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人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型、细胞系建立及其生物学特性研究被引量：5: 2001年; 目的　建立人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和相应体外细胞系。方法　将病理证实的人卵巢浆液性乳头状腺癌手术切除标本移植于SCID小鼠皮下 ,成瘤后行鼠间传代 ,取移植瘤细胞体外分离培养、传代和建系 ,并应用细胞、分子生物学手段对移植瘤和建系细胞进行一系列生物学特性检测。结果　历时 14个月传至 5代 ,皮下移植瘤存活率为 90 % ,持续 6个月 ,体外建系 (OVA 319)细胞生长稳定。镜下观察组织形态学和超微结构符合原肿瘤组织基本特征 ;染色体分布在 12～ 46条之间 ,多为异倍体 ,显示人类肿瘤异常染色体 ;流式细胞术和RT PCR技术分析原代、体内移植瘤和OVA 319细胞结果一致 ,表现为瘤细胞生长活跃、细胞周期分布相仿 ,MAGE 2基因在mRNA水平异常表达。结论　人卵巢癌SCID小鼠移植瘤模型和OVA; 葛海良冯荻马安伦张惠珍王颖袁明蔡晓敏; 关键词：SCID小鼠人卵巢癌移植瘤模型细胞系人类肿瘤生物学特性研究

SEREX肿瘤抗原基因表达蛋白的研制和血清学初步筛选被引量：4: 2002年; 目的 :利用基因工程方法获得SEREX肿瘤抗原基因原核表达蛋白 ,为进一步血清学分析奠定基础。方法 :采用SEREX方法 ,筛选中国人卵巢癌cDNA表达文库。对获得的 3个阳性克隆基因MY OVA 2、MY OVA 7和MY OVA 13,利用基因工程的方法克隆其全长基因 ,原核表达和亲和层析获得目的蛋白 ,并采用Dot blot的方法初步检测了目的蛋白抗原在正常人和肿瘤患者中的血清学反应格局。结果 :获得了纯化的目的蛋白 ,采用点杂交对 13例正常人和 74例肿瘤患者血清的测定结果显示 ,MY OVA 13的抗体只在肿瘤组中检测到 ,在正常组中为阴性 ;MY OVA 2和MY OVA 7在两组人群的血清中自身抗体检出率均呈现阳性 ,不同的肿瘤类型的阳性率各不相同。结论; 张惠珍王颖袁明王树军季萍周光炎葛海良; 关键词：卵巢癌肿瘤抗原血清学基因表达

从卵巢癌cDNA文库中筛选新的肿瘤标志物被引量：10: 2002年; 采用SEREX法筛选了自行构建的中国人卵巢癌cDNA表达文库 ,得到 2 7个阳性克隆 ,其中 3个为全长cDNA。序列分析和同源性比对结果表明所获得的 2 7个克隆分属于分化抗原、细胞结构蛋白及功能未知三类。选择其中一个全长cDNAMY OVA 13(该基因编码的蛋白是MAD2 ) ,利用基因工程方法克隆、表达和纯化得到目的蛋白 ,采用点杂交方法检测了MY OVA 13目的蛋白与正常人和肿瘤患者中的血清学反应。MY OVA 13抗体只在肿瘤组中检测到 (5 / 74 ) ,在正常组中均为阴性 ;间接ELISA测定结果显示 ,MY OVA 13抗体的水平在肿瘤组中均高于正常组 ,其中肝癌和前列腺癌组与正常组相比 ,在统计学上有显著差异 ,P值分别 <0 0 1和 <0 0 5。我们的初步结果表明MY OVA 13及其抗体具有一定的肿瘤特异性。; 王颖葛海良袁明张惠珍王树军马安伦尤强周光炎; 关键词：卵巢癌 CDNA文库肿瘤标志物 SEREX

从卵巢癌cDNA表达文库筛选肿瘤抗原基因的研究被引量：15: 2001年; 目的利用肿瘤患者自体血清筛选患者肿瘤cDNA表达文库SEREX,寻找肿瘤特异性抗原是肿瘤免疫学研究的新策略,由此方法所获B细胞抗原肽可为进一步寻找T细胞抗原肽,开展肿瘤免疫治疗和诊断提供线索。方法采用SEREX方法,筛选中国人卵巢癌cDNA表达文库。对获得的阳性克隆片段测序鉴定和进行BLAST同源性比较。采用RTPCR,分析正常组织和肿瘤组织及肿瘤细胞株中6个新的EST片段的表达。结果所获基因片段大多数为已知抗原基因20/27。根据其来源又可归类为结构基因、线粒体基因和调控基因。另外,获得6个未知的EST片段。RTPCR的结果表明,4个ESTEST8788、1750、1754和3533片段在肿瘤和正常组织中均有表达,2个EST在正常组织中未见表达,而在肿瘤组织中有表达,可能是与肿瘤相关或特异的EST片段。结论SEREX方法不失为一种有效筛选卵巢癌肿瘤抗原的新方法,所获肿瘤抗原候选基因,可进一步进行结构和功能的研究。; 袁明王颖张惠珍王树军张笑人尤强马安伦冯荻周光炎葛海良; 关键词：卵巢癌肿瘤抗原基因表达

肿瘤基因表达谱——肿瘤免疫学研究的新策略被引量：3: 2002年; 基因表达谱代表了细胞中基因表达的状况。通过比较肿瘤细胞和相应正常组织细胞的基因表达谱所获得的信息 ,就可获得在肿瘤和正常细胞中差异表达的基因 ,进一步研究这些基因的结构和功能 ,对研究肿瘤的发生发展和肿瘤的临床诊断和治疗都具有重要的意义。本文着重介绍了目前常用的研究肿瘤基因表达谱的各种方法 ,包括 m RNA水平和蛋白质水平肿瘤基因表达谱的研究方法。; 王颖袁明葛海良; 关键词：肿瘤免疫学肿瘤基因图谱基因表达调控

人卵巢癌中三种MAGE家族基因表达和患者HLA表型的初步分析被引量：4: 2001年; 分析卵巢癌中MAGE家族基因成员MAGE 1, 2 , 3基因mRNA表达和患者HLAI类分子表型 ,为卵巢癌的免疫治疗提供依据。应用RT PCR技术检测卵巢癌和正常组织中MAGE 1, 2 , 3基因mRNA表达 ,同时采用血清学方法检测卵巢癌患者HLAI类分子表型 ,并分析基因表达和HLAI类分子表型分布的相互关系。 31例卵巢癌中阳性表达率分别MAGE 1为7/31(2 3% ) ,MAGE 2为 2 0 /31(64% )和MAGE 3为 6/31(19% ) ,其中至少一种MAGE基因表达为 2 7/31(90 % ) ,而正常组织除睾丸外未见任何一种基因表达。患者的HLAI类分子表型多为HLA A2、A11、A19和B15、B35、B40。对卵巢癌中MAGE 1, 2 , 3基因特异性表达分析和HLAI类分子表型的鉴定。; 葛海良王颖刘文文王树军冯荻马安伦张惠珍袁明; 关键词：MAGE基因卵巢癌

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袁明