李杰
- 作品数：11 被引量：8H指数：2
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目深圳市基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学水利工程更多>>
- 镉对NRK肾细胞PKCα表达的影响及PKC抑制剂BisⅠ的生物学作用
- 2010年
- 目的：探讨不同浓度氯化镉（CdCl2）对NRK细胞内蛋白激酶Cα（PKCα）mRNA及其蛋白质表达的影响,以及PKC抑制剂Bisindolymalei mide I（Bis I）对镉染毒NRK细胞PKCαmRNA及蛋白质表达的生物学作用。方法：应用实时荧光定量PCR技术检测不同浓度（0、1.25、2.50、5.00、10.00μmol/L）CdCl2对NRK肾细胞处理6h与12h后PKCαmRNA表达的影响,同时用Western blot技术检测CdCl2对NRK肾细胞内PKCα蛋白质表达的影响。用PKC抑制剂Bis I预处理细胞后,用不同浓度CdCl2（0、2.50、5.00μmol/L）进行染毒,再检测PKCαmRNA及蛋白质的表达变化。结果：CdCl2浓度在1.25~10.00μmol/L范围内,可引起NRK肾细胞内PKCαmRNA及蛋白质表达水平升高,并呈时间_剂量_效应关系;PKC抑制剂Bis I能明显抑制镉引起的PKCαmRNA及蛋白质的表达。结论：CdCl2可以诱导NRK肾细胞内PKCαmRNA及蛋白质表达,PKC抑制剂Bis I具有一定程度抑制CdCl2对PKCα的诱作用,因此在抑制CdCl2对生物机体的伤害作用方面具有生物学意义。
- 周丽李杰刘建军徐新云杨淋清
- 关键词：镉蛋白激酶C抑制剂
- 一例三氯乙烯药疹样皮炎患者不同发病时期血清蛋白质组分析被引量：3
- 2014年
- 三氯乙烯（TCE）为工业上广泛使用的有机溶剂,由于工人的保护措施不当,易经呼吸道、消化道和皮肤吸收,引起职业性的三氯乙烯药疹样皮炎（OMLDT）,严重损害患者的皮肤、肝脏、肾脏、胆、脾等器官,甚至使患者因多器官衰竭而死亡.该病的发病机制尚不明确,缺乏监测和诊断的生物学手段,易导致漏诊和误诊,且疗效不佳,后果严重,已成为我国职业卫生的新问题.血清中的蛋白质含量丰富,且很多蛋白质的变化与机体所处的状态息息相关,分析血清蛋白的变化对认识疾病演变过程,分离疾病特征标志和寻找药物靶点具有重要意义.
- 黄培武任晓虎洪文旭杨细飞张航李杰张艳芳刘建军
- 关键词：三氯乙烯药疹样皮炎蛋白质组分析血清蛋白发病时期多器官衰竭皮肤吸收
- 三氯乙烯对L-02肝细胞活力及SET蛋白表达的影响被引量：1
- 2012年
- 三氯乙烯（Trichloroethylene,TCE）是工业上广泛应用的一种有机溶剂,主要通过呼吸道和皮肤进入人体产生职业性危害,吸收后主要蓄积于肝脏、脑、心脏等器官。
- 李杰王晓梅刘建军杨细飞杨亮
- 关键词：三氯乙烯MTT法蛋白印迹
- SET在乳腺癌中的生物学作用
- 目的 探讨SET基因对乳腺癌细胞转移及侵袭的影响.方法 培养MDA-MB-231细胞，利用慢病毒介导的RNA干扰技术构建SET缺陷表达的乳腺癌细胞株；利用MTT吸光度与细胞数目之间的关系绘制细胞生长曲线，并利用公式计算细...
- 李杰任晓虎黄培武洪文旭杨细飞刘建军
- 关键词：乳腺癌
- 特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体及其构建方法和应用，所述shRNA表达载体，包括表达载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点、启动子序列、可表达的SET shRNA的寡核苷酸链模板序列，所述的...
