涂三芳 作品数:60 被引量:178 H指数:8 供职机构: 南方医科大学珠江医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 广州市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
氧化还原状态的改变控制手霉素诱导HL-60白血病细胞凋亡 被引量:7 2008年 目的研究手霉素对HL-60白血病细胞的作用,探讨其作用机制,主要是线粒体的改变。方法使用人的白血病细胞株HL-60细胞。MTT细胞毒性测定评价对白血病细胞的作用,使用Annexin V和一氧化氮(nitric oxide,NO)染料标记细胞,应用流式细胞仪术检测细胞内NO生成和细胞凋亡。细胞内超氧阴离子通过二氢乙啶(dihydroethidium,DHE)测定。应用化学发光法测定超氧歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。采用荧光法测定谷胱甘肽(glutathi-one,GSH),萤光素-萤光素酶发光法测定ATP含量。免疫印迹技术检测细胞色素C和Mn-SOD的表达。结果手霉素引起HL-60细胞活性的下降,且呈剂量依赖性。手霉素诱导产生反应性氧基(reactive oxygen species,ROS):NO和超氧阴离子,降低GSH,但不影响SOD。手霉素诱导线粒体降低细胞ATP的含量,线粒体肿胀和细胞色素C从线粒体释放到细胞质。手霉素诱导的凋亡与ROS的增加有关。用N-乙酰基-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)抑制ROS可保护HL-60细胞逃避手霉素的细胞毒作用和避免手霉素诱导的凋亡。结论细胞内ROS的产生对手霉素的细胞毒作用起非常重要的作用。手霉素通过包括上游ROS产生,线粒体形态改变和细胞色素C释放的线粒体途径,诱导白血病细胞凋亡。 佘妙容 郭坤元 牛新清 卢晓珣 涂三芳关键词:白血病 凋亡 手霉素 线粒体 超氧歧化酶 Venetoclax联合去甲基化药物治疗复发/难治性急性髓系白血病的疗效及预后分析 被引量:5 2021年 目的:评估venetoclax联合去甲基化药物治疗复发/难治性急性髓系白血病(AML)患者的疗效、不良反应及预后情况。方法:回顾性分析2018年7月—2020年12月接受venetoclax联合去甲基化药物的22例复发/难治性AML患者的临床资料。结果:中位随访时间9.86(95%CI 7.58~12.14)个月,19例患者获得最佳客观应答,其中7例达完全缓解,6例达骨髓完全缓解伴不完全血液学恢复,6例达部分缓解,3例患者对venetoclax联合治疗无反应。发生Ⅲ~Ⅳ级血小板计数下降、白细胞减少的患者分别为5例和10例;3例患者因Ⅲ~Ⅳ级血液学毒性停药。1例患者因过度疲乏停药。2例患者发生实验室定义的肿瘤溶解综合征,无一例临床肿瘤溶解综合征。12例患者死亡,中位总生存期为8.71(95%CI 4.65~12.77)个月,1年的预期累积总生存率为(36.6%±11.8%);7例患者复发,中位无事件生存期为5.23(95%CI 2.07~8.39)个月,1年的预期累积无事件生存率为(29.7%±11.0%)。结论:Venetoclax耐受性良好,具有较好的安全性。Venetoclax联合去甲基化药物的靶向治疗可使复发/难治性AML患者获得较高的短期缓解率,从而为造血干细胞移植提供有利的时间窗。 盘婉盈 张映璇 涂三芳 黄睿 郭梦琪 何颖芝 杜静文 宋朝阳 李玉华 黄宇贤关键词:复发性 急性髓系白血病 急性髓系白血病预后相关因素研究进展 被引量:5 2011年 急性髓系白血病(AML)是一种具有显著异质性的血液系统恶性克隆性疾病。细胞遗传学改变很大程度上影响了患者的治疗和预后。