胡廉
- 作品数:50 被引量:122H指数:7
- 供职机构:华中科技大学同济医学院计划生育研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项湖北省研究与开发计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生理学生物学农业科学更多>>
- 鼠巨细胞病毒感染对雄性小鼠生殖性激素水平的影响被引量:1
- 2008年
- 目的研究鼠巨细胞病毒(MCMV)感染后雄性小鼠生殖性激素水平的变化,探讨MCMV感染影响雄性生殖功能的可能机制。方法选择无McMV活动感染的雄性小鼠,睾丸接种MCMV或不合MCMV的细胞培养液,设立实验组与对照组,采用放射免疫法检测接种后不同时段(小鼠一个生精周期内)的小鼠血清及睾丸组织内性激素含量,并进行比较。结果睾丸匀浆组织T浓度在MCMV感染第4~9d显著降低(P〈0.05),第14~21d有一短暂恢复过程,第38d又较对照组下降(P〈0.05)。血清LH浓度在MCMV感染的第4、9、14d显著升高(P〈0.05),其它时间点比较差异无统计学意义(P〉0.05)。而感染不同时期的血清T和FSH比较差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论MCMV急性感染可引起雄鼠生殖内分泌激素水平的改变:通过影响其下丘脑-垂体-性腺轴的调节导致雄鼠生殖功能障碍。
- 徐利文熊锦文赵玉梅徐红吴昌杰胡廉熊承良
- 关键词:鼠巨细胞病毒睾丸性激素下丘脑-垂体-性腺轴
- 小鼠睾丸巨细胞病毒感染对精子顶体反应与膜功能的影响被引量:10
- 2005年
- 目的探讨小鼠睾丸巨细胞病毒(MCMV)感染对附睾尾部精子顶体反应与膜功能的影响。方法随机选择无MCMV感染史的BALB/c雄性小鼠48只作为实验组,睾丸直接接种MCMV,分别于感染后第1、2、4、6、9、14天处死小鼠,用地高辛标记的MCMVM83mRNA寡核苷酸探针对睾丸组织进行原位杂交,检测睾丸MCMV感染情况,同时取附睾尾部成熟精子进行精子顶体反应与精子膜低渗肿胀功能检测。另设平行对照组雄性小鼠30只(同法随机选择),睾丸接种不含MCMV的细胞培养液,其他处理方法同实验组。结果实验组48只雄性小鼠睾丸组织间质及(或)生精细胞中均出现原位杂交阳性信号。实验组精子顶体反应与膜功能在接种病毒后的第2天、第4天,精子顶体反应率(58%±9%、56%±9%)低于平行对照组(71%±6%、70%±7%)(P均<0.05),精子膜尾部低渗肿胀率(48%±9%、38%±8%)低于平行对照组(60%±7%、50%±4%)(P均<0.05)。结论小鼠睾丸MCMV感染模型成功建立。小鼠睾丸MCMV急性感染可导致精子顶体反应与膜功能的显著下降。
- 熊锦文熊承良田永红李双徐惠敏胡廉丁晓芳
- 关键词:精子顶体反应小鼠睾丸巨细胞病毒感染MCMV地高辛标记成熟精子
- HSP70在小鼠睾丸巨细胞病毒感染中的表达及作用被引量:1
- 2011年
- 目的研究鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)感染的不同时期细胞因子热休克蛋白70(heat shockprotein 70,HSP70)在小鼠睾丸组织中的表达,探讨HSP70在MCMV致病机制及机体抵御MCMV感染中的可能作用。方法建立小鼠睾丸MCMV急性感染模型,采用免疫组织化学SP法检测不同感染时段的睾丸组织内HSP70的表达与定位,分析其表达情况与病毒增殖及睾丸病变程度的相关性。结果接种病毒后不同时期的睾丸组织中HSP70表达程度不同,MCMV感染第1天起其表达开始增加(P<0.01),感染的第6~9天增至高峰(P<0.01),此时MCMV增殖程度最重,睾丸组织发生最为严重的病理性炎性改变。随感染时间延长,HSP70表达水平下降,病毒增殖减少,睾丸组织病损程度减轻。结论 MCMV感染时,HSP70在睾丸组织中的表达与MCMV增殖及睾丸组织病变程度相关,提示HSP70可能参与MCMV感染的致病机制及机体抵御MCMV感染机制。
