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小鼠FcγRⅢ线性配体结合表位: 本发明涉及小鼠mFcγRIII线性配体结合表位，该表位的氨基酸序列为Cys Ser Phe PheHis Asn Glu Lys Ser Val Arg Tyr His。本发明以化学合成多肽分析鉴定小鼠FcγRIII的线...; 张改平张利娜席俊郭军庆苗现伟赵东乔松林杨艳艳郅玉宝刘运超王方雨王丽邓瑞广; 文献传递

人FcγRⅡ线性配体结合表位: 本发明涉及人FcγRII线性配体结合表位，该表位的氨基酸序列为Cys－Thr－Gly－Asn－Ile－Gly－Tyr－Thr－Leu－Phe－Ser－Ser－Lys－Pro－Val－Thr－Ile－Thr－Val，本发明...; 张改平席俊郭军庆王选年赵东杨艳艳张利娜苗现伟乔松林张红郅玉宝邓瑞广; 文献传递

人FcγRⅡ线性配体结合表位: 本发明涉及人FcγRII线性配体结合表位，该表位的氨基酸序列为Cys-Thr-Gly-Asn-Ile-Gly-Tyr-Thr-Leu-Phe-Ser-Ser-Lys-Pro-Val-Thr-Ile-Thr-Val，本发明...; 张改平席俊郭军庆王选年赵东杨艳艳张利娜苗现伟乔松林张红郅玉宝邓瑞广; 文献传递

猪口蹄疫的诊断及预防被引量：1: 2008年; 猪口蹄疫是由小核糖核酸病毒引起的偶蹄兽的一种急性、热性和高度接触性的传染病。临诊上以猪口腔黏膜、鼻吻部、蹄部及乳房皮肤发生水泡和溃烂为特征。发病率很高，传染快，流行面大，对仔猪可引起大批死亡，造成严重的经济损失。; 苗现伟; 关键词：猪口蹄疫口腔黏膜经济损失传染病偶蹄兽

人FcγRⅡ真核表达质粒的构建及稳定转染细胞系的建立: 2008年; 目的:建立稳定表达人FcγRⅡ(human Fc gamma receptor Ⅱ,huFcγRⅡ)的真核细胞系,为后续研究奠定基础。方法:采用RT-PCR方法从人外周血白细胞合成FcγRⅡcDNA,构建huFcγRⅡ表达质粒pcDNA3-huFcγRⅡ,经酶切和PCR鉴定后,将pcDNA3-huFcγRⅡ质粒通过脂质体转染法转染COS7细胞,并经G418筛选获得稳定表达huFcγRⅡ的细胞克隆。采用免疫荧光法和玫瑰花环试验检测huFcγRⅡ的表达。结果:构建的pcDNA3-huFcγRⅡ真核表达质粒经酶切鉴定与预期一致,稳定转入COS7细胞后,经免疫荧光染色,约90%的转染细胞可见荧光,而未转染的COS7对照细胞未见荧光。结论:成功构建pcDNA3-huFcγRⅡ真核表达质粒,建立了稳定表达huFcγRⅡ的细胞系,为进一步研究奠定了基础。; 席俊张改平张利娜张红乔松林苗现伟何礼洋张乃生; 关键词：COS7细胞免疫荧光检测

人FcγRⅠ受体胞外区基因的克隆、原核表达及纯化被引量：1: 2010年; 目的:探讨人FcγRⅠ(huFcγRⅠ)胞外区蛋白的原核表达纯化及其在体外与IgG的结合活性。方法:PCR方法从人的外周血白细胞中扩增出huFcγRⅠORF区全长基因并与T载体链接,从克隆载体huFcγRⅠ-T中扩增huFcγRⅠ胞外区基因,并将其装入原核表达载体pGEX-6p-1。构建好的载体转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导重组蛋白表达,并利用SDS-PAGE和Western blot对表达的蛋白进行鉴定。结果:扩增到了huFcγRⅠ的胞外区基因,所构建的pGEXhuFcγRⅠ重组质粒经PCR和酶切鉴定与预期一致。IPTG诱导下目的蛋白的表达率约为30%。SDS-PAGE结果显示表达的目的相对分子质量(Mr)56 700与理论预期值一致。West-ern blot结果显示原核表达的huFcγRⅠ胞外区蛋白与人IgG特异亲和。结论:FcγRⅠ(huFcγRⅠ)胞外区蛋白在原核表达系统中得到有效的表达,复性蛋白在体外与人的IgG特异结合。; 苗现伟刘玺张改平席俊张利娜刘运超游雷鸣赵玉军; 关键词：原核表达