随着生物学和计算机技术的不断发展,越来越多的预后相关因素被确认:如KIT、FLT3、NPMl和CEBPA等基因突变:微阵列技术也确认了一些与预后相关的独特的基因表达特征;microRNA的表达、单核苷酸多态性分析和DNA甲基化特征也发现了一些重要的AML预后亚型。 武玉慧 涂三芳 郭坤元 李玉华关键词:预后相关因素 急性髓系白血病 单核苷酸多态性分析 恶性克隆性疾病 DNA甲基化 遗传学改变 重组人血小板生成素可能通过调节免疫负调控因子水平治疗免疫性血小板减少性紫癜 被引量:8 2014年 目的观察使用重组人血小板生成素(rh TPO,特比澳)前后免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者血浆IL-10,CTLA-4,TGF-β1变化情况,并与肾上腺皮质激素治疗前后ITP患者以及正常人血浆IL-10,CTLA-4,TGF-β1含量的比较。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定21例ITP患者(其中11例使用rh TPO治疗,10例使用肾上腺皮质激素治疗)治疗前、后及15名正常对照者血浆IL-10,CTLA-4,TGF-β1水平,并对检测结果进行分析。结果 ITP患者血浆中IL-10、CTLA-4、TGF-β1水平明显低于正常人;经rh TPO或肾上腺皮质激素治疗后IL-10,CTLA-4,TGF-β1水平均有明显升高,并恢复至正常人水平;rh TPO及肾上腺皮质激素升高ITP患者血浆中IL-10,CTLA-4,TGF-β1水平的程度无差别。结论 ITP患者IL-10,CTLA-4,TGF-β1水平低于正常人,经治疗后水平可恢复正常;单用rh TPO后三种细胞因子水平显著升高,提示rh TPO可能有免疫调节的作用。 陶媛 吴秉毅 杜庆锋 孙璨 林遐 黄宇贤 涂三芳 宋朝阳 陈土珍关键词:免疫性血小板减少性紫癜 重组人血小板生成素 白细胞介素10 细胞毒T淋巴细胞相关抗原4 转化生长因子Β1 Raji细胞逃逸NK细胞免疫杀伤机制的初步探讨 目的:观察同种异体 NK 细胞对人 B 细胞淋巴瘤 Raji 细胞的杀伤活性,并初步探讨 Raji 细胞逃逸 NK 细胞免疫杀伤的机制。方法:以 NK 细胞杀伤敏感细胞株 K562作为对照,应用 LDH 释放法检测不同效... 周健 郭坤元 梅家转 牛新清 涂三芳 王杨 何颖芝 孙明 吴远彬关键词:自然杀伤细胞 自然杀伤细胞受体 文献传递 U251细胞溶解物体外诱导人TCR VβT细胞增殖和杀伤活性的研究 2008年 目的了解神经胶质瘤U251细胞溶解物lysate体外诱导人外周血T细胞的特异性细胞毒作用和T细胞受体(TCR)vB谱系表达和克隆性变化情况。方法采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养方法,以lysate作为刺激原体外诱导外周血单个核细胞增殖,应用LDH释放法检测不同效靶比时诱导后T细胞杀伤U251和Raji细胞的细胞毒活性,同时利用RT-PCR基因扫描技术分析诱导前、后TCR Vβ亚家族的克隆性增殖特点。结果基因扫描显示lysate诱导前5例健康人全部TCR Vβ谱型呈高斯(钟型)分布,T细胞均为多克隆;lysate诱导后部分TCR Vβ亚家族T细胞呈单克隆、寡克隆或寡克隆趋势生长。相同效靶比时lysate诱导前、后T细胞对U251细胞杀伤活性之间的差异有统计学意义(P〈0.05);而对Raji细胞的杀伤活性之间的差异无统计学意义(P〉0.05)。结论U251细胞溶解物lysate在体外可诱导T细胞呈克隆性增殖,此优势增殖的克隆性T细胞对U251细胞具有特异性细胞毒作用。 