王洪涛
- 作品数：16 被引量：70H指数：4
- 供职机构：河南大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国烟草总公司科技项目河南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程农业科学更多>>
- 核桃青皮多酚氧化酶纯化及酶学性质研究
- 2013年
- 采用简化的方法对核桃（Juglans rejiaL.）青皮中多酚氧化酶（PPO）进行纯化,并对其酶学性质进行了研究.结果表明,核桃青皮PPO经过丙酮沉淀、金属螯合亲和层析,被纯化了1.42倍,回收率为0.21％.以邻苯二酚为底物,该酶最适pH是6.0,最适温度是20℃;抗坏血酸对核桃青皮PPO的活性有很强的抑制作用,亚硫酸氢钠和柠檬酸也能抑制核桃青皮PPO的活性;当Cu2＋浓度在0.01～0.05 mmol/L时,Cu2＋对PPO有激活作用,超过这个范围对PPO活性反而有抑制作用.
- 王和利陈迪新王洪涛
- 关键词：核桃青皮
- 胰岛素突变体合成中不对称PCR条件的探讨被引量：3
- 2004年
- 在胰岛素定点突变体合成中 ,对不对称PCR反应中突变位点的引物和末端引物的比例以及退火温度进行优化。结果表明 :PCR反应 5′末端引物与突变引物的配比为 5 0∶1～ 10 0∶1;第 2轮PCR反应退火温度在 6 5～ 70℃较为理想。
- 王洪涛怀文辉茹炳根张绍铃
- 关键词：胰岛素突变体引物蛋白质工程
- 兼并PCR技术反应条件的探索被引量：1
- 2017年
- [目的]探索兼并PCR技术反应的条件。[方法]依据过氧化物酶N-末端氨基酸序列设计的兼并引物,提取幼龄梨果实的DNA和RNA并将RNA反转录为cDNA,分别以DNA、cDNA和PCR产物为模板,利用PCR和琼脂糖电泳分析的方法,在不同的退火温度和引物添加量的配比下,对PCR条件进行优化。[结果]优化了PCR反应的条件,并且得到目的基因。[结论]优化后的兼并PCR技术可以更好地应用于新基因的克隆、病毒的检测等研究领域。
- 吴茜敬永升王艺霖刘肖肖王洪涛
- 关键词：PCR过氧化物酶退火温度
- ‘砀山酥’梨果实发育过程中几种酶的谱带和活性变化被引量：5
- 2008年
- 幼果期间,‘砀山酥’梨果实中的过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)的总活性高,同工酶谱带数多,而后,随着果实的生长发育而下降并趋于稳定,花后90d左右出现一条特异性POD同工酶条带;超氧化物歧化酶(SOD)的同工酶谱带和活性在整个发育过程中变化不明显。
- 刘连妹王洪涛屈海泳张绍铃
- 关键词：果实同工酶
- 用质粒作底物测定核糖体失活蛋白酶活性的新方法被引量：3
- 2007年
- 植物核糖体失活蛋白(ribosome-inactivating protein,RIP)是一类能作用于核糖体最大RNA的独特蛋白质.它是研究蛋白质生物合成中核糖体RNA结构与功能的有力工具.利用RIP能在DNA中脱去一些腺嘌呤碱基使超螺旋DNA解旋的特点,分别以常用的质粒PUC18、PUC19和PBR322 DNA为底物,建立了测定RIP酶活性的一种新方法,其灵敏度是50ng(天花粉蛋白)和5ng(还原型的辛纳毒蛋白),酶催化反应的时间是60min.这个新方法具有方便、快捷、灵敏的特点,避免了常用方法中制备核糖体、提取RNA的仪器和技术条件的限制,检测的时间由原来的几天缩短到约120min,大大地降低了检测的费用,为广泛和深入地研究RIP提供了有利的条件.
