王翀
- 作品数：23 被引量：81H指数：5
- 供职机构：新疆出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家质检公益性行业科研专项高层次人才科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 瓜细菌性果斑病菌在出口种子中的检测研究
- 本文对2007～2009年我局出口的瓜类种子共计143批次进行西瓜细菌性果斑病菌的检测，通过PCR技术，利用特异性引物对瓜种子进行果斑病菌检测，检测出阳性样品10批次，其中食用黑瓜子带菌率高，20批次中阳性样品8批次。说...
- 王翀张祥林张伟
- 关键词：瓜类种子细菌性果斑病菌PCR技术
- 文献传递
- 应用PCR法对小麦叶疫病菌的检测
- 2015年
- 【背景】小麦叶疫病菌于20世纪60年代入侵我国后,迅速传播扩散并在局部区域造成严重危害,对我国小麦的健康发展构成了巨大威胁。【方法】设计出检测小麦叶疫病菌的特异性引物,建立快速检测该病菌的PCR方法。用真菌通用引物ITS4/ITS5对小麦叶疫病菌进行PCR扩增,将扩增产物进行克隆和测序,使用DNAMAN软件设计出检测该病菌的特异性引物LJY1和LJY2,优化PCR反应体系。【结果】建立了该病菌的PCR检测方法,PCR反应体系:25 mmol·L-1Mg Cl22.5μL,10 mmol·L-1d NTP 1.0μL,10μmol·L-1引物各0.5μL,DNA模板8 ng,最佳退火温度57.6℃。【结论与意义】该方法可以准确地将小麦叶疫病菌与其他链格孢属的真菌区分开。本研究结果为小麦叶疫病的快速检测提供了依据,能够有效防止该病菌在小麦进出口贸易中传入我国。
- 张雁张祥林王翀罗明马海波张瑜
- 关键词：PCR
- 新疆酿酒葡萄园可培养酵母菌多样性分析被引量：5
- 2019年
- 对新疆石河子和吐鲁番2个地区酿酒葡萄园可培养酵母菌的种类鉴定及分布进行研究,旨在明确酿酒葡萄园主要酵母种类及分布规律,为酵母菌资源的开发利用打下基础。对酿酒葡萄园果实表面和土壤进行稀释后平板划线分离纯化,挑取单菌落,并对菌落和细胞显微特征进行形态观察。对分离获得的酵母菌株进行WL培养基培养观察,区分聚类,选取其代表菌株进行糖发酵及碳源利用试验,且对其26S rDNA D1/D2区序列测序鉴定并进行系统进化分析。结果发现,从酿酒葡萄园土壤及果实表面中共分离获得41株酵母菌株,其中在石河子地区分离获得28株,经鉴定属于隐球酵母属(Cryptococcus)、有孢汉逊酵母属(Hanseniaspora)、威克汉姆酵母属(Wickerhamomyces)、毕赤酵母属(Pichia)、棒孢酵母属(Clavispora)、红冬孢酵母属(Rhodosporidium)、红酵母属(Rhodotorula)、假丝酵母属(Candida)、Rhodosporidiobolus和Kazachstania等10属13种,在吐鲁番地区共分离获得13株,经鉴定属于棒孢酵母属(Clavispora)、假丝酵母属(Candida)、红酵母属(Rhodotorula)、隐球酵母属(Cryptococcus)、Kazachstania和Rhodosporidiobolus等6属6种。结果表明,新疆酿酒葡萄园的酵母菌组成具有较为丰富的多样性,其应用价值值得进一步研究。
- 蔡燕丽刘欢王翀雷勇辉王晓东孙燕飞
- 关键词：酵母菌
- 实时荧光PCR检测瓜炭疽病菌被引量：1
- 2016年