- 熊锦文赵玉梅徐红于建萍胡廉官黄涛熊承良
- 关键词:鼠巨细胞病毒睾丸热休克蛋白70
- 异丙苯过氧化氢体内致大鼠睾丸和附睾过氧化的初步研究被引量:3
- 2006年
- 目的:建立异丙苯过氧化氢(cHP)体内过氧化模型,探讨cHP体内过氧化对大鼠睾丸组织和附睾精子的影响,及对精子核DNA断裂的影响。方法:90日龄雄性W istar大鼠52只,设cHP 1/10 LD50、1/6 LD50、1/4 LD503个剂量组和对照组,cHP 1/10 LD50、1/6 LD50组和对照组每组大鼠12只,1/4 LD50组大鼠16只。用无菌生理盐水稀释70%cHP水剂配制,按2 m l/kg经腹腔每日1次注射,对照组给同体积生理盐水,观察一般中毒症状和体征。连续1周,最后1次给药24 h后处死动物。分光光度法测定睾丸组织匀浆、附睾头部和尾部精子丙二醛含量,用单细胞凝胶电泳检测睾丸生精上皮细胞、附睾头部和尾部精子核DNA断裂发生率,计数附睾尾部精子活动率,睾丸和附睾常规石蜡切片,苏木精-伊红染色观察病理变化。结果:给予cHP大鼠活动稍差,无死亡,1/6 LD50、1/4 LD50 cHP组体重降低明显(P<0.001)。1/6 LD50、1/4 LD50 cHP组大鼠睾丸和附睾精子丙二醛浓度均明显高于对照组,附睾尾部精子活动率均明显降低,睾丸生精上皮细胞和附睾头部精子核DNA断裂发生率明显高于对照组,附睾尾部精子核DNA断裂的发生率与对照组差异无显著性(P>0.05)。1/10 LD50 cHP组大鼠体重变化、睾丸丙二醛浓度、附睾尾部精子活动率、睾丸生精上皮细胞和附睾精子核DNA断裂与对照组比较,差异均无显著性(P>0.05)。结论:1/6 LD50、1/4 LD50 cHP能在体内使大鼠睾丸和附睾精子发生过氧化,并使细胞核DNA发生断裂,核DNA断裂的主要部位可能在睾丸组织,对附睾尾部精子核DNA断裂无明显影响。
- 李红钢廖爱华李双胡廉熊承良
- 关键词:睾丸精子过氧化损伤
- siRNA干扰小鼠睾丸支持细胞uPA表达的初步研究被引量:1
- 2012年
- 该研究在验证小鼠睾丸支持细胞TM4有内源性uPA基因表达的基础上,针对uPAmRNA靶序列设计三段不同的siRNA序列(si-uPA),通过瞬时转染TM4细胞,筛选确定uPA基因的有效干扰序列。将该有效干扰序列进行时效、量效实验,观察siRNA对TM4细胞uPA mRNA和蛋白表达的影响。结果显示,siRNA的最佳转染浓度为50 nmol/L。三种si-uPA转染TM4细胞后,uPA mRNA和蛋白表达量均较空白对照组明显下降(P<0.05),以si-uPA1作用最为明显。si-uPA1转染24 h后,转染组细胞uPA mRNA的表达均较对照组显著降低,其中100 nmol/L组抑制效果最为明显,抑制率达到70%;随转染时间的延长,uPA mRNA表达持续降低,转染72 h后,三组转染细胞uPA mRNA表达量分别为对照组的53.9%、35.3%和27.7%(P<0.05)。该研究成功筛选出针对uPA mRNA靶序列的有效干扰序列,抑制效应持续至72 h;同一时间点内,抑制效应随转染浓度的增加而增强,表现出良好的量效关系。
- 胡廉刘燕李红钢熊承良
- 关键词:UPA
- 雌激素受体在雄性生殖系统的分布及生理和病理意义被引量:2
- 2004年
- 内源性雌激素以及外源性类雌激素物质对于雄性生殖系统的影响一直受到研究人员的关注。由于雌激素的生物学作用是通过雌激素受体(ER)介导的,因而人们对ER的作用进行了多方面的研究。本文主要从ER的结构、作用机制、在雄性生殖系统中的分布及其与雄性生殖系统疾病的关系进行了综述。
- 胡廉熊承良
- 关键词:雌激素受体雄性生殖系统生殖基因敲除
- 雌激素受体与雄性生殖系统
- 雌激素和雌激素受体(ER)在女性生理及病理上占有举足轻重的地位。对于男性而言,雌激素同样具有十分重要的作用。早在上个世纪三十年代,人们就已发现孕期妇女如接触高剂量的雌激素可造成男性胎儿生殖系统发育异常。然而,外源性雌激素...
