王亚芳
- 作品数：16 被引量：47H指数：5
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Sema3A在胃癌中的表达及意义
- 2015年
- 目的:探讨Sema3A在胃癌中的表达及意义。方法:利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测正常健康人及胃癌患者血清中Sema3A表达的差异性。应用实时荧光定量聚合酶链反应(Real time PCR)检测胃癌细胞系、人正常胃黏膜细胞中Sema3A mRNA的表达差异。应用免疫印迹法(Western Blot)检测胃癌细胞系、人正常胃黏膜细胞中Sema3A蛋白的表达差异。结果:与正常健康对照者相比,Sema3A在胃癌患者血清中表达下降(P<0.001),且与胃癌患者的年龄、肿瘤分化程度相关(P<0.05)。人转移潜能胃癌细胞株MKN-28M、MKN-28NM中Sema3A mRNA和蛋白表达量明显低于人正常胃黏膜细胞(P<0.05),且在高转移潜能MKN-28M细胞中表达量最低(P<0.05)。结论:与正常对照组相比,Sema3A在胃癌患者血清、人胃癌细胞株中均表达下降,且在胃癌高转移潜能MKN-28M细胞中表达最低,提示Sema3A在胃癌的发生发展中具有重要作用,可能扮演着抑癌基因的作用。
- 骞佩崔兆勋王亚芳庞海林聂娜张贺龙刘理礼
- 关键词：SEMA3A胃癌
- LncRNA-AK058003在缺氧诱导胃癌侵袭转移中的作用被引量：2
- 2016年
- 目的:探讨lncRNA-AK058003在缺氧诱导胃癌侵袭和转移中的作用。方法:SGC7901、MKN45、MKN28三个胃癌细胞系,分别经常氧/缺氧孵育24h后,Trizol法提取3例配对的胃癌细胞总RNA,利用高通量lncRNA芯片比较它们之间的表达谱差异。通过差异倍数、邻近编码基因信息分析、长度特征分析等策略初步筛选与缺氧诱导胃癌侵袭转移相关的关键分子。RT-PCR法检测lncRNA-AK058003在缺氧诱导的胃癌细胞中相对于常氧条件下的表达水平,进一步检测其在20例胃癌临床标本中相对于癌旁组织的表达水平。构建小干扰RNA慢病毒,稳定下调AK058003在SGC7901及MKN45中的表达。Transwell、划痕实验、裸鼠尾静脉注入不同胃癌细胞等体外和体内实验检测抑制AK058003后对常氧和缺氧条件下胃癌侵袭转移的影响。结果:高通量lncRNA芯片比较发现:缺氧诱导的胃癌细胞SGC7901、MKN45和MKN28与常氧条件下的细胞相比,有84个分子的表达在缺氧诱导的胃癌细胞中显著上调(P<0.05),其中差异倍数在3倍以上的共有5个。多重筛选策略提示AK058003可能是缺氧诱导胃癌侵袭转移的关键lncRNA分子之一。RT-PCR结果显示:AK058003在缺氧诱导的胃癌细胞中显著上调,其分别在SGC7901缺氧16h,MKN45缺氧24h,MKN28缺氧48h时达到峰值。进一步RT-PCR结果发现,AK058003在胃癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织。缺氧条件下的Transwell实验结果显示缺氧能够显著增加SGC7901和MKN45的侵袭转移力,而抑制AK058003的表达后,胃癌细胞侵袭转移力明显下降。结论:通过高通量lncRNA芯片比较,首次发现了一系列胃癌细胞中缺氧相关的lncRNAs分子。通过临床标本验证以及功能缺失试验证实lnc-AK058003是系列分子中影响缺氧诱导胃癌侵袭转移的关键lncRNAs分子之一。
- 黄晓峰王亚芳刘理礼
- 关键词：胃癌缺氧
- 缺氧在诱导胃癌细胞上皮间质转化及侵袭中的作用被引量：4
- 2013年