- 采用实时荧光PCR技术建立了瓜炭疽病菌(Colletotrichum orbiculare)的检测方法。根据瓜炭疽病菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因和谷氨酰胺合成酶(GS)基因序列,设计了该病菌特异性引物和TaqMan探针,并对所设计的引物和探针的反应条件进行了优化。采用本试验建立的实时荧光PCR方法对瓜上的其他菌株及近似菌株进行检测,可将瓜炭疽病菌与其他病原菌区分开。灵敏度试验表明,25μL体系中只要有39.6pg的核酸量就可以被检测到,检测灵敏度达到1.584pg/μL,比普通PCR检测灵敏度高100倍。同时对田间采集的病株和未知样品进行的检测证明了引物和TaqMan探针的特异性。
- 王翀张小菊张祥林张伟张瑜李亚伟孙燕飞
- 关键词：实时荧光PCR
- ELISA及实时荧光PCR检测番茄细菌性溃疡病菌的方法比较被引量：5
- 2008年
- 本文以番茄细菌性溃疡病菌（Clavibacter michiganensis subsp．michiganensis）菌悬液和田间采集的病组织为材料，比较ELISA试剂盒、常规PCR方法和实时荧光PCR方法检测番茄细菌性溃疡病菌灵敏度和适用性。结果表明，ELISA试剂盒检测灵敏度为10^5 cfu／mL，具有简便、快速、易操作特点，适用于田间病害诊断；常规PCR检测灵敏度为10^5cfu／mL；TaqMan探针实时荧光PCR检测灵敏度为10^3-4cfu／mL，比常规PCR和ELISA检测灵敏度提高10—100倍，且不需要琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭染色和Southern杂交，但需要昂贵的仪器和试剂，适用于室内检测及相关研究。
- 潘俊鹏张祥林罗明王翀马春春
- 关键词：番茄ELISA检测TAQMAN探针实时荧光PCR检测
- 不同营养和培养条件对向日葵茎溃疡病菌生长特性的影响
- 2011年
- 【目的】研究向日葵茎溃疡病菌(Phomopsis helianthi)生态适应性中的营养和培养条件,以期建立常规生物学检测方法,以便有效采取检疫处理措施。【方法】不同营养和培养条件下(包括培养基、碳源、氮源、温度、酸碱度和光照),对该菌培养7 d,测量其菌落直径大小和观察其生长状况。并用SPSS 12.0软件进行相应的计算处理、统计分析。【结果】向日葵茎溃疡病菌在PDA、CMA培养基上生长较好,在改良的查彼培养基和WA培养基上生长较慢。该病菌能充分利用酵母膏和硝酸钾。在6～34℃均能生长,最适生长温度为23～26℃。适宜生长pH 3.0～12.0,最适pH 5.0～10.0。在全光照培养条件下有助于菌丝的生长。【结论】通过不同营养和培养条件下的生长情况,可知该病菌的最适生长条件,有助于对该病菌进行有效的检疫处理。
- 陈燕张祥林王翀刘彬王文正
- 关键词：营养
- 葡萄金黄化植原体16SrDNA检测与RFLP分析被引量：4
- 2010年
- 【目的】对多种植原体16SrDNA基因序列进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析比较,以期区分葡萄金黄化植原体不同亚种,从而为葡萄金黄化植原体的鉴定提供新依据。【方法】用植原体通用引物R16mF2/R16mR1扩增7种不同植原体16SrDNA基因序列,得到约1.5 kb的DNA片段,将此片段克隆到PGM-T载体,并通过酶切鉴定,对重组阳性克隆进行核酸序列测定及同源性分析,利用限制性内切酶XmnⅠ、XspⅠ、TaqⅠ和RsaⅠ对目的片段进行酶切电泳分析。【结果】所扩增2个不同亚种的葡萄金黄化植原体D型和C型序列同源性最高,达99.72%,但利用限制性内切酶可以将上述2个亚种从植原体榆树黄化组中区分。【结论】利用限制性内切酶分析通用引物R16mF2/R16mR1所扩增的基因片段,可以将葡萄金黄化植原体区分。
- 乾义柯张祥林马春春王翀
- 关键词：限制性片段长度多态性
- 菠菜霜霉病菌快速分子检测方法研究被引量：2
