朱翠侠
- 作品数：47 被引量：112H指数：6
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 一种结核杆菌融合抗原的克隆表达及活性测定被引量：2
- 2008年
- 目的进一步分析优化结核杆菌抗原优势表位,获得高特异性融合抗原,以满足研制结核病检测试剂的需要。方法用分子生物学软件分析结核杆菌四种抗原MPT64、Mtb8、Mtb8.4和Mtb16.3的优势表位后,分别插入到pBVIL1载体中,构建表达质粒,并利用pBVIL1载体特点,将其基因连接后,进行融合表达,经纯化获得抗原,用间接ELISA法测其活性。结果各抗原优势肽段及融合抗原均获得了高效表达,融合抗原的特异性和灵敏性均高于各单一肽段。结论此融合抗原可用于研制结核病的诊断试剂。
- 宋晓国陈坤冯晓燕王国华朱翠侠李惠文韦攀健张贺秋
- 关键词：MPT64MTB8.4
- 丙型肝炎病毒NS3蛋白酶在酵母系统中的可溶性表达被引量：3
- 2005年
- 利用毕赤酵母系统表达具有催化活性的丙型肝炎病毒 (HCV)NS3蛋白酶 .将PCR直接扩增的病毒NS3丝氨酸蛋白酶基因和重组的带有辅酶的单链NS3 NS4A蛋白酶基因 ,分别插入表达载体pPICZαA的EcoRⅠ和XbaⅠ克隆位点 ,转化毕赤酵母GS115 ,可溶性表达NS3蛋白酶和单链NS3 4A蛋白酶 ;ELISA法测定表达蛋白酶的抗原性 ;原核高效表达载体pBVIL1表达酶切底物NS5A B片段 ,体外与蛋白酶共同温育 ,SDS PAGE鉴定蛋白酶催化活性 .载体测序结果表明 ,重组载体pPICZαA NS3和pPICZαA NS3 4A中的目的基因序列插入正确 ;SDS PAGE结果显示 ,培养物上清中存在分泌型目的蛋白带 ;ELISA结果证实 ,表达蛋白与HCV阳性血清有结合活性 ;蛋白酶与底物NS5A B片段不同作用时间的SDS PAGE ,看到约 2 4kD处底物条带的分解 .说明用毕赤酵母表达系统成功地表达了可溶性HCVNS3和单链NS3 4A蛋白酶 ;两种结构形式的蛋白酶在体外系统中都有催化活性 ,同时也都具有抗原性 .该研究为大量和方便地获得有催化活性的HCVNS3蛋白酶提供了有效途径 .
- 胡巍凌世淦宋晓国刘文何竞朱翠侠陈坤
- 关键词：丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶毕赤酵母可溶性表达
- 利用IFNγ-ELISPOT检测肝癌复合表位抗原的细胞免疫反应
- 目的：构建肝癌多表位基因和含Tat PTD的多表位基因的原核表达载体,表达纯化融合蛋白,比较其细胞免疫反应。方法：中心模板法合成多表位和Tat PTD;PCR产物分别克隆入原核表达载体pBVIL1,构建含Tat PTD及...
- 何竞张贺秋王国华宋晓国陈坤朱翠侠凌世淦
- 关键词：肝癌细胞免疫反应融合蛋白
- 文献传递
- 基于结核分枝杆菌多表位抗原的诊断试剂研制及临床评价
- 2012年
- 目的:基于结核分枝杆菌多表位抗原研制的新型结核免疫诊断试剂进行临床评价,评价其灵敏度和特异性,探讨其应用价值。方法:采用建立的间接ELISA方法,分别检测结核病和肺部其他疾病及健康人群血清样品。结果:508份肺结核患者样品中,检出阳性433份,灵敏度85.23%(433/508),健康人523份中,检出阳性49份,特异性90.63%(49/523)。结论:研制的新型的结核抗体免疫诊断试剂灵敏度高,特异性强,可用于结核感染的大规模筛查试验。
- 陈堃冯晓燕杨锡琴宋晓国王国华朱翠侠邓敏许辛张贺秋
- 关键词：结核分支杆菌酶联免疫法
- 狂犬病病毒优势表位肽抗原及其用途
- 本发明公开了属于狂犬病疫苗技术领域的狂犬病病毒优势表位肽段抗原及其用途。本发明利用生物信息学软件筛选优势表位抗原区段，通过PCR扩增出优势表位抗原区段编码基因，并在大肠杆菌中高效表达，获得高纯度抗原，经间接ELISA实验...