- 目的:研究常氧及缺氧对胃癌细胞侵袭性的影响以及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transi-tion,EMT)在其中起的作用。方法:常氧条件下常规培养胃癌细胞SGC7901;缺氧条件下用二氧化碳/氧气/氮气三气培养箱培养胃癌细胞SGC7901 24h。分别用蛋白质免疫印迹(Western blot)和实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法在蛋白水平和mRNA水平测定与EMT有关的指标E-cadherin及β-catenin的表达,以明确缺氧诱导胃癌细胞EMT的能力。同时以Transwell侵袭实验验证EMT对胃癌细胞侵袭性的作用。结果:缺氧条件下刺激胃癌细胞24h后,细胞发生EMT,其中无论是在蛋白水平还是mRNA水平,E-cadherin表达下降,而β-catenin表达升高;Transwell侵袭实验也证实胃癌细胞接受缺氧刺激后其侵袭能力明显增强。结论:缺氧有增加胃癌细胞侵袭的作用,该作用机制可能与胃癌细胞的EMT改变有关。
- 张慧刘理礼王亚芳张宏博聂勇战吴开春樊代明
- 关键词：胃癌缺氧EMT
- 481例恶性肿瘤住院患者血栓发生情况分析被引量：7
- 2016年
- 目的:通过观察记录恶性肿瘤患者血栓发生情况,分析其血栓形成的高危因素,对血栓的防治提供依据和指导。方法:选取自2014年1月以来住院接受化疗的肿瘤患者共481例,记录其临床生物学特征、实验室检查结果,观察记录患者血栓发生情况,分析其形成的高危因素。结果:总体血栓发生率为4.8%(23/481),不同部位的肿瘤血栓发生率从高到低分别为肠道肿瘤8.3%(3/3 6)、胃癌7.7%(9/117)、肺癌4.7%(6/128)、其他肿瘤2.9%(3/104)和妇科肿瘤2.1%(2/96);在23例血栓患者中,有1例患者在确诊前2周发现血栓形成,占血栓发生的4.3%(1/23);有11例患者在确诊时及确诊后的前3个月发现血栓形成,占47.8%(11/23);有5例在确诊后3个月到6个月内发现血栓形成,占21.7%(5/23),其余6例血栓发生在确诊后的6个月到2年内,共占26.1%(6/23)。其中有95.7%(22/23)的患者为中晚期,有69.6%(16/23)的血栓患者并无血栓相关症状。根据Khorana风险预测模型,高危患者的血栓发生风险高于低危患者。结论:应对住院接受化疗的肿瘤患者进行必要的筛查和预防,降低血栓的发生,改善患者的生活质量。
- 张宁雷梦瑶黄晓峰杨雪曲直胡雯王赟王亚芳刘理礼王宏玫
- 关键词：恶性肿瘤化疗住院患者血栓
- TGF-β上调Notch3诱导上皮间质转化在促进肺癌骨转移中的作用被引量：6
- 2016年
- 目的:研究TGF-β上调Notch3表达诱导EMT在肺癌骨转移中的作用。方法:免疫荧光、蛋白印记和RT-PCR方法检测Notch3在TGF-β诱导下上皮、间质标记物以及上皮间质转化相关转录因子Twist、Snail和ZEB-1的表达变化;利用慢病毒包装Notch3正义表达载体和ZEB-1 siRNA载体分别上调Notch3和抑制ZEB-1的表达后,采用免疫荧光、蛋白印记方法检测抑制EMT转录因子ZEB-1的表达后,对上皮间质标记物的影响;进而通过体外迁移和侵袭试验观察抑制ZEB-1的表达后对Notch3高表达细胞系的迁移和侵袭能力的影响;最后体外ELISA法检测骨转移相关分子p THr P和IL-6的表达,探讨Notch3通过诱导EMT在促进肺癌骨转移中的作用。结果:Notch3 siRNA抑制其表达后能够逆转TGF-β诱导的上皮标记物和间质标记物的表达变化,这一现象是通过影响EMT转录因子ZEB-1实现的。进而利用慢病毒包装系统,构建了Notch3过表达细胞株和ZEB-1 siRNA细胞株,免疫荧光和蛋白印记试验发现,Notch3过表达载体能够抑制上皮标记物的表达,上调间质标记物的表达,促进EMT的发生,而抑制ZEB-1的表达后能够逆转这一现象。最后,体外侵袭试验和ELISA试验发现,Notch3高表达能够增加肺癌细胞的侵袭能力以及p THr P和IL-6的分泌,而抑制ZEB-1的表达后可明显降低其转移能力以及p THr P和IL-6的分泌。结论:Notch3参与了TGF-β诱导肺癌细胞上皮间质转化过程,并在NSCLC骨转移中发挥作用。