周健 胡亮杉 郭坤元 涂三芳 王杨 孙明 吴远彬关键词:T细胞 克隆性 移植物抗宿主病与巨细胞病毒感染关系的研究进展 被引量:8 2016年 异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗白血病可以提高患者总体生存率与无病生存率,减少白血病复发。然而,尽管allo-HSCT被越来越广泛地应用在白血病治疗方面,移植物抗宿主病(GVHD)和巨细胞病毒(CMV)感染仍然是allo-HSCT后的常见并发症,是导致患者死亡的重要原因。过去的研究发现,allo-HSCT后GVHD与CMV感染之间可能存在着相互促进的密切联系,但尚未有明确定论,故关于两者关系的研究一直是造血干细胞移植临床研究的一个热点。近年来,随着相关领域研究的不断开展与深入,关于GVHD与CMV感染的关系及其机制取得了较大的进展。本文主要就患者行异基因造血干细胞移植后CMV感染和GVHD及两者之间的关系及机制等作一综述。 谢玮鑫 黄文发 涂三芳 李玉华关键词:移植物抗宿主病 巨细胞病毒 异基因造血干细胞移植 异基因造血干细胞移植治疗急性单核细胞白血病患者的疗效及预后分析 被引量:2 2020年 目的:探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗急性单核细胞白血病(AML-M5)患者的疗效及影响预后的相关因素。方法:收集2009年4月至2019年10月于南方医科大学珠江医院行allo-HSCT治疗的AML-M5患者71例的临床资料。分析患者移植物抗宿主病发生率、移植后累积总生存(OS)率、累积无进展生存(PFS)率、移植相关死亡(TRM)率、复发率以及影响预后的危险因素。结果:移植后,66例患者获得造血重建,粒系植入中位时间12(9-26)d,巨核系植入中位时间13(8-72)d。急、慢性移植物抗宿主病的发生率分别为33.8%(24/71)和36.6%(26/71)。中位随访时间为13.81(0.16-112.54)个月;中位OS和PFS时间分别为31.27和26.07个月。移植后1年和3年累积OS率分别为64.9%和48.6%,1年和3年累积PFS率分别为55.0%和39.5%。1年和3年累计复发率分别为24%和40%。多因素分析显示,移植前复发是影响患者OS(HR=2.32,95%CI:1.17-4.62,P=0.02)和PFS(HR=3.08,95%CI:1.61-5.90,P=0.001)的独立危险因素;移植后真菌感染是影响患者OS(HR=2.71,95%CI:1.32-5.56,P=0.007)和PFS(HR=2.87,95%CI:1.40-5.86,P=0.004)的独立危险因素;FLT3突变是影响患者PFS(HR=2.13,95%CI=1.07-4.24,P=0.03)的独立危险因素。结论:AML-M5属于中高危白血病,allo-HSCT能改善患者的生存及预后。移植前复发和移植后真菌感染是影响allo-HSCT疗效的重要因素。 盘婉盈 李可昕 吴少杰 郑雅龄 邓兰 黄睿 涂三芳 宋朝阳 李玉华 黄宇贤关键词:异基因造血干细胞移植 急性单核细胞白血病 侵袭性真菌感染 表皮生长因子受体通路底物8疫苗对乳腺癌细胞的抑制效应及其可能机制 被引量:2 2014年 目的:探索表皮生长因子受体通路底物8(epidermal growth factor receptor substrate 8,EPS8)疫苗对乳腺癌细胞的抑制效应及其可能的机制。方法:Western blotting检测EPS8蛋白在小鼠乳腺癌4T1细胞株中的表达。通过基因重组、表达和纯化等技术制备特异性的小鼠源性EPS8,以EPS8蛋白为靶点制备抗肿瘤疫苗并免疫BALB/c小鼠,间接ELISA测定免疫前后不同时间小鼠血清内抗EPS8抗体效价;流式细胞术检测免疫前后的脾T淋巴细胞亚群比例。建立乳腺癌4T1细胞荷瘤小鼠模型并接种EPS8疫苗,接种佐剂作为对照,比较2组荷瘤小鼠的生存期、肿瘤体积、肿瘤重量,计算EPS8疫苗抑瘤率;流式细胞术检测荷瘤小鼠脾T淋巴细胞亚群比例,LDH法检测其细胞毒性T细胞(CTL)杀伤率。