罗层 作品数:39 被引量:136 H指数:6 供职机构: 第四军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 陕西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
外周NMDA受体介导蜜蜂毒诱导的持续性伤害性反应的行为学研究(英文) 被引量:2 2000年 为了探讨外周 NMDA受体是否介导大鼠足底皮下注入蜜蜂毒诱导的持续伤害性行为反应 ,本研究应用动物痛行为学定量方法评价局部用药对持续伤害性行为反应的作用效果。大鼠足底皮下注入蜜蜂毒可以诱导动物产生长达 1h以上的持续、单相性的自发痛反应 ,其表现为自发缩足反射、抬足、舔足甚至咬足行为。注入蜜蜂毒之前局部给予非竞争性的 NMDA受体通道阻断剂氯胺酮和 MK-80 1。局部注入 2 5 m mol/L和 5 0 mmol/L氯胺酮可剂量依赖性地抑制大鼠的缩足次数和抬足、舔足时间 ,其对缩足反射的抑制率分别为 2 0 .90± 2 .88%和 45 .76± 13 .99% ,对抬足、舔足时间的抑制率分别为 3 9.5 3± 10 .0 5 %和 5 9.94±5 .5 3 %。同样 ,局部注入 10 μmol/L和 10 0 μmol/L的 MK-80 1也产生了类似的抑制作用 ,其对缩足反射的抑制率分别为 2 2 .84±3 .12 %和 49.5 3± 5 .3 6% ;对抬足、舔足时间的抑制率分别为 17.49± 5 .67%和 5 3 .49± 3 .87%。然而 ,对侧足底注入氯胺酮和MK-80 1对同侧蜜蜂毒诱导的自发痛反应没有影响 ,说明氯胺酮和 MK-80 1的作用并非全身效应。本实验提示外周 罗层 陈军关键词:氯胺酮 NMDA受体 蜜蜂毒 开展神经生物学课外科研活动的实践 被引量:6 2013年 课外科研活动是培养大学生成为创新型人才,启发其创新思维,培养其科研能力的重要途径。根据神经生物学教研室近年来在指导学生课外科研活动过程中积累的经验,探讨了课外科研活动对全面提高医学生综合素质的重要性并从以下几个方面展开了讨论:医学生参加课外科研活动的重要意义;神经生物学教研室课外科研活动的具体实施和收获;课外科研活动中存在的问题和解决办法。 罗层 解柔刚 刘大路 胡三觉关键词:神经生物学 脑功能成像技术及其在疼痛机制研究中的应用 被引量:3 1998年 罗层 庞志平 陈军关键词:脑功能成像 光学成像 磁共振 PET 疼痛机制 外周伤害性感受器PKG-I介导小鼠慢性炎性痛的吗啡耐受过程 被引量:2 2018年 目的:探讨外周伤害性感受器蛋白激酶G-I(protein kinase G-I,PKG-I)在慢性炎性痛吗啡耐受中的调节作用,为临床吗啡镇痛提供新的途径和手段。方法:根据Cre-Loxp原理,使用携带了在等位基因prkg1两侧加入Lox P的PKG-I^(fl/fl)小鼠与以Nav1.8为启动子的SNS-Cre(sensory neuron specific-Cre)小鼠交配,从而特异性敲除了外周伤害性感受器中的PKG-I(SNS-PKG-I^(-/-))。建立CFA慢性炎性痛吗啡耐受模型,并观察外周伤害性感受器PKG-I在慢性炎性痛敏和吗啡耐受中的作用。结果:通过Cre/Lox P系统建立的SNS-PKG-I^(-/-)小鼠已达到特异性敲除外周伤害性感受神经元PKG-I的目的。野生型小鼠足底注射CFA诱致慢性炎性痛条件下,单次注射吗啡可诱致显著的镇痛效应。然而,连续吗啡注射(共5 d,每天2次)可诱致其镇痛效率呈现显著下降趋势,即耐受现象。外周伤害性感受器PKG-I敲除后,连续吗啡注射诱致的耐受现象被显著削弱,而单次吗啡诱致的急性镇痛作用不受影响。结论:外周伤害性感受器PKG-I在慢性炎性痛下的吗啡耐受过程中发挥关键作用。 褚文广 肖梅梅 王福东 吴文斌 解柔刚 罗层关键词:吗啡耐受 小鼠 TRPC通道参与疼痛信号传递过程与作用机制的研究进展 被引量:2 2017年 瞬时受体电位通道(transient receptor potential,TRP)家族是一类六7欠跨膜的非选择性阳离子通道.主要包括TRPC、 张宇飞 林震 罗层 韩文娟关键词:疼痛 外周伤害性感受神经元在体特异性表达GCaMP6f蛋白方法的构建及细胞内钙活动的监测 被引量:2 2017年 目的:建立在外周伤害性感受器特异性表达GCa MP6f蛋白的方法,并在疼痛刺激条件下,应用钙成像技术实时监测小鼠伤害性感受神经元的细胞内钙活动。方法:包装并纯化r AAV2/9-CAG-DIO-GCamp6f病毒,并通过立体定位注射该病毒于SNS-Cre小鼠L4/L5背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)内。动物存活3~4周,然后制备L4/L5整节DRG标本,检测GCa MP6f蛋白表达情况,并观察疼痛刺激条件下诱致的伤害性DRG神经元的钙反应情况。