田孝祥
- 作品数：120 被引量：112H指数：6
- 供职机构：沈阳军区总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 过表达CREG抑制ox-LDL诱导的人血管平滑肌细胞增殖
- 2015年
- 目的:探讨E1A激活基因阻遏子(Cellular repressor of E1A-stimulated genes,CREG)在氧化型低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)引起的人血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖中的作用及可能机制。方法:用60μg/m L ox-LDL处理人胸主动脉VSMC,在不同时间点(0 h,12 h,24 h,48 h)计数细胞并绘制生长曲线;在48 h时间点进行Brd U染色检测增殖细胞的比率;采用Western Blot检测各时间点CREG表达。通过向VSMC中转染携带CREG基因的质粒载体,筛选获得过表达CREG的VSMC(VSMCCREG)。进一步用ox-LDL处理VSMCCREG,采用前述方法绘制生长曲线、进行48 h时间点Brd U染色并检测CREG和磷酸化Erk1/2的表达。结果:与未经处理的对照组VSMC相比,ox-LDL处理的VMSC细胞总数及Brd U阳性细胞比率显著增加;并且,CREG表达随处理时间延长逐渐降低。此外,与ox-LDL处理的VSMC组相比,ox-LDL处理的VSMCCREG组细胞总数及Brd U阳性细胞比率均显著下降;并且CREG表达增加、磷酸化Erk1/2水平下降。结论:过表达CREG可能通过降低Erk1/2磷酸化抑制ox-LDL诱导的人VSMC增殖。
- 杨桂棠韩雅玲闫承慧田孝祥李洋
- 关键词：血管平滑肌细胞增殖动脉粥样硬化
- CREG修饰的胚胎干细胞移植改善小鼠心肌梗死后心功能
- 张剑闫承慧田孝祥韩雅玲
- 神经生长因子对体外培养的小鼠主动脉环血管新生的影响及TrkA的关键作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨神经生长因子(NGF)对体外培养的小鼠主动脉环血管新生的影响。方法①将小鼠主动脉环在三维基质胶中以含不同浓度的NGF的无血清培养基培养不同天数后,对出芽的细胞进行免疫荧光染色细胞学鉴定,或在倒置显微镜下观察、摄像,并以ImagePro图像分析软件计算每高倍视野中平均出芽的面积。②向培养基中预先加入抗NGF的中和抗体或血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)拮抗剂SU5416,观察NGF或VEGF对出芽性血管新生的影响。③向培养基中预先加入酪氨酸受体激酶A(TrkA)受体拮抗剂K252a,观察NGF是否可通过TrkA受体促血管新生。结果①外源性NGF呈浓度依赖性促进基质胶中培养的小鼠主动脉环出芽。出芽的细胞上CD31的表达阳性。抗NGF的中和抗体能明显阻断NGF诱导的出芽性血管的新生。②SU5416可显著减少VEGF诱导的血管新生;但对NGF诱导的血管新生无明显影响。③K252a可明显抑制NGF诱导的血管新生。结论NGF可通过TrkA受体促进小鼠主动脉环血管新生,为促血管新生治疗方案的选择提供了新的思路。
- 齐岩梅韩雅玲康建李娜田孝祥闫承慧
- 关键词：神经生长因子主动脉环血管新生小鼠
- 人参皂苷Rg1抑制大鼠急性心肌梗死后心肌纤维化被引量：14
- 2017年
- 目的:观察人参皂苷Rg1对大鼠心肌梗死后心脏纤维化发生的影响。方法:通过结扎SD大鼠左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌梗死模型,并将40只雄性SD大鼠随机分单纯手术组与人参皂苷Rg1治疗组。治疗组的大鼠造模1 h后将预先配成药液的人参皂甙Rgl按5 rag/(kg·d)剂量腹腔注射,1/日至处死当日。对照组则腹腔注射等量生理盐水1/日至处死当日。分别于手术后1、2周时对比两组大鼠的基本生命指标,后通过马松染色对比观察各组大鼠心脏细胞形态特征以及瘢痕形成情况。结果:(1)无论是手术后1周还是2周,两组大鼠的体重、心脏重量、心重/体重、鼠尾收缩压、心率比较均没有统计学意义(P>0.05);(2)无论是手术后1周后还是2周后,人参皂苷Rg1治疗组心脏瘢痕形成要明显少于对照组。结论:人参皂苷Rg1能够有效抑制大鼠急性心肌梗后心脏纤维化的发生。
- 彭程飞李佳田孝祥刘丹李洋
- 关键词：人参皂苷RG1急性心肌梗死心肌纤维化
- CREG促进胚胎干细胞来源的卵黄囊形成及血管新生
- 血管新生是形成新生血管的关键步骤，它不仅参与生理情况下的胚胎发生,而且与缺血性心脏病、卒中以及恶性肿瘤等多种疾病的发生发展密切相关。全面理解其调控机制及分子基础对未来发展新的治疗上述疾病的方法至关重要。前期的系列研究已经...
