林娜
- 作品数:9 被引量:23H指数:3
- 供职机构:天津市第一中心医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金天津市卫生局科技攻关项目天津市科委重点资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- bFGF siRNA表达质粒对胶质瘤中STAT3基因抑制作用的研究
- 王淑杰周忆频林娜张飚张怡王金环闵莉徐新女刘宏胜杨娇
- 由于RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。目前国内外尚未见以bFGF siRNA表达质粒作为bFGF的抑制剂来阻断STAT3信号通路的方法...
- 关键词:
- 关键词:胶质瘤BFGFSIRNASTAT3基因
- 白藜芦醇对U251人脑胶质瘤细胞生长的抑制及相关机制的研究被引量:3
- 2009年
- 目的:研究白藜芦醇(Res)对U251人脑胶质瘤细胞生长的抑制及相关作用机制。方法:将不同浓度Res作用于U251细胞系,MTT法检测Res对U251细胞生长增值的抑制作用,流式细胞仪(FCM)检测Res.对细胞凋亡的影响,免疫组织化学法检测Res处理前后Bcl-2,Bcl-XL,CyclinD1,STAT3的表达及Western blot(蛋白印迹法)法检测Bcl-2,Bcl-XL,Cy-clinD1,Caspase-3,Bax,STAT3的表达。结果:经Res处理后的U251细胞,MTT结果显示细胞增殖现象被抑制,并呈时间-剂量依赖性;FCM显示随着Res作用时间的延长,细胞晚期凋亡数增加;免疫组织化学法显示Bcl-2,Bcl-XL,CyclinD1,STAT3的表达下降;Western-blot检测显示Bcl-2,Bcl-XL,CyclinD1,STAT3表达下降,而Caspase-3和Bax的表达上调。结论:Res诱导U251细胞凋亡的分子机制可能是通过下调Bcl-2,Bcl-XL蛋白的表达,而上调Bax与Caspase-3蛋白的表达,并随着Res剂量与作用时间的延长这种趋势在加强。
- 刘宏胜王金环徐新女林娜张飚冯学泉罗仲秋
- 关键词:白藜芦醇BCL-2BAXCASPASE-3
- 白藜芦醇诱导U251人脑胶质瘤细胞凋亡的实验研究
- 刘宏胜王金环徐新女刘萍崔桅陈立林娜卢轶卜国云
- 该课题是天津市卫生局中医处立项课题,批准编号:2005092。脑胶质瘤病是一种常见的中枢神经系统肿瘤性病变,是神经外科难治性疾病之一。近30年来,恶性胶质细胞瘤的治疗效果未能得到明显改善。因此,开发、研制治疗脑胶质瘤的新...
- 关键词:
- 关键词:白藜芦醇胶质瘤细胞人脑胶质瘤神经外科
- 诱导C57鼠获得抗β淀粉样蛋白抗体的新途径
- 2009年
- 目的探讨诱导C57鼠产生β淀粉样蛋白抗体的新途径。方法收获小鼠骨髓细胞,定向培养为树突状细胞(DCs),培养期间加用突变型β淀粉样蛋白1-42多肽刺激致敏。流式细胞仪测定收获的DCs成熟度。将致敏DCs作为疫苗接种至C57鼠,以β淀粉样蛋白+氟氏佐剂接种作为阳性对照,用间接ELISA法测定小鼠的抗β淀粉样蛋白抗体滴度。结果用突变型β淀粉样蛋白刺激DCs可促进其表面CD11c、CD86、MHC-Ⅱ及CD80分子表达从54.69%、76.68%、44.77%和58.65%分别提高到77.49%、92.76%、85.52%和75.57%。接种DCs后14d抗β淀粉样蛋白抗体滴度开始逐渐升高,一直持续到免疫后35d仍未见降低。相对于佐剂疫苗7d显著升高、21d达峰的变化曲线有所平缓和滞后。DCs疫苗免疫后平均抗体滴度最高达到2425.17倍,但比佐剂疫苗组要低(平均最高3200倍)。结论采用DCs疫苗能有效地诱导C57鼠产生足够的抗β淀粉样蛋白抗体。
- 罗仲秋王金环徐新女冯全胜王淑杰林娜刘宏胜
- 关键词:树突状细胞Β淀粉样蛋白阿尔茨海默病
- 碱性成纤维细胞生长因子小干扰RNA与人类免疫缺陷病毒1型病毒蛋白R基因对裸鼠胶质瘤的抑瘤作用被引量:4
- 2010年
- 目的 探讨重组腺病毒介导的碱性成纤维细胞生长因子小干扰RNA(bFGF-siRNA)与人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)病毒蛋白R(Vpr)基因联合治疗脑胶质瘤的效果.方法 以人脑胶质瘤LN229细胞感染BALB/c-nu裸鼠,建立动物模型.将30只裸鼠随机分为阴性对照组、空载体组、bFGF-siRNA组、Vpr组和联合治疗组,每组6只,分别定期注射磷酸盐缓冲液(PBS)、空载体腺病毒(rAd5-null)、重组腺病毒rAd5-bFGF-siRNA、重组腺病毒rAd5-Vpr和重组腺病毒rAd5-bFGF-siRNA+rAd5-Vpr,每隔3 d测量肿瘤体积.治疗后4周处死裸鼠,行HE染色、免疫组化染色、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法及电镜检查.结果 bFGF-siRNA组、Vpr组和联合治疗组的肿瘤生长抑制率分别为36.9%、37.2%和58.6%,联合治疗组抑瘤效果最显著(P<0.05).HE染色、免疫组化染色和凋亡检测均显示,联合治疗组抑制细胞增殖与促进细胞凋亡效果最明显(P<0.05).电镜检查显示,联合治疗组肿瘤超微结构的变化最明显.结论 bFGF-siRNA与Vpr联合的基因治疗可以产生明显的协同作用,抑瘤作用较单一治疗明显增强.