- 胡廉熊承良
- 文献传递
- 少弱精子症患者睾丸组织中NOSTRIN的表达及其与eNOS的相关性研究被引量:7
- 2009年
- 目的通过测定少弱精子症患者睾丸组织中内皮型一氧化氮合酶运输介导物(endothelial nitric oxide syn-thase traffic inducer,NOSTRIN)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的表达,探讨其与少弱精子症发病的相关性。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测11例严重少弱精子症患者(病例组)和7例正常男性(正常组)睾丸组织中NOSTRIN mRNA的表达;分光光度法测定睾丸组织中eNOS的活性;应用硝酸还原酶法测定睾丸组织上清液中NO代谢产物NO2-/NO3-水平。结果病例组患者睾丸组织中NOSTRIN mRNA呈弱表达(0.312±0.076),明显低于正常组(0.793±0.082,P<0.01);病例组患者睾丸组织eNOS活性[(33.73±3.58)U/mg]与正常组[(17.69±3.84)U/mg]比较显著增强(P<0.01);病例组患者睾丸中NO2-/NO3-水平为(48.56±8.49)μmol/L,较正常组(25.37±9.61)μmol/L显著升高(P<0.01);病例组睾丸组织中NOSTRIN表达水平与eNOS活性呈负相关(r=-0.57,P<0.01),与NO代谢产物NO2-/NO3-同样呈负相关(r=-0.61,P<0.01)。结论少弱精子症患者睾丸组织中NOSTRIN表达水平降低,eNOS活性增强,NO2-/NO3-水平升高,可能与少弱精子症的发生有着相关性。
- 相文佩水丽君温子娜胡廉熊承良
- 关键词:一氧化氮合酶睾丸少弱精子症
- 用SYBR Green I实时逆转录-聚合酶链反应定量检测人、小鼠精子中CatSper1 mRNA被引量:2
- 2007年
- 目的:建立并优化SYBR GreenI实时RT-PCR体系,定量检测人、小鼠成熟精子中的CatSper1 mRNA。方法:用TRIzol分别提取人、小鼠成熟精子中的总RNA,逆转录后用SYBR GreenI实时PCR定量检测CatSper1 mRNA。SYBR GreenI实时PCR采用普通PCR试剂,加入SYBR GreenI染料,优化退火温度、Mg2+浓度及上、下游引物比例,并在PCR循环时采用四步法以消除引物二聚体的影响。优化完成后用不同浓度的精子cDNA为模板做标准曲线,以检测SYBR GreenI实时PCR的扩增效率。结果:定量检测CatSper1 mRNA的SYBR GreenI实时PCR体系适宜退火温度、Mg2+浓度及上、下游引物比例分别为63℃、3.0mmol/L和1∶1,四步法中采集荧光的温度为88℃。优化后用人和小鼠精子cDNA为模板做标准曲线分别为Y=-3.402log(X)+25.99和Y=-3.409log(X)+24.09,扩增效率分别为96.8%和96.5%,可定量检测人、小鼠成熟精子中的CatSper1 mRNA。结论:用普通的逆转录及PCR系统和试剂,建立了一种方便、廉价、可靠的SYBR GreenI实时荧光定量RT-PCR系统,可用于人、小鼠精子中CatSper1 mRNA定量检测。
- 李红钢廖爱华孔祥斌胡廉熊承良
- 关键词:精子MRNA小鼠
- siRNA干扰TM4细胞uPA表达的研究
- 目的采用化学合成的siRNA转染小鼠睾丸支持细胞株TM4细胞,观察uPA表达的变化,筛选uPA-siRNA的有效干扰序列。方法在验证TM4细胞有内源性uPA表达的基础上,针对小鼠uPA mRNA靶序列设计三段不同的siR...
- 胡廉刘燕熊承良