- 刘建军蒋英芝杨细飞李杰周丽
- 文献传递
- 几类化学污染物毒性关键分子鉴别与功能分析及应用研究
- 刘建军杨细飞洪文旭黄海燕袁建辉彭朝琼张艳芳庄志雄王晓梅周丽任晓虎黄新凤刘威申治国李杰
- 化学污染物是一类人类活动中广泛接触的外源性化学物质，可通过环境暴露、饮食摄入等多种途径进入人体，危害人类健康，可导致严重的公共卫生问题。至今，大多数化学污染物的毒性作用机制尚不明确、特异性生物标志物不清及缺乏敏感的检测手...
- 关键词：
- 关键词：化学污染物毒性机制毒性检测
- SET基因shRNA慢病毒载体的构建及其在肝细胞中的表达鉴定
- 2013年
- 目的:构建SET基因shRNA慢病毒表达载体,为研究SET在三氯乙烯毒性机制中的作用提供技术支持。方法:通过NCBI检索SET序列,设计合成5对shRNA片段,退火后连接到慢病毒载体pLVX-shRNA1 vector。挑取筛选的单菌落,经PCR和测序鉴定后提取质粒。将质粒共转染到293T细胞,收集病毒上清,转导入L-02肝细胞中,利用嘌呤霉素筛选得到SET缺陷型细胞,最后利用荧光定量PCR和Western blot鉴定干扰效果。结果:PCR和测序结果证明双链shRNA正确插入慢病毒载体pLVX-shRNA1 vector,共转染293T细胞得到高滴度病毒,转导L-02细胞筛选出SET基因缺陷型细胞。结论:利用慢病毒介导的RNAi技术成功构建了SET基因缺陷型细胞。
- 刘建军蒋英芝叶金波李杰杨细飞周丽黄海燕黄新凤
- 关键词：SETRNA干扰慢病毒
- 稳定干扰SET肝细胞株的生物学鉴定
- 2012年
- 目的:对稳定干扰SET(patient SE translocation)的肝细胞株进行生物学性状鉴定,为研究SET蛋白在肝细胞中的作用奠定基础。方法:培养人肝L-02细胞、慢病毒载体介导的稳定干扰(siRNA)SET L-02肝细胞及psiRNAc L-02肝细胞(空载体转染细胞),于倒置显微镜下观察细胞形态,利用MTT吸光度与细胞数目间关系绘制生长曲线,采用染色体畸变试验观察染色体有无结构异常,软琼脂克隆实验检测细胞的恶性转化。结果:与正常肝细胞比较,稳定干扰SET肝细胞及psiRNAc肝细胞的生长形态无明显变化,3组细胞的生长曲线趋于一致。染色体畸变分析表明SET基因沉默的人肝L-02细胞染色体结构与数目未发生明显改变。软琼脂克隆实验表明SET基因沉默的人肝L-02细胞未发生恶性转化。结论:SET siRNA的导入未引起细胞生物学特征的改变,遗传性状保持稳定,说明所构建的SE7基因沉默的人肝L-02细胞模型是稳定的,为后续的研究提供了工具细胞。
- 周丽李杰黄遂杨细飞刘建军
- 关键词：三氯乙烯生物学性状细胞增殖
- 特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种特异性抑制SET蛋白表达的shRNA表达载体及其构建方法和应用，所述shRNA表达载体，包括表达载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点、启动子序列、可表达的SET shRNA的寡核苷酸链模板序列，所述的...
- 刘建军蒋英芝杨细飞李杰周丽
- 利用免疫共沉淀技术验证SET与eEF1A1在人肝细胞内的相互作用被引量：2
- 2010年
- [目的]探讨SET与eEF1A1在人肝细胞内是否存在相互作用。[方法]以人L-02肝细胞为材料,在非变性条件下提取总蛋白,将鼠抗人SET、兔抗人eEF1A1抗体分别加到总蛋白提取物中,用偶联了琼脂糖珠的Protein A/G分离抗原抗体复合物,最后分别用兔抗人eEF1A1、鼠抗人SET抗体进行Western blotting检测。[结果]在用SET抗体免疫共沉淀下来的蛋白复合物中检测到eEF1A1,同时在用eEF1A1抗体免疫共沉淀下来的蛋白复合物中也检测到SET。[结论]SET与eEF1A1在人肝细胞内存在相互作用。
- 杨亮杨细飞张毅刘建军李杰
- 关键词：SET免疫共沉淀相互作用