结果:SNS-Cre小鼠L4/L5 DRG内注射r AAV2/9-CAG-DIO-GCamp6f病毒后,荧光显微镜观察显示GCamp6f病毒特异性地表达在中、小型的DRG神经元。给予DRG神经元高钾刺激(KCl 30 mmol/L)可以诱致神经元胞内的钙离子水平显著上升。进一步给予伤害性DRG神经元特异性标志物TRPV1受体的激动剂Capsaicin(1μmol/L),结果显示其可以诱致GCamp6f蛋白标记的DRG神经元呈现显著的钙反应。结论:本研究建立的SNS-Cre小鼠DRG在体注射r AAV2/9-CAG-DIO-GCamp6f病毒特异性标记伤害性DRG神经元的方法是成功的,该方法的成功建立对于活体特异性监测伤害性DRG神经元的功能活动提供了重要工具。 褚文广 杜祎康 王旭 林震 白占涛 解柔刚 罗层关键词:伤害性感受器 DRG 鞘内注射孤啡肽对大鼠足底注入蜜蜂毒诱致长时程自发痛、痛敏和炎症的不同效果(英文) 被引量:17 2004年 为进一步了解孤啡肽在脊髓水平是否具有抗伤害及抗炎作用,本实验在具有多种痛行为表现的蜜蜂毒模型上观察了鞘内注射孤啡肽对大鼠一侧后足底注入蜜蜂毒所诱致的同侧自发缩足反射、原发热和机械性痛敏以及注射部位炎症反应的影响,同时观察了新的高选择性孤啡肽受体拮抗剂CompB的作用。结果表明:与生理盐水对照组比较,鞘内注射孤啡肽(3、10、30nmol/10μl)对蜜蜂毒诱发的自发缩足反射次数的抑制作用随剂量提高而增大,抑制率分别为37±7,43±6 and 57±11%(三个剂量vs对照,P<0.05);而对蜜蜂毒诱发的注射部位炎症反应(爪体积、爪背腹厚度和蛋白渗出的增加)无显著影响。CompB(30nmol)可完全翻转10nmol孤啡肽对自发缩足反射的抑制作用。鞘内单次或重复注射孤啡肽(10nmol/10μl)对蜜蜂毒诱致的原发性热和机械性痛敏的发生和维持均无作用。本实验结果提示,外源性孤啡肽在脊髓通过孤啡肽受体的介导产生一定的镇痛作用,但是它可能仅对持续性自发痛有抑制作用,而对热和机械性痛敏及炎症反应均无影响。 孙焱芫 罗层 李震 陈军关键词:孤啡肽 痛敏 炎症 抗伤害作用 慢性炎性痛诱致小鼠焦虑样行为和前扣带回TRPC3和TRPC6通道的表达上调 被引量:4 2018年 目的:探讨慢性炎性痛诱致小鼠焦虑样行为情况下前扣带回(anterior cingulate cortex,ACC)TRPC 3/6通道的表达改变。方法:采用小鼠痛行为检测方法、旷场行为检测方法和免疫印迹实验(Western Blot)。结果:小鼠后肢足底皮下注射完全弗氏佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)建立慢性炎性痛模型。痛行为检测结果显示足底皮下注射CFA可以诱致小鼠产生长时程的机械性和热痛觉过敏现象。旷场实验可见CFA致炎致痛后的小鼠较正常小鼠在旷场中央区活动距离明显降低,停留时间明显减少,提示慢性炎性痛小鼠表现为显著的焦虑样行为。进一步采用Western Blot实验发现炎性痛焦虑样小鼠前扣带回脑区的TRPC3和TRPC6通道蛋白表达水平较对照组动物显著上调。结论:CFA引发的慢性炎性痛模型中,小鼠产生焦虑样情绪,TRPC3和TRPC6通道蛋白在ACC部位的蛋白表达水平明显升高。提示这些焦虑样痛情绪的发生与疼痛痛觉通路中ACC脑区的TRPC3及TRPC6表达密切相关。 王旭 杜祎康 吴文斌 王福东 罗层 白占涛关键词:CFA TRPC6 小鼠 脊髓背角Ⅰ层神经元功能和结构可塑性增强协同诱致慢性炎性痛 2017年 目的:探讨外周炎症损伤后诱致脊髓背角Ⅰ层神经元功能可塑性和结构可塑性改变的情况。方法:采用脊髓薄片全细胞膜片钳记录技术和Golgi染色方法。结果:小鼠一侧后肢足底皮下注射完全弗氏佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)可诱致显著的机械性痛敏和热痛敏。CFA注射24 h后,对脊髓背角Ⅰ层神经元进行全细胞膜片钳记录发现刺激伤害性初级传入纤维诱致的兴奋性突触后电流(excitatory postsynaptic currents,EPSCs)的幅值较对照组动物显著增加,平均增强幅度为85.7%。Golgi染色结果发现,在诱致功能可塑性增强的同时,CFA炎症后还可导致脊髓背角Ⅰ层神经元出现树突棘密度显著增加,与对照组相比平均增强186.7%。结论:CFA引发的外周炎症损伤可同时诱致脊髓背角Ⅰ层神经元呈现功能可塑性和结构可塑性增强,这些变化与疼痛的持续慢性化过程有关。 赵芝威 王旭 卢娜 杜祎康 褚文广 白占涛 韩文娟 罗层关键词:小鼠 天麻素在慢性痛中的作用及作用机制研究 被引量:9 2015年 慢性痛是严重危害人类身心健康和生活质量的慢性疾病,被喻为不死的癌症,困扰着数以亿计的人们,其反复发作、迁延难治的特性使患者长期备受折磨,并且焦虑、抑郁、恐惧等恶性情绪常伴随整个病程甚至终生,”痛”不欲生,严重危害人类的生活质量。近年来,随着人们在细胞和分子水平研究的深入,慢性痛的机制研究取得了长足的进展。 高浏璐 肖梅梅 董辉 罗层关键词:天麻素 慢性痛 镇痛作用