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蛹虫草无性型深层培养液中纤溶酶的分离纯化和酶学性质研究被引量：6: 2012年; 【目的】确立蛹拟青霉深层培养液中高纯度、高纤溶活性纤溶酶的分离纯化方法并测定其酶学性质。【方法】采用硫酸铵盐析、Sephadex G-25凝胶色谱、Phenyl-Sepharose HP疏水相互作用色谱、CM-Sepharose FF弱阳离子交换色谱和Superdex 75凝胶色谱对蛹拟青霉纤溶酶进行分离。用Lowry法测定蛋白质浓度,纤维蛋白平板法测定其纤溶活性,SDS-PAGE鉴定其纯度并确定其分子量,IEF法测定其等电点。【结果】研究发现,以蔗糖和豆饼为培养基主要基质时,蛹拟青霉深层培养可以产生至少两种纤溶酶。提纯后的纤溶酶Ⅱ比活力达到800.46 U/mg,总纯化倍数为30.07倍。纤溶酶Ⅱ的相对分子量和等电点分别为32 kD和9.3±0.2。纤溶酶Ⅱ是一种糖蛋白,总含糖量为0.98%(W/V)。该酶可以顺次降解人血纤维蛋白(原)的α、β和γ链。其最适作用pH及温度分别为7.4和41°C。Aprotinine与PMSF对该纤溶酶的活性完全抑制,推测此纤溶酶可能是一种丝氨酸蛋白酶。【结论】单一的高纤溶活性纤溶酶的获得和酶学性质的确定,为该酶开发成为新型溶栓药物提供了理论依据。; 张雯舒刘晓兰郑喜群时晰董玉成; 关键词：纤溶酶分离纯化酶学性质

一种蛹虫草纤溶酶及其培制方法: 本发明公开了一种蛹虫草纤溶酶及该纤溶酶的培制方法，该蛹虫草纤溶酶是以蛹虫草C.LSG-1为菌种，经培养发酵、分离和提纯制成；分子量为28000左右，等电点为9.3±0.2；最适作用温度为37℃，最适pH分别为7.2，在p...; 刘晓兰郑喜群艾瑞波时晰李瑶李巍巍

一种真菌纤溶酶及其培制方法: 本发明公开了一种真菌纤溶酶及该纤溶酶的培制方法，以蛹虫草菌株为菌种，经液体发酵培养、分离和提纯制成；该纤溶酶相对分子量为21000左右；该蛹虫草纤溶酶具有很好的溶栓性能，且无明显的急性毒性，具有在临床上开展试验、开发应用...; 刘晓兰郑喜群邓永平李巍时晰李瑶; 文献传递

一种蛹虫草纤溶酶及其培制方法: 本发明公开了一种蛹虫草纤溶酶及该纤溶酶的培制方法，该蛹虫草纤溶酶是以蛹虫草C.LSG-1为菌种，经培养发酵、分离和提纯制成；分子量为28000左右，等电点为9.3±0.2；最适作用温度为37℃，最适作用pH值为7.2，在...; 刘晓兰郑喜群艾瑞波时晰李瑶李巍巍; 文献传递

鸡腿菇产溶栓酶液体发酵条件优化被引量：2: 2009年; 采用鸡腿菇为实验菌株,对其生产溶栓酶的液体发酵条件进行了初步优化,确定的菌株产酶培养基组分及最适培养条件为:碳源为蔗糖,氮源为豆饼粉,蔗糖/豆饼比值为2:5,发酵培养基的初始pH值为自然(6～7),装液量为250mL三角瓶装40mL,接菌量为直径1cm的菌片1片,发酵温度21℃～25℃,CuSO_4添加量为0.001%。液态发酵所得溶栓酶活力可稳定达到溶圈面积180mm^2以上,相当于尿激酶活力150IU/mL,较优化前提高5倍。; 李巍巍刘晓兰时晰关玲; 关键词：鸡腿菇液体发酵

一种真菌纤溶酶及其培制方法: 本发明公开了一种真菌纤溶酶及该纤溶酶的培制方法，以蛹虫草菌株为菌种，经液体发酵培养、分离和提纯制成；该纤溶酶相对分子量为21000左右；该蛹虫草纤溶酶具有很好的溶栓性能，且无明显的急性毒性，具有在临床上开展试验、开发应用...; 刘晓兰郑喜群邓永平李巍时晰李瑶; 文献传递

蛹虫草深层培养产纤溶酶条件的优化被引量：5: 2010年; 蛹虫草是名贵中药材之一，本课题组发现其液体发酵物中含有较强的纤溶活性物质，具有开发成溶栓药物∞潜力。以本实验室已优化的蛹虫草深层培养产纤溶酶的培养条件为基础，对蛹虫草深层培养产纤溶酶的条件进一步优化，并对其深层培养产纤溶酶过程从摇瓶条件到10L发酵罐进行比拟放大。实验结果表明：蛹虫草深层培养产纤溶酶的最适培养条件为蔗糖2％、豆饼5％，250mL三角瓶装液量为50mL，23℃培养5d，培养基初始pH为自然（6．0左右），接菌量为直径1cm菌片一片（每50mL）或深层培养3～5d的液体菌种0．5％（v／v）；10L发酵罐在搅拌转速和通风量为100r／min，600L／h的条件下纤溶酶活力达286．21U／mL（尿激酶单位），较摇瓶条件下的酶活力提高了3．2倍，纤溶酶对菌丝生物量的得率较摇瓶条件下提高了5．5倍。; 陈慧鑫刘晓兰李巍巍时晰郑喜群; 关键词：蛹虫草纤溶酶发酵罐

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时晰