李节法
- 作品数：24 被引量：166H指数：8
- 供职机构：上海交通大学农业与生物学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 利用高分辨率熔解曲线(HRM)分析梨微卫星标记被引量：10
- 2011年
- 以西洋梨(Pyrus communisL.)‘NainVert’的一个矮生型实生系与‘茌梨’(Pyrus bretschneideri Rehd.)的F1杂交群体为试材,对分别源自梨和苹果基因组的4个微卫星(即SSRs)序列多态性进行了高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)分析。结果显示,在测试群体中,TsuENH042和Hi15a13存在两种分型,TsuENH081存在3种分型,而Hi08d09只有1种类型。因此,HRM分析技术可以作为筛查果树微卫星标记多态性或对其进行基因分型的有效手段在相关研究中加以应用。
- 殷豪王彩虹田义轲李节法王然戴洪义
- 关键词：微卫星
- 暖地甜樱桃砧穗组合适应性研究被引量：11
- 2014年
- 【目的】综合评定甜樱桃不同砧穗组合在上海地区的表现。【方法】对以‘大青叶’和(或)‘吉塞拉5号’为砧木的8个甜樱桃品种在上海地区的生长结果习性等进行了对比研究。【结果】在雨量充沛、热量丰富的上海立地条件下,以‘吉塞拉5号’为砧木不但可以有效地控制甜樱桃的树势与生长势,还能够平衡营养生长与生殖生长,促进花束状果枝的形成;就甜樱桃品种而言,经历春季花芽萌动期与夏季花芽分化期间的相对高温后,‘布鲁克斯’、‘拉宾斯’和‘红蜜’等品种依然表现出较优的花器质量、坐果与成花比例。【结论】上海气候条件下,矮化砧木可有效控制甜樱桃的树势与生长势,品种则以‘布鲁克斯’、‘拉宾斯’和‘红蜜’等表现较优。
- 王磊张才喜王小龙李节法杨琪王世平
- 关键词：甜樱桃砧穗适应性
- 砂梨(Pyrus pyrifolia)过敏原蛋白基因(Ppmal)的克隆与表达分析被引量：3
- 2015年
- 【目的】分离和克隆梨过敏原蛋白基因Ppmal(Gen Bank登录号为KP008110),探讨其在梨果实发育过程中的功能。【方法】以砂梨品种‘翠冠’[Pyrus pyrifolia(Burm.f.)Nakai]为试材,在盛花期后30 d对植株果柄进行涂抹赤霉素处理,利用同源克隆和RACE方法克隆目的基因全长序列,并通过实时荧光定量技术和半定量技术分析该基因在梨不同组织以及梨果实发育过程中的表达变化。【结果】Ppmal的全长是906 bp,含有480 bp的开放阅读框(ORF),编码159个氨基酸,预测的蛋白质相对分子质量为17.56 k D,等电点为5.62。生物信息学分析显示该基因没有信号肽序列,没有跨膜结构域,具亲水性。与其他物种的过敏原蛋白基因核苷酸序列同源性超过75%,与苹果和西洋梨编码的氨基酸序列同源性分别高达97.48%和96.23%,进化树分析表明该基因与苹果的进化关系最近。同时,定量结果显示经过赤霉素处理后的果实中该基因的表达量随着果实的生长发育呈现先降低后升高的趋势,并且具有组织差异表达的特点,其表达量在叶片中最大,其次是嫩叶,再次是花,枝条最低。【结论】获得梨Ppmal基因全长,对该基因在砂梨品种‘翠冠’发育过程中的表达分析显示,Ppmal受到赤霉素的调控,并在砂梨果实膨大期发生上调表达。
- 王小龙李节法张才喜王世平许文平
- 关键词：砂梨RACE荧光定量赤霉素
- 梨贝壳杉烯氧化酶基因PpKO的克隆及生物信息学分析被引量：24
- 2010年
- 以黄金梨(Pyrus pyrifolia Nakai)茎尖为试材,应用同源克隆和RACE方法从梨茎尖中克隆到赤霉素合成代谢的关键酶:内根-贝壳杉烯氧化酶(KO)基因cDNA的全长序列,命名为PpKO,GenBank登录号为:HM003112,其长度为1752bp。PpKO的开放阅读框(ORF)编码515个氨基酸,相对分子量为59.007kD,等电点为7.19。氨基酸同源性分析表明,PpKO与已报道的其它植物的KO氨基酸序列具有59.4%～95.9%相似性;氨基酸聚类分析表明,梨和苹果首先聚类,其次是草莓;生物信息学分析表明:PpKO含有细胞色素P450核心功能域FXXGXRXCXG和氨基端的跨膜结构域。
- 李节法田义轲王彩虹田伟宋伟殷豪
- 关键词：生物信息学分析