- 2016年
- 【目的】菠菜霜霉病,由专性寄生病原菌Peronospora farinosa f.sp.Spinaciae引起,是世界上菠菜Spinacia oleracea种植中最为重要的经济型病害。建立菠菜霜霉病菌快速分子检测方法。【方法】将菠菜霜霉病菌进行显微镜的形态鉴定;提取DNA、PCR扩增、克隆、酶切、测序、序列比对与分析;采用巢式PCR技术检测菠菜霜霉病:第一轮采用通用引物ITS1/ITS4,第二轮采用特异性引物SMPF/SMPR。【结果】该菌与霜霉属的形态特征描述一致,确定菠菜患有霜霉病;测序结果经Blast比对分析与Peronospora effusa同源性达100%;巢式PCR技术也特异性的检测到了菠菜霜霉病菌。【结论】建立针对菠菜霜霉病的快速分子检测技术。
- 李京张祥林王翀李亚伟张小菊
- 关键词：酶切巢式PCR
- 高通量测序结合可培养技术分析新疆刺腿食蚜蝇内生酵母菌的种群结构被引量：1
- 2019年
- 对新疆石河子刺腿食蚜蝇 Ischiodon scutellaris Fabricius内生可培养酵母菌和不可培养酵母菌的种类进行鉴定及多样性分析,明确刺腿食蚜蝇主要酵母种类及分布规律,为酵母菌资源的开发利用提供科学依据。通过Illumina (MiSeq)平台高通量测序和生物信息学分析,以及对刺腿食蚜蝇过滤液富集培养,选取其代表菌株进行糖发酵、碳源利用等生理生化检测及26S rDNA D1/D2区进行测序,对刺腿食蚜蝇中可培养酵母菌分离鉴定系统进化分析,得到刺腿食蚜蝇中酵母菌物种分布多样性信息及微生物群落结构组成。从刺腿食蚜蝇体内共分离获得14株可培养酵母菌株,属于 Kodamaea , Saccharomyces , Wickerhamomyces 3个属;不可培养酵母菌含量≥1.49%,主要有16属,为 Filobasidium (黑粉菌属), Udeniomyces , Candida(假丝酵母属), Metschnikowia(梅奇酵母属), Pichia (毕赤酵母属), Prototheca , Papiliotrema , Dipodascus , Kwoniella , Schizosaccharomyces (裂殖酵母), Acaromyces (阿卡酵母属), Cryptococcus (隐球酵母属), Cystofilobasidium , Tetrapisispora , Aureobasidium (金担子菌属), Zygosaccharomyces (接合酵母属)等。研究结果显示刺腿食蚜蝇内生酵母菌组成具有多样性,体内有着丰富的酵母菌种群,需要进一步开展昆虫体内的酵母菌种群的系统研究。
- 米桃桃冯丽王翀孙燕飞熊杰雷勇辉
- 关键词：高通量测序
- 香梨黑斑病菌在不同培养条件下生长特性的研究
- 2014年
- [目的]对不同培养条件下香梨黑斑病菌（Alternaria alternata）的生长特性进行研究,以期明确该病菌的生物学特性.[方法]在不同培养条件（包括培养基、碳源、氮源、温度、酸碱度、光照条件）下,培养香梨黑斑病菌7d,测量其菌落直径大小,观察其菌丝及分生孢子生长状况,用SPSS 18.0软件对相关数据进行统计分析.[结果]香梨黑斑病菌在PSA、PCA培养基上生长较好,在理查氏培养基上生长较慢.最佳碳源为可溶性淀粉和蔗糖;能够充分利用蛋白胨;在15～ 35℃温度范围内均能生长,最适生长温度为25～ 30℃.在pH为4.5～9.0之间均生长,最适pH5.0～8.0.在全光照培养条件下有利于菌丝的生长,在全黑暗条件下,有利于分生孢子的产生.[结论]通过研究该病菌在不同培养条件下的生长情况,明确了该病菌的最适生长条件,为建立该病菌常规生物学检测方法提供理论依据.
- 马海波张祥林王翀王凤军
- 关键词：菌丝分生孢子