- 冯学泉王金环徐新女张飚王淑杰刘宏胜林娜
- 关键词:胶质瘤碱性成纤维细胞生长因子
- 重组腺病毒Vpr诱导脑胶质瘤细胞凋亡的体外研究被引量:8
- 2010年
- 目的 探讨重组腺病毒介导的人类免疫缺陷病毒1型病毒蛋白R(HIV1-Vpr)体外对胶质瘤细胞U251凋亡的影响.方法 将U251细胞分为正常对照组、空载体组和实验组进行细胞培养,24 h后空载体组和实验组按MOI=50分别进行空载体腺病毒(rAd5-null)和含有HIV1-Vpr基因的重组腺病毒(rAd5-Vpr)转染,转染后用MTT比色法测定细胞增殖活性,用Hoechst染色和流式细胞仪分别检测细胞的凋亡和细胞周期改变,用Western blot方法 检测相关蛋白的表达.结果 rAd5-Vpr能够抑制U251细胞增殖,其作用从转染后48 h开始,随着时间的延长,抑制作用逐渐增强(P<0.05);实验组Hoechst染色观察到明显的细胞凋亡现象;流式细胞周期检测显示实验组细胞G2期比例升高(P<0.05);Western blot结果 显示,实验组U251细胞经转染rAd5-Vpr72 h后,可见Vpr蛋白表达,同时Bcl-2蛋白表达降低,Bax、Caspase3和Fas-L蛋白表达增强.结论 rAd5-Vpr在体外能够抑制U251细胞增殖,诱导细胞周期G2期阻滞和细胞凋亡.
- 冯学泉王金环徐新女张飚王淑杰刘宏胜林娜
- 关键词:神经胶质瘤细胞凋亡人类免疫缺陷病毒1型重组腺病毒
- 从牛精浆中提纯神经生长因子的生物活性检测被引量:3
- 1993年
- 神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)是维持交感神经和感觉神经元生存、发育,并能促进神经突起生长的一种生物活性物质。牛精浆中含量极为丰富,每10ml牛精浆可提纯约0.1mg的NGF。我们改良Gregory等报道的方法,成功地从牛精浆中提纯出低分子NGF,并采用96孔培养板作鸡胚背根神经节无血清培养,对所提纯的NGF进行活性检测,显示出较高的生物活性(2~4ng/ml),进一步证实NGF对促进神经突起的生长及神经元的生存具有重要作用。
- 方煌吴洋管庞清江袁太珍罗永湘刘海雄林娜
- 关键词:神经生长因子提纯
- bFGF小分子干扰RNA诱导胶质瘤U251细胞凋亡作用的研究被引量:7
- 2009年
- 目的:初步探讨以小分子干扰RNA沉默碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导胶质瘤细胞系U251凋亡的机制。方法:将U251细胞分为正常对照组、空载体组和实验组,按4×105个细胞每孔接种于6孔细胞培养板,培养24h后,空载体组和实验组按MOI=50分别进行空载体腺病毒(rAd5-null)和含有bFGF小分子干扰RNA(siRNA)的重组腺病毒(rAd5-bFGF)转染,转染72h后检测各组细胞的凋亡及细胞周期变化情况及其相关蛋白的表达。结果:与正常对照组、空载体组比较,实验组U251细胞经转染bFGF-siRNA后出现了明显的细胞凋亡(P<0.05),但细胞周期未见变化(P>0.05);Westernblot结果显示,实验组U251胶质瘤细胞经转染bFGF-siRNA72h后,bFGF蛋白表达明显降低,同时STAT3及Bcl-2蛋白表达降低,Bax及Caspase-3蛋白表达增强。结论:bFGF小分子干扰RNA能够诱导U251细胞凋亡,其作用可能是通过调节STAT3信号转导通路实现的。
- 冯学泉王金环徐新女张飚王淑杰刘宏胜林娜
- 关键词:成纤维细胞生长因子2细胞凋亡
- Ⅰ型人类免疫缺陷病毒蛋白R对胶质瘤作用的体外研究
- 王金环徐新女刘宏胜吴岚卢轶陈立林娜王淑杰
- 该课题对Vpr在HIV-1导致的CD4+T细胞缺失作用的不断研究认为,HIV-1感染宿主细胞后,Vpr与细胞内多种蛋白相互作用,能够激发HIV-1病毒基因的表达、促进病毒复制、调节宿主细胞凋亡,并诱导宿主细胞周期停滞在G...
- 关键词:
- 关键词:胶质瘤体外