结果:EPS8蛋白在乳腺癌4T1细胞株中高表达。成功构建的EPS8蛋白疫苗免疫小鼠后产生抗EPS8抗体,且随着免疫次数的增加,小鼠体内抗EPS8抗体滴度呈上升趋势。乳腺癌4T1细胞接种于经EPS8疫苗或佐剂免疫后的小鼠后,与佐剂对照组相比,EPS8疫苗组小鼠生存期显著升高[中位生存时间:44(38~50) vs 37 (34~40) d; t=2.477, P=0.043],肿瘤质量显著降低[(2.21±0.35)vs(3.31±0.88)g;t=3.574,P=0.009],EPS8疫苗的抑瘤率为33.23%。EPS8疫苗组小鼠脾CD4+T比例和CD4+/CD8+比值均显著高于佐剂对照组(P〈0.001),EPS8疫苗组CD4+CD25+Treg/CD4+T细胞的比值显著低于佐剂对照组(P〈0.001)。效靶比为20〖DK〗∶1时,EPS8疫苗组CTL对靶细胞的杀伤活性即显著高于佐剂对照组[(19.05±4.41)% vs (13.36±3.10)%;t=2.263,P=0.040] 。结论:EPS8疫苗不仅具有诱导小鼠产生体液免疫应答的功能,还能够降低荷瘤小鼠体内Treg细胞比例,激活机体内T细胞免疫功能;EPS8疫苗可抑制肿瘤的生长、有效延长荷瘤小鼠的生存期。 涂三芳 李玉华 宋朝阳 邓兰 黄睿关键词:肿瘤疫苗 乳腺癌 舒尼替尼体内诱导耐药鼻咽癌细胞表达NKG2DLs增强NK细胞的抑瘤作用 2010年 目的:探讨体内条件下舒尼替尼对耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞NKG2DLs(natural killer group 2 member D ligands)表达的诱导作用,及其对NK细胞抗肿瘤活性的影响。方法:建立ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞裸鼠皮下移植瘤模型,分如下8组:A、E组分别接种ABCG2high、ABCG2lowCNE2/DDP细胞,B、F组分别接种舒尼替尼处理的ABCG2high、ABCG2lowCNE2/DDP细胞,C、G组分别接种ABCG2high、ABCG2lowCNE2/DDP细胞后再输注NK细胞;D、H组接种舒尼替尼处理的ABCG2high、ABCG2lowCNE2/DDP细胞后再输注NK细胞。检测各组裸鼠成瘤时间、成瘤率、肿瘤体积和抑瘤率。免疫组织化学法检测移植瘤组织中NKG2DLs的表达。结果:A、B、C、D和E、F、G、H组肿瘤出现时间分别为(5.43±1.00)、(8.50±0.35)、(11.10±1.25)、(13.56±1.23)d和(9.00±1.00)、(12.30±0.78)、(14.50±0.50)、(17.25±0.77)d,其中舒尼替尼与NK细胞联合处理组(D和H组)成瘤时间最晚(P<0.01)。A、B、C、D和E、F、G、H组肿瘤质量分别为(2.63±0.89)、(1.00±0.03)、(0.65±0.08)、(0.21±0.27)g和(2.79±0.83)、(1.18±0.77)、(0.96±0.50)、(0.86±0.82)g,其中舒尼替尼与NK细胞联合处理组肿瘤质量最小(P<0.01);舒尼替尼与NK细胞联合处理的D组和H组的抑瘤率分别为92%和69%。舒尼替尼上调移植瘤组织中NKG2DLs的表达,且ABCG2highCNE2/DDP细胞移植瘤中的NKG2DLs表达率高于ABCG2lowCNE2/DDP细胞。结论:舒尼替尼可在体内诱导CNE2/DDP移植瘤组织表达NKG2DLs,增强NK细胞的抗肿瘤作用。 黄宇贤 王杨 李玉华 宋朝阳 陈土珍 周璇涂三芳',何颖芝',郭坤元 周璇 涂三芳 何颖芝 郭坤元关键词:舒尼替尼 NKG2D配体 裸鼠移植瘤