- 基于DIGE技术的赤霉素增强砂梨库强蛋白质组学研究
- 李节法虞秀明娄玉穗王小龙许文平王世平张才喜
- 苹果不同HRM反应体系分析效果评价被引量：6
- 2012年
- 高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)分析是一种新型的DNA多态性快速筛查技术。本研究以苹果品种"富士"和"舞姿"为试材,用来自苹果基因组的SSR标记CH03d11对不同反应体积、不同DNA浓度以及不同PCR退火程序下的HRM分型效果进行了测试与评估。结果表明:采用5μL反应体积可以获得与10μL或20μL反应体积相同的检测效果。在5μL反应体积中,DNA浓度小到0.25ng/μL时,PCR扩增及随后的HRM分析效果依然良好。另外,研究表明,采用降落PCR扩增模式也能取得良好的HRM多态性检测结果。
- 白牡丹王彩虹殷豪田义轲李节法
- 关键词：HRM降落PCR
- 苹果内根-贝壳杉烯氧化酶基因的克隆及序列分析被引量：6
- 2011年
- 内根-贝壳杉烯氧化酶(KO)是赤霉素合成代谢的关键酶。以苹果(Malus×domestica Borkh.)品种富士(Fuji)为供试材料,应用同源克隆和RACE方法从其茎尖中克隆到KO的cDNA全长序列,命名为MdKO,GenBank登录号:AY563549,其长度为1 859 bp。MdKO的开放性阅读框(ORF)编码514个氨基酸残基,推断其相对分子量为58.9 ku,等电点为7.63。氨基酸同源性分析表明,MdKO与已报道的其他植物的KO氨基酸序列具有较高的相似性;氨基酸聚类分析表明,苹果和梨首先聚类,其次是葡萄;序列结构分析表明MdKO属于细胞色素超家族P450系,具有细胞色素P450的血红素结构域FXXGXRXCXG和跨膜结构域;亚细胞定位分析发现MdKO可能位于内质网膜上。
- 田伟田义轲王彩虹宋伟李节法殷豪
- 关键词：苹果赤霉素
- 根域限制对‘巨峰’葡萄花色苷代谢途径关键基因表达的影响被引量：8
- 2015年
- 【目的】阐明根域限制调控葡萄果皮花色苷合成的分子机制。【方法】以‘巨峰’葡萄为试材,进行根域限制栽培处理,以传统露地栽培为对照,研究‘巨峰’葡萄果实发育过程中果皮花色苷合成相关酶基因转录水平的变化,以及根域限制对果实成熟过程中果皮花色苷合成相关酶基因转录水平的影响。【结果】PAL、4CL、CHS2、CHS3、CHI、F3H1、F3H2、DFR、LDOX、F3’H、F3’5’H、OMT、3GT、5GT的转录水平自转色期开始升高,接近成熟期下降。根域限制下‘巨峰’葡萄花色苷合成相关基因PAL和F3’H的转录表达在果实成熟的部分时期受到上调,而4CL、CHS2、CHS3、CHI、F3H1、F3H2、DFR、LDOX、F3’5’H、OMT、3GT、5GT的转录表达在转色期至成熟过程中均受到了上调,CHS1在果实发育过程中其转录表达无明显上调变化且根域限制与对照差异不大。【结论】根域限制促进了葡萄果皮花色苷合成途径中14个相关基因的转录表达。
- 王博何建军李节法虞秀明白扬谢兆森张才喜白先进赵丽萍王世平
- 关键词：葡萄根域限制花色苷基因表达
- 梨茎尖中PpKO基因表达量的实时荧光定量PCR分析被引量：9
- 2012年
- 以黄金梨不同发育时间的新梢茎尖为试材,应用实时荧光定量PCR技术,对18S rRNA、Actin、GAPDH和S19这4个常用内参基因在梨茎尖组织中的表达稳定性进行了评估。GeNorm软件分析显示,它们表达稳定度的平均值(M)依次是0.365,0.392,0.457和0.517,即表达稳定性从高到低的排序是:Actin>18S rRNA>GADPH>S19。选择Actin作为校正内参基因,对处于不同发育时期的新梢茎尖组织中贝壳杉烯氧化酶基因PpKO的表达量进行研究,发现该基因在新梢生长过程中出现2次表达高峰,基本与春梢、秋梢的快速生长期吻合,且秋梢中的表达量远高于春梢。
- 田义轲李节法王彩虹殷豪白牡丹
- 关键词：内参基因
- 桃树流胶病的发生和防治新技术研究进展被引量：24
- 2012年
- 流胶病为桃树生产上的主要病害之一。本文综述了国内外流胶病的研究情况,分析了引起流胶病的致病菌种类,发病类型和致病表现,常规防治措施及新方法,并综述了桃树品种流胶病抗性差异评价,对流胶病的传播、诊断指标及综合防治措施进行了探讨。
- 李节法王世平张才喜
- 关键词：桃树流胶病病原
