、SEQID№6、SEQI... 赵志荀 张强 范斌 吴国华 颜新敏 李健 朱海霞 芦晓立 孙晓林 刘发央文献传递 羊痘病毒复制过程中脱壳机理的研究 张强 赵志荀 颜新敏 吴国华 王建科 马维民 朱海霞 朱彩珠 李健 于少雄 王曼 该成果包括以下几个方面的内容: 1.初步确定病毒进入宿主细胞后开始复制的时间。接种不同的羊痘病毒后,通过免疫荧光技术分析病毒感染不同时间点的的复制水平,初步确定初病毒进入宿主细胞后开始复制的时间。 2.完成羊痘病毒8个R...关键词: 关键词:羊痘病毒 药物设计 一种沉默HS3ST5基因表达的shRNA及其重组慢病毒载体和应用 本发明提供了一种沉默HS3ST5基因表达的shRNA及其重组慢病毒载体和应用,属于基因沉默技术领域。本发明设计2种沉默HS3ST5基因表达的shRNA,并构建携带所述shRNA的重组慢病毒质粒,利用包装出重组慢病毒建立了... 袁红 白兴文 卢曾军 黄磊 宫晓华 刘在新 孙普 李平花 包慧芳 李冬 马雪青 陈应理 曹轶梅 付元芳 赵志荀 张婧 王健分泌抗PRRSV抗体的猪源单克隆B细胞永生化方法的建立 被引量:2 2022年 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的高度接触性传染疾病,对社会经济造成重大损失。目前并未获得有效的中和抗体应用于科研及治疗中,所以建立一种筛选具有中和活性的单克隆抗体的方法,对PRRSV防治及抗原位点筛选具有重要意义。单克隆抗体在人类和动物的众多疾病治疗及诊断中得到广泛应用,而针对不同病原如何筛选出有效的中和抗体是目前急需解决的问题。在单克隆抗体筛选的众多方法中,B细胞永生化方法是一种有效的且大概率能获得单克隆中和抗体的方法。通过将bcl-6和bcl-xl两个基因中间通过f2a序列连接后构建到一个载体上,进行逆转录病毒包装。包装成熟的逆转录病毒感染免疫PRRSV的猪源淋巴细胞,并使用加入CD40L和IL21细胞因子的完全培养基培养,然后使用CD21作为筛选标记通过磁珠法进行B细胞筛选,最后对筛选得到的B细胞单克隆化并进行检测,验证是否有抗体分泌。结果显示,构建的质粒不论单独转染还是与病毒包装时的两种质粒共同转染,均可以成功表达,且包装病毒可成功感染细胞。感染后的淋巴细胞可以检测到抗体分泌,进一步筛选得到的B细胞也可以检测到抗体分泌。因此,本研究成功建立了一种针对PRRSV的单克隆抗体筛选方法。 王健 张婧 李坤 孙普 李国秀 李娇阳 曹轶梅 赵志荀 袁红 付元芳 李平花 李冬 刘在新 卢曾军关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 磁珠法 一种针对当前流行毒株的O型口蹄疫病毒复合表位蛋白疫苗及应用 为了克服口蹄疫灭活疫苗潜在的生物安全风险以及提高口蹄疫疫苗与流行毒株的匹配度,本发明提供了一种O型口蹄疫病毒复合表位蛋白疫苗及应用。该疫苗由O型口蹄疫病毒复合表位蛋白和佐剂混合、充分乳化后制备而成;O型口蹄疫病毒复合表位... 卢曾军 袁红 白兴文 焦云娟 曹轶梅 杨宇轩 李坤 李平花 包慧芳 孙普 李冬 马雪青 赵志荀 付元芳 刘在新山羊痘病毒A6L基因的克隆及序列分析 被引量:2 2015年 为了分析山羊痘病毒A6蛋白的分子特征,本试验提取了山羊痘病毒古浪分离株的基因组DNA,设计引物进行PCR扩增,克隆A6L基因的DNA序列。将PCR产物连接到pGEM-T Easy载体后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆进行序列测定,利用生物信息学软件对A6L基因序列进行预测分析。结果显示,A6L基因序列含有1个由1 128个核苷酸组成的开放阅读框,编码375个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质分子质量的理论值为43.68ku,理论等电点为7.50。该蛋白的二级结构中,α螺旋占53.30%,β折叠占10.24%,其余39.46%为无规则卷曲。多序列比对分析结果显示,不同羊痘病毒分离株A6L序列高度保守,同源性在97%以上。上述研究结果为进一步研究A6蛋白的生物学功能和羊痘病毒早期蛋白的分子相互作用奠定了基础。 赵银龙 吴国华 朱海霞 吴健 颜新敏 赵志荀 李健 吴娜 穆晓峰 张强关键词:山羊痘病毒 基因克隆 靶向抑制羊痘病毒ORF095基因的siRNA序列 本发明公开四个靶向抑制羊痘病毒ORF095基因的siRNA序列,以及这个序列的用途。本发明的四个靶向抑制羊痘病毒ORF095基因的序列分别是基因序列为SEQ.NO.1的siRNA-61,基因序列为SEQ.NO.2的siR... 张强 赵志荀 吴国华 颜新敏 李健 朱海霞 崔立凡 高顺平 才学鹏文献传递 山羊痘病毒ORF014蛋白的结构预测及其真核表达 被引量:1 2014年 以山羊痘病毒古浪株基因组DNA为模板,经PCR扩增,获得山羊痘病毒ORF014基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-)/Myc-His(-)B,通过脂质体法将重组质粒转入Vero细胞,Western-blot分析目的基因表达情况。使用WabLab、SWISS-MODEL和ExPASY等在线软件预测GTPV014蛋白的功能结构域和二、三级结构以及氨基酸组成,对其作为凋亡抑制蛋白的真实性、可靠性做出理论上的判断。结果显示,重组表达载体可以在Vero细胞中表达出大小约为20ku的重组融合蛋白,该蛋白具有与黏液瘤病毒M11L蛋白相似的一些结构特征。上述结果为GTPV014蛋白在山羊痘病毒感染过程中抑制凋亡的研究提供了一些理论依据。 卢昌 吴国华 颜新敏 赵志荀 王曼 吴娜 朱海霞 李健 张强关键词:山羊痘病毒 真核表达