蔡利军
- 作品数：5 被引量：19H指数：3
- 供职机构：华中农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划湖北省科技攻关计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- Asia Ⅰ口蹄疫vp2蛋白单克隆抗体的制备及单抗竞争ELISA方法的建立被引量：6
- 2008年
- 制备AsiaI口蹄疫病毒vp2单克隆抗体(mAb)并建立了单抗竞争ELISA方法。用纯化的AsiaI型口蹄疫病毒vp2重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合,采用间接ELISA和有限稀释法筛选杂交瘤细胞。分别用ELISA、Western blotting检测mAb腹水的效价及其特异性。筛选到杂交瘤细胞2株,腹水效价均在100×29以上;以纯化后的AsiaI型口蹄疫病毒vp2重组蛋白作为抗原,利用AsiaI型口蹄疫病毒vp2单抗酶标物建立了竞争ELISA方法用来检测AsiaI型口蹄疫抗体。临床应用表明,该方法与UBI公司的口蹄疫全病毒抗体检测试剂盒总符合率达89.0%,和荷兰赛迪公司的口蹄疫病毒LPB-ELISA抗体检测试剂盒总符合率达86.5%。
- 向敏张克山卢顺蔡利军罗勇张建民何华王勤刚吴斌
- 关键词：口蹄疫单抗竞争ELISA单克隆抗体VP2蛋白
- 致猪水肿病大肠杆菌毒力因子二重PCR检测方法的建立及应用被引量：5
- 2008年
- 本试验分别针对志贺样毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)B亚基和F18ab菌毛fedA亚基保守序列设计2对引物,扩增长度分别为230 bp和510 bp,通过条件优化,建立了一种快速鉴定致猪水肿病大肠杆菌同时确定其致病因子的二重聚合酶链式反应(PCR)检测方法,对阳性扩增产物测序,结果都有很高的保守性。特异性试验和灵敏性试验表明:与其他6种猪常见致病菌(产毒多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、波氏杆菌、副猪嗜血杆菌、沙门菌和链球菌)无交叉反应;菌体直接扩增法最低检出量为101cfu(D600为0.002)。通过该二重PCR检测方法对2004—2006年自猪肺、脑组织中分离的216株大肠杆菌进行鉴定,得到6株致猪水肿病大肠杆菌,其中3株既具有菌毛又产水肿毒素,另外3株仅产水肿毒素;菌毛阳性菌株占毒素阳性菌株的50%。
- 杨明柳吴斌汤细彪蔡利军刘国平蔡旭旺陈焕春
- 关键词：聚合酶链式反应
- 口蹄疫非结构蛋白3ABC单克隆抗体的制备及初步应用
- 本研究制备了3ABC蛋白的单克隆抗体，建立了针对口蹄疫(FMD)的非结构蛋白3ABC的单抗捕获ELISA和竞争ELISA方法。经临床试验证明，这两种方法均具有较高的敏感性和特异性，可以用于临床检测。具体研究情况如下：
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- 蔡利军
- 关键词：口蹄疫病毒单克隆抗体抗体检测
- 文献传递
- O型口蹄疫多基因重组腺病毒的构建及其免疫原性被引量：1
- 2009年
- 根据GenBank公布的序列设计1对引物扩增O型口蹄疫病毒P12A3C基因并亚克隆至腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV内。含有目的基因的穿梭质粒(pShuttle-PAC)线性化后和腺病毒骨架载体pAdeasy-1共同电转化入大肠杆菌BJ5183感受态细菌。利用细菌内同源重组法得到重组腺病毒质粒(pAd-PAC)。在Lipofectamine 2000介导下重组腺病毒质粒转染HEK293细胞得到重组腺病毒(Ad-PAC)。半数组织培养感染剂量(TCID50)测定、免疫荧光试验(IFA)和连续传代后目的基因的PCR扩增,证实重组病毒滴度为105.5TCID50/0.1 mL,重组病毒HEK293细胞中得以表达且遗传稳定性良好;动物试验表明,该重组病毒能够诱导小鼠产生较高水平的针对口蹄疫病毒的特异性抗体;本试验为口蹄疫重组腺病毒活载体疫苗的进一步研究和应用奠定了基础。
- 张克山向敏吴斌徐卓菲蔡利军王勤刚陈焕春
- 关键词：口蹄疫病毒腺病毒重组病毒免疫原性