- 王洪涛张绍铃刘望夷
- 关键词：凝胶电泳
- 高等植物自花花粉的识别与拒绝(英文)被引量：11
- 2005年
- 高等植物在长期的进化过程中 ,通过雌蕊识别并拒绝遗传上相近的花粉 ,防止近亲繁殖、保持遗传多样性 ,该机制被称为植物自交不亲和性 .植物自交不亲和性已成为当今国内外研究的热点 .近年来 ,芸薹属孢子体自交不亲和性、S- RNase调节的配子体自交不亲和性以及罂粟花科配子体自交不亲和性研究比较深入 .最近的研究表明 ,泛素介导的蛋白酶体蛋白质降解途径参与芸薹属孢子体自交不亲和性和 S- RNase调节的配子体自交不亲和性反应 .另一种蛋白质降解途径 ,即半胱 -天冬胺酸特异的蛋白酶介导的细胞程序化死亡似乎参与罂粟花科配子体自交不亲和性 .本文回顾了 3种自交不亲和性研究的最新进展 ,并就其自交不亲和性机制作进一步讨论 .
- 吴华清张绍铃王洪涛屈海泳刘招龙
- 关键词：自交不亲和性拒绝
- 再造烟叶循环白水中细菌检测方法的确立被引量：1
- 2020年
- 以再造烟叶生产过程中循环白水为研究对象,通过对几种常用细菌检测方法的分析和比较,结果发现,吖啶橙染色直接计数法的检测结果,在表征循环白水中的细菌总数时效果最好,适合用于白水系统中细菌的测定.对吖啶橙染色直接计数检测法进行了合理的改进,确立了适用于再造烟叶循环白水中细菌总数的检测方法.
- 王洪涛吴茜刘肖肖吴帅霖陈旭李若雨陈云李世朋
- 关键词：再造烟叶
- 蓖麻种子毒蛋白抗癌活性及热稳定性的探讨被引量：3
- 2011年
- 目的:了解蓖麻毒蛋白(Ricin)及从大戟科植物蓖麻种子中提取出来的一种核糖体失活蛋白的热稳定性和抗肿瘤活性。方法:利用亲和层析的方法纯化蓖麻种子毒蛋白,并通过SDS-PAGE电泳和MTT染色法等方法检测其热稳定性、抗肿瘤性。结果:Ricin在37℃的缓冲液中保温60 h,没有明显的降解;能有效地杀死食管癌细胞EC109。结论:Ricin是有前途的蛋白类抗肿瘤药物。
- 张洪敬永升陈元王聪刘纯纯郭书杰李申王富茹王洪涛
- 关键词：核糖体失活蛋白抗癌活性稳定性
- 几种同工酶在植物果实发育及衰变过程中变化特点和特性的研究
- 同工酶是参与生命活动的重要酶类,为了研究其在生命过程中的变化规律及其功能和作用,分别对同一梨品种相同性质的同工酶、不同品种相同性质、功能相近的同工酶、及不同植物不同性质的同工酶等进行了比较研究,探讨了其在果实生长发育和衰...
- 王洪涛
- 关键词：PODPPORIP
- 文献传递
- 三氯乙酸法测定烟叶中蛋白质含量被引量：1
- 2018年
- 烟叶中蛋白质的含量与烟草的品质息息相关.如何快速、准确地测定烟叶中蛋白质含量则显得尤为重要.本实验通过对烟叶蛋白质抽提液的最佳浓度、蛋白质沉淀剂的最佳浓度及加入量进行确定,探索出了一种适合于测定烟叶中蛋白质含量的方法:室温条件下,用浓度为8 mol·L-1的尿素溶液充分抽提烟叶中的蛋白质(抽提时间大于6 h),12 000 r/min离心20 min后仅留上清液,将所得上清液稀释4倍后加入3%三氯乙酸,静置10 min,充分沉淀上清液中的蛋白质,之后再次12 000 r/min离心20 min后弃上清,留沉淀,将沉淀加入丙酮清洗后烘干至恒重,达到恒重的沉淀质量即为该烟叶中蛋白质的质量.
- 刘肖肖樊新顺施东青田泱源王艺霖丁瑞红王洪涛王文领
- 关键词：烤烟蛋白测定尿素三氯乙酸