- 冯晓燕张贺秋宋晓国王国华陈堃修冰水何竞朱翠侠杨锡琴
- 狂犬病毒糖蛋白的克隆表达及其在中和抗体检测中的应用被引量：1
- 2015年
- 目的:制备基因工程表达的狂犬病毒糖蛋白优势表位抗原,并评价其在疫苗免疫后中和抗体检测中的应用价值。方法:TRIzol法从狂犬病疫苗中提取总RNA,经RT-PCR获得糖蛋白目的基因片段,构建相应的原核表达质粒,转化大肠杆菌HB101,诱导表达获得纯化重组蛋白,以重组蛋白作为包被抗原,初步建立检测糖蛋白中和抗体的ELISA方法。结果:获得狂犬病毒糖蛋白优势表位区段抗原,建立了糖蛋白中和抗体ELISA检测方法。该检测方法对59例健康献血员血浆样本检测特异性为98.31%(58/59),接种狂犬疫苗免疫个体血浆样本抗体阳性率为98.95%(94/95)。结论:基因工程表达的狂犬病毒糖蛋白优势表位抗原可用于人接种狂犬疫苗后疫苗免疫效果评价。
- 阙海萍郭在清黄运洲郭兰芹朱翠侠王国华宋晓国张贺秋冯晓燕
- 关键词：狂犬病毒糖蛋白
- 生物素化HCV抗原的标记率、提纯纯度及活性检定
- 目的:建立生物素标记HCV抗原及质量检定方法,研制双抗原夹心检测HCV抗体试剂。方法：用长臂生物素标记修饰过的HCV抗原,采用亲和层析柱方法计算标记率,SDS-PAGE检测纯度,酶联免疫测定活性。结果：生物素化HCV抗原...
- 王国华宋晓国陈坤冯晓燕修冰水何竞朱翠侠张贺秋
- 关键词：生物素标记HCV抗原标记率
- 文献传递
- 抗结核分枝杆菌抗原优势肽段单克隆抗体的制备和初步鉴定
- 2012年
- 目的:制备和初步鉴定抗结核分枝杆菌抗原优势肽段的单克隆抗体。方法:以两种优势肽段的融合抗原PGEX-4T-2/38kD-ESAT6-CFP10和PGEX-4T-2/Mtb8.4-MPT64-Mtb16.3-Mtb8作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合后,通过有限稀释法筛选阳性克隆,经ELISA和Western blotting分析单抗的特性和特异性。结果:获得17株结核分枝杆菌抗原优势肽段特异单克隆抗体杂交瘤细胞株,经间接ELISA方法测定,杂交瘤细胞培养上清效价为28～212,接种小鼠的腹水效价为216～220。Western blotting结果显示,每株单抗均能特异性的识别融合蛋白的优势肽段。结论:制备了针对抗结核分枝杆菌抗原优势肽段的单克隆抗体,为结核分枝杆菌的快速诊断和抗原性分析奠定了基础。
- 戴振华王国华冯晓燕张立陈堃宋晓国朱翠侠白冠中张贺秋
- 关键词：结核分枝杆菌单克隆抗体
- 应用蛋白芯片技术筛选戊型肝炎病毒优势表位抗原被引量：3
- 2009年
- 目的筛选戊型肝炎病毒优势表位抗原以便研发新型戊型肝炎诊断试剂。方法通过计算机辅助软件分析,利用改构的高效表达载体表达了HEV 1型与HEV 4型ORF2和ORF3的17种表位抗原,利用蛋白芯片技术平台筛选优势表位抗原。结果在所获得的17种表位抗原中筛选到4种可以作为研发新型戊型肝炎诊断试剂候选抗原的优势表位抗原。结论利用蛋白芯片技术快速准确地筛选到4种可用于研发新型戊型肝炎诊断试剂的候选优势表位抗原。
- 陈坤宋晓国王国华朱翠侠冯晓燕王佑春李卓张贺秋
- 关键词：戊型肝炎病毒蛋白芯片
- 人IA-2基因的部分区段克隆表达及其在1型糖尿病诊断中的应用价值评估被引量：2
- 2010年
- 目的:构建人IA-2基因不同区段原核表达载体,诱导表达获得重组蛋白,并初步验证其在1型糖尿病蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体检测中的价值。方法:用RT-PCR方法调取目的基因,构建相应的原核表达质粒,转化大肠杆菌HB101,诱导表达获得纯化重组蛋白;以重组蛋白为包被抗原,初步建立检测蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体的ELISA方法,评价各片段在1型糖尿病诊断中的价值。结果:获得了2种可被1型糖尿病患者血清识别的重组人蛋白酪氨酸磷酸酶抗原区段IA-2(601～979)和IA-2(683～979),检测敏感性和特异性相当,但IA-2(683～979)检测的阳性D450nm值明显高于IA-2(601～979),成为首选的抗原区段。结论:所选重组人IA-2(683～979)抗原区段具有良好的抗原性,可作为1型糖尿病患者辅助诊断试剂的候选抗原。
- 王国华张贺秋宋晓国陈坤朱翠侠楚晓燕刘喜明戴振华方平冯晓燕
- 关键词：1型糖尿病蛋白酪氨酸磷酸酶酶联免疫吸附测定法