小鼠FcγRⅢ原核表达、纯化及鉴定: 2009年; 目的:制备纯化重组蛋白mFcγRⅢ,并鉴定其生物学活性。方法:从克隆载体mRⅢ-T中扩增mFcγRⅢ胞外区,构建原核表达载体pETmRⅢ,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE和Westernblot对重组表达蛋白进行鉴定;表达产物通过包涵体纯化后用稀释方法复性;ELISA检测复性蛋白活性。结果:成功构建了重组表达质粒pETmRⅢ,纯化和复性了重组蛋白mFcγRⅢ;复性的重组蛋白mFcγRⅢ具有较强的体外活性。结论:原核重组蛋白mFcγRⅢ复性后具有较强的体外结合配体特性,为探索重组蛋白治疗自身免疫病奠定了基础。; 张利娜张改平席俊苗现伟王丽乔松林; 关键词：原核表达包涵体复性

人FcγRⅠ的原核表达、真核表达及线性结合表位的初步鉴定: Fc受体(FcR)是特异亲和免疫球蛋白(Ig)Fc片段的细胞表面分子,在免疫辅助细胞和效应细胞均有表达,具有许多重要的生理功能,是细胞免疫与体液免疫的联系纽带,在机体免疫调节中起主要作用。抗体介导的炎性反应可通过抑制型和...; 苗现伟; 关键词：真核表达原核表达; 文献传递

原核表达、稀释复性的人FcγRⅡa恢复IgG的结合功能: 2008年; 目的探讨原核表达稀释复性的可溶性人FcγRⅡa（shuFcγRⅡa）的胞外区蛋白在体外与配体的结合活性。方法应用PCR技术从重组质粒pc3huRⅡ中扩增huFcγRⅡa的胞外区基因，将其克隆于原核表达载体pET-28a中。所构建的重组质粒经PCR和酶切鉴定后转化大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导表达，制备融合蛋白包涵体。并采用多次洗涤法分离和纯化包涵体，用稀释法对纯化后的目的蛋白进行复性，ELISA和流式细胞术测定重组shuRⅡ在体外与配体的结合活性。结果扩增到了huFcγRⅡa的胞外区基因，所构建的pETshuRⅡ重组质粒经PCR和酶切鉴定与设计序列一致。转化B121（DE3）后，IPTG诱导目的蛋白表达率约为30％。SDS-PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量（Mr）约为24．8×10^3，与理论预期值一致。破菌后电泳证实目的蛋白主要以包涵体形式表达，经多次洗涤后蛋白纯度大于90％。ELISA法测得重组shuRⅡ与人IgG在体外有良好的结合活性，流式细胞术测得重组shuRⅡ对配体与受体结合有抑制作用。结论本复性方法可得到和天然蛋白类似生物学活性的目的蛋白。; 席俊张改平张利娜苗现伟乔松林张红何礼洋游雷鸣郑彦君; 关键词：原核表达复性

小鼠FcγRⅢ线性配体结合表位多肽: 本发明涉及小鼠mFcγRIII线性配体结合表位多肽，该表位多肽的氨基酸序列为Cys SerPhe Phe His Asn Glu Lys Ser Val Arg Tyr His。本发明以化学合成多肽分析鉴定小鼠FcγRI...; 张改平张利娜席俊郭军庆苗现伟赵东乔松林杨艳艳郅玉宝刘运超王方雨王丽邓瑞广; 文献传递

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苗现伟