- 杨雪冯征张宁王亚芳赵正维周勇安
- 关键词：NOTCH3TGF-Β上皮间质转化骨转移
- Sema3A在胃癌增殖和侵袭中作用的初步研究被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨Sema3A在胃癌增殖和侵袭中的作用。方法:构建Sema3A正义表达载体,经慢病毒包装,感染胃癌高转移潜能MKN-28M细胞,获得外源性稳定表达的Sema3A胃癌细胞株。利用MTT法、克隆形成实验、细胞凋亡实验观察Sema3A过表达对胃癌细胞生长增殖能力的影响。Transwell侵袭实验观察Sema3A过表达对胃癌细胞体外侵袭转移能力的影响。结果:慢病毒包装Sema3A正义表达载体转染入胃癌细胞MKN-28M后,有效增加了Sema3A基因的表达。Sema3A慢病毒包装载体感染MKN-28M细胞后,与对照组相比,细胞生长、增殖速度明显减慢(P<0.05),克隆形成率明显下降(P<0.05),细胞凋亡明显增加(P<0.05),体外侵袭试验表明外源性上调Sema3A显著降低了高转移细胞系MKN-28M的侵袭转移能力(P<0.05)。结论:成功构建了外源性过表达Sema3A基因的慢病毒载体,上调Sema3A基因的表达显著降低了胃癌高转移系MKN-28M细胞的生长增殖能力,抑制了侵袭转移能力,提示Sema3A在抑制胃癌的发生发展中具有重要作用。
- 骞佩王亚芳庞海林张贺龙刘理礼
- 关键词：SEMA3A胃癌增殖
- KLF8在缺氧诱导胃癌细胞多药耐药中的作用被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨KLF8(Kruppel-like factor 8)在缺氧诱导胃癌细胞多药耐药表型中的作用。方法:利用Western blot和实时定量PCR的方法检测三株胃癌细胞系MKN28、MKN45、SGC7901在常氧及缺氧条件下KLF8的表达水平。Western blot和实时定量PCR检测胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR、SGC7901/ADR和亲本细胞系SGC7901中KLF8的表达水平。构建KLF8正义表达载体及KLF8小干扰RNA的慢病毒载体,将其转染入实验细胞中,用Western blot和实时定量PCR的方法检测KLF8表达量的变化。MTT、Annexin V/PI染色法及阿霉素蓄积量与潴留实验检测KLF8在缺氧诱导胃癌细胞多药耐药表型中的作用。结果:缺氧可诱导胃癌细胞系MKN28、MKN45、SGC7901中KLF8的表达升高。与胃癌亲本细胞系相比,KLF8在胃癌耐药细胞系中的表达升高,并且在SGC7901/VCR细胞中表达升高的更为明显。外源性转染KLF8后可显著增加胃癌细胞中KLF8的表达量,KLF8小干扰RNA可有效降低常氧及缺氧条件下胃癌细胞中KLF8的表达。常氧条件下,外源性转染KLF8的正义表达载体可增加胃癌细胞对不同化疗药物的耐受性,降低化疗药物诱导的胃癌细胞凋亡指数,同时可增加细胞内阿霉素的泵出率。缺氧条件下,KLF8小干扰RNA能够逆转胃癌细胞中上述现象的发生。结论:初步实验结果发现了一个新的缺氧反应分子-KLF8。表型试验证实该分子在缺氧诱导胃癌多药耐药中发挥作用。
- 杨雪王亚芳张慧刘理礼
- 关键词：FACTOR多药耐药胃癌缺氧
- Shugoshin1在胃癌多药耐药中的作用
- 目的：探讨shugoshin1在胃癌多药耐药中的作用。方法：用RT-PCR和Western-blot法检测SGO1在胃癌多药耐药株SGC7901/VCR,SGC7901/ADR及亲本细胞SGC7901中的表达差异。通过构...