- 田孝祥张娜韩雅玲康建李少华闫承慧
- 关键词：血管新生平滑肌细胞缺血性心脏病胚胎干细胞
- CREG蛋白用于预防或治疗体重超重、肥胖及其相关疾病的医药用途
- 本发明涉及E1A激活基因阻遏子(CREG)蛋白的用途，具体涉及CREG蛋白或其活性片段在制备用于预防和/或治疗超重、肥胖、胰岛素抵抗、高脂血症及其相关疾病的药物中的用途。本发明还涉及表达CREG蛋白或其活性片段的重组载体...
- 韩雅玲田孝祥闫承慧张权宇张效林刘丹
- 文献传递
- E1A激活基因阻遏子基因过表达改善小鼠心肌梗死后心脏功能
- 目的:我们的系列研究发现,CREG可促进损伤血管内皮细胞的快速修复、维持血管平滑肌细胞分化稳态及存活,并抑制间充质干细胞在缺氧和低糖状态下的凋亡.还观察到,腺病毒介导的CREG基因转染以及外源重组CREG蛋白干预均可增强...
- 张剑田孝祥闫承慧张效林康建韩雅玲
- 成年SD大鼠心肌原代成纤维细胞分离及培养的优化方案被引量：6
- 2016年
- 目的:摸索及优选成年SD大鼠心肌原代成纤维细胞的体外分离、培养及鉴定的实验方法。方法:将成年SD大鼠心脏剪成小组织块,采用以下四种方案(A:0.08%胰酶+0.1%胶原酶II消化15 min,B:0.2%胶原酶II消化15 min,C:0.2%胶原酶II消化60min,D:0.2%胶原酶II消化90 min)提取成年大鼠心脏原代成纤维细胞,再通过差速贴壁分离方法培养原代成纤维细胞。采用倒置显微镜观察成纤维细胞的基本形态特征,并进行Vimentiin免疫荧光染色对培养的原代细胞进行荧光鉴定;采用台盼兰染色对培养的原代成纤维细胞存活率进行鉴定;采用细胞计数对培养的成纤维细胞生长趋势进行鉴定。结果:四种方法均能培养成纤维细胞,但单酶消化60 min可一次性提取较多细胞,并且细胞状态佳,3 d即可传代。72 h成纤维细胞Vimentin免疫荧光染色阳性率高达97%。台盼兰染色可见其细胞死亡率明显降低,并且细胞计数可见细胞生长状态极佳。结论:单酶消化60 min是提取成年SD大鼠心肌原代成纤维细胞的高效、快速、稳定的实验方法,为心脏疾病的基础及临床研究提供了较为理想的细胞学实验模型。
- 刘美丽刘丹刘艳霞田孝祥闫承慧
- 关键词：成年SD大鼠原代培养
- 利用胚胎干细胞建立贴壁制备类胚体的新方法
- 2006年
- 为改进类胚体制备过程中分化不同步等问题，探讨采用小鼠胚胎干细胞建立贴璧制备类胚体的新方法。当小鼠胚胎干细胞R1生长至70％-80％亚融合时，将其消化成单细胞，以1×10^6的细胞数接种到100mm组织培养皿中，用含低浓度白血病抑制因子（1ng／ml）的胚胎干细胞培养液连续贴壁培养3天后，收集贴壁细胞团继续悬浮培养。对悬浮培养的类胚体及其冷冻切片行形态学观察。结果发现该类胚体大小均一，分化同步。能展示从简单类胚体到成熟囊性类胚体的典型发育过程。免疫荧光染色观察到悬浮及贴壁分化的类胚体甲胎蛋白（AFP）、血小板内皮细胞粘附分子-1（PECAM—1）及神经丝蛋白68kD（NF-68）三种标志物表达均为阳性。结论：与目前常用的类胚体制备方法相比，本法操作简便，类胚体形成率高、分化阶段同步、结构典型，具有分化为三个胚层来源细胞的能力。
- 田孝祥韩雅玲康建徐凯阎承慧
- 关键词：胚胎干细胞分化甲胎蛋白
- 胚胎干细胞SM22α-EGFP表达克隆的建立及平滑肌细胞体外发育的动态观察
- 2006年
- 为探讨血管发育早期血管平滑肌细胞(VSMCs)募集和增殖特点,构建了含有SM22α启动子序列和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)编码序列的质粒,建立了平滑肌特异性蛋白SM22α启动子控制下稳定表达EGFP的胚胎干细胞株(ESCs),以研究VSMCs的发育特点。实验发现,起源于SM22α-EGFPESCs形成的类胚体(EBs)在第11天开启SM22α启动子并表达EGFP。此后EGFP阳性细胞持续增加,在第30天达到高峰。VSMCs多起源于EBs中细胞密集处,应用免疫荧光染色及RT-PCR观察到EGFP阳性细胞表达多种平滑肌特异性标志物。在贴壁培养的类胚体中VSMCs形态可分为纺锤形及上皮样的多角形,慢速视频显微摄像测得纺锤形细胞迁移速度较上皮形细胞快。结论:SM22α-EGFPESCs分化形成的EBs可以模拟体内早期胚胎血管形成过程,从形态学上获得VSMCs募集分化的证据。
- 徐凯韩雅玲康建阎承慧田孝祥李少华
- 关键词：血管平滑肌细胞胚胎干细胞
