许茂轩
- 作品数:8 被引量:19H指数:3
- 供职机构:海南大学农学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 联合基因Survivin、CDK1的shRNAs靶向干扰对鼻咽癌CNE-2细胞增值的影响被引量:11
- 2014年
- 为了构建具有干扰效应的靶向Survivin和CDK1基因及两者串联的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体,并研究其靶向干扰对鼻咽癌细胞CNE-2生物学行为的改变。本研究通过构建pU6-SurvivinshRNA、pU6-CDK1shRNA和pU6-SurvivinshRNA-CDK1shRNA重组载体,用脂质体Lipofectamine 2000法将其转染入CNE-2细胞株中,应用RT-PCR方法初步筛选具有干扰效应的重组载体,逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Survivin、CDK1 mRNA的基因表达水平,Western blot检测Survivin和CDK1蛋白表达以及噻唑蓝溴化四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测癌细胞增殖活性的变化。结果表明:成功构建具有干扰效应的shRNAs表达载体;联合或单基因Survivin、CDK1的shRNAs表达载体干扰CNE-2细胞后,其对应的mRNA和目的蛋白表达均降低,CNE-2癌细胞增殖活性降低,联合基因shRNAs表达载体具有一定程度的干扰增强作用。
- 陈淑萍周红桃蔡俊宏王福利许茂轩符生苗
- 关键词:鼻咽癌CNE-2
- 鼻咽癌放射治疗敏感性相关基因的研究进展被引量:3
- 2012年
- 放射治疗是鼻咽癌治疗的主要手段之一,而鼻咽癌细胞的放射敏感性是放射治疗成败的关键。随着分子生物学的发展,发现鼻咽癌细胞内许多基因的异常表达与放射敏感性密切相关,甚至影响鼻咽癌患者的放疗疗效。鼻咽癌放射敏感性相关基因的研究被认为是可以揭开鼻咽癌放射敏感性奥秘的钥匙,放射治疗联合基因治疗有可能成为鼻咽癌治疗的有效方法之一。现就鼻咽癌放射敏感性的相关基因及其研究进展简要综述如下。
- 符生苗许茂轩林少民
- 关键词:鼻咽癌相关基因
- Cyclin D1及Survivin蛋白表达与鼻咽癌放疗敏感性的关系
- 目的研究Cyclin D1和Survivin的蛋白表达与鼻咽癌放疗敏感性的关系。方法利用免疫组化技术检测Cyclin D1和Survivin在鼻咽癌放疗敏感组和不敏感组放疗前标本中的蛋白表达情况。结果 72例病例标本中,...
- 许茂轩林少民梁茱蔡俊宏符生苗
- CyclinD和1Survivin蛋白表达与鼻烟癌放疗敏感性的关系
- 目的研究Cyclin D1和Survivin的蛋白表达与鼻咽癌放疗敏感性的关系。方法利用免疫组化技术检测Cyclin D1和Survivin在鼻咽癌放疗敏感组和不敏感组放疗前标本中的蛋白表达情况。结果 72例病例标本中,...
- 许茂轩林少民梁茱蔡俊宏符生苗
- Survivin基因及CDK1基因联合靶向shRNA真核表达载体的构建
- 目的 shRNA干扰技术可以使细胞出现靶基因沉默,具有高特异性、高效性、低毒性等特点现已广泛应用于生物医学研究的各个领域,为快速下调靶基因表达的有效手段之一.shRNA干扰技术有望成为治疗肿瘤治疗的新手段,但仍需解决诸多...
- 陈淑萍符生苗蔡俊宏李成学周红桃王福利许茂轩
- 关键词:SURVIVIN基因
- Cyclin D1及Survivin表达与鼻咽癌放疗敏感性的相关性研究
- 目的:鼻咽癌是一种以放射治疗为主的恶性肿瘤,由于不同个体的病人存在着放疗敏感性的差异,故探索预测鼻咽癌病人放射敏感性的指标,对制定合理的个体化放疗方案具有重要意义。本实验旨在探讨Cyclin D1和Survivin的表达...
- 许茂轩
- 关键词:SURVIVIN鼻咽癌放疗敏感性
- 文献传递
- Survivin基因及CDK1基因联合靶向shRNA真核表达载体的构建被引量:1
- 2014年
- 目的构建靶向Survivin基因及CDK1基因的短发夹样RNA(Short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体。方法根据Genbank报道的Survivin序列及CDK1序列,遵循shRNA设计原则设计并合成各自靶向的Survivin、CDK1基因的shRNA寡核苷酸序列,构建pU6-shRNA-Survivin重组质粒、pU6-shRNA-CDK1重组质粒及pU6-shRNA-Survivin-U6-shRNA-CDK1双基因序列串联重组质粒,并进行限制性内切酶酶切及基因测序鉴定。结果经酶切及测序结果分析,pU6-shRNA-Survivin重组质粒、pU6-shRNA-CDK1重组质粒及pU6-shRNA-Survivin-U6-shRNA-CDK1双基因系列串联重组质粒均成功构建。结论成功构建Survivin基因及CDK1基因联合靶向shRNA重组质粒,为进一步研究Survivin基因和CDK1基因联合干扰提供了新的方法。
- 陈淑萍符生苗周红桃蔡俊宏李成学王福利许茂轩
- 关键词:SURVIVIN基因
- CyclinD1及Survivin蛋白表达与鼻咽癌放疗敏感性的关系被引量:4
- 2012年
- 目的研究CyclinDl和Survivin蛋白表达与鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)放疗敏感性的关系。方法选取72例NPC患者放疗前活检组织标本(其中放疗敏感组49例,放疗不敏感组23例).常规HE染色确定组织分型;免疫组化技术S-P法检测CyclinD1和Survivin蛋白表达情况;应用统计学软件进行统计学分析。结果72例NPC患者标本中,30例CyclinD1蛋白高表达,阳性表达率为41.7%。在NPC放疗敏感组和放疗不敏感组的高表达率分别为28.6%(14/49)和69.6%(16/23),两组比较差异有统计学意义(P〈0.05);72例NPC患者标本中,34例Survivin蛋白高表达,阳性率为4712%,在放疗敏感组和放疗不敏感组高表达率分别为34.7%(17/49)和73.9%(17/23),两组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。CyclinD1和Survivin蛋白的表达在NPC患者中呈正相关性,r=0.353(P〈0.05)。结论CyclinD1和Survivin蛋白的表达与NPC放射敏感性呈负相关。CyclinD1和Survivin可以作为预测NPC患者放疗敏感性的分子标志物。
- 许茂轩林少民梁茱蔡俊宏符生苗
- 关键词:CYCLIND1鼻咽癌放疗敏感性