- 王亚芳刘理礼张宏博刘向强张慧张宁张贺龙
- 关键词：多药耐药胃癌慢病毒
- 小细胞肺癌组织中lncRNA表达谱的差异被引量：6
- 2014年
- 目的:观察长链非编码RNA(lncRNA)在未发生转移的小细胞肺癌和发生转移的小细胞肺癌组织中表达的差异。方法:利用高通量lncRNA芯片技术分别检测3例未发生转移的小细胞肺癌组织和3例发生转移的小细胞肺癌组织中lncRNA表达谱的变异,经对原始数据进行预处理达到均一化后,筛选出差异表达的lncRNA,进行聚类分析。结果:将lncRNA表达在发生转移的小细胞肺癌组织中与未发生转移的小细胞肺癌组织中的变化倍数在2倍以上并有显著差异(P<0.05)的lncRNA,确定为差异性表达的lncRNA。其中在3例发生远处转移的患者肺癌组织中变化均在2倍以上的共842条,占所有lncRNA的12.1%。其中,2倍以上表达上调的共440条,2倍以上表达降低的共402条;5倍以上表达升高的共31条;5倍以上表达降低的共65条。结论:发生转移的小细胞肺癌组织与未发生转移的小细胞肺癌组织比较,lncRNA表达谱发生显著变化。提示差异性表达的lncRNAs参与了小细胞肺癌侵袭和转移的恶性表型。
- 王亚芳卢强赵晋波钟代星冯征程少毅贠宇辉蒋梦龙王艳周勇安
- 关键词：长链非编码RNA小细胞肺癌
- LncRNA在缺氧诱导的胃癌细胞中表达谱的变化被引量：8
- 2013年
- 目的:观察长链非编码RNA(lncRNA)在常氧条件下的胃癌细胞及缺氧诱导的胃癌细胞中表达谱的变化。方法:利用lncRNA芯片技术检测常氧条件下的胃癌细胞,缺氧诱导的胃癌细胞中lncRNA表达谱的变异,经对原始数据进行预处理达到均一化后,筛选出差异表达lncRNA,进行分析。结果:与常氧条件下的胃癌细胞相比较,缺氧诱导胃癌细胞中1.5倍以上变化并有显著差异(P<0.05)的lncRNA,确定为差异表达lncRNA。其中在三种胃癌细胞中的变化均在1.5倍以上的共254条,占所有lncRNA的3.6%;大于1.5倍上调的共136条,1.5倍以上降低的共118条;2倍以上上调的共30条;2倍以上降低的共25条;3倍以上升高的共5条;3倍以上降低的共5条。结论:缺氧诱导的胃癌细胞与常氧的胃癌细胞比较,lncRNA表达谱发生显著变化。提示差异性表达的lncRNAs可能参与了缺氧环境下胃癌细胞多种恶性表型的变化。
- 王亚芳刘理礼靳海峰张慧张宏博聂勇战吴开春樊代明
- 关键词：长链非编码RNA胃癌缺氧
