徐浩翔
- 作品数：49 被引量：157H指数：8
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金协和青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生水利工程化学工程更多>>
- 采用蛋白芯片结合SELDI—TOF—MS技术筛选紫外线照射后皮肤成纤维细胞损伤的特异性蛋白
- 2015年
- 目的探讨应用蛋白芯片结合表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）技术筛选紫外线照射后皮肤成纤维细胞早期损伤的生物标记的可行性。方法用弱阳离子交换蛋白芯片（CM10）结合SELDI-TOF-MS技术，检测未照射组、2．5J／cm^2。长波紫外线（UVA）照射组和100mJ／cm^2中波紫外线（UVB）照射组正常人真皮成纤维细胞差异表达的蛋白。结果紫外线照射组与未照射组蛋白质指纹图谱比较，发现10种蛋白表达下降，8种蛋白表达增强。将差异蛋白峰在SWISS—PROT和TREMBLE蛋白数据库中搜索，发现相对分子质量为11320．1的蛋白峰与人半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-7前驱体（caspase-7precursor）相匹配；相对分子质量为8574．3的蛋白峰与细胞色素C氧化酶多肽Vie前体（Cytochrome c oxidase polypeptide VIc precursor）相符。结论蛋白芯片结合SELDI—TOF-MS技术是一种快速、简便的高通量蛋白质组研究方法，为光损伤研究提供了新的研究平台。
- 闫言徐浩翔郑艳华刘洁张建中王宝玺
- 关键词：皮肤表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱
- 反常性痤疮一家系调查及致病基因突变分析被引量：2
- 2016年
- 目的：研究一个反常性痤疮家系患者γ分泌酶基因突变情况。方法收集1个反常性痤疮患者家系资料，该家系共4代30人，患者12例，其中在世患者9例。提取先证者及其有关亲属8例（患者5例、非患者3例）外周血DNA，采用PCR扩增NCSTN、PSEN1、PSENEN、Aph1基因编码区的全部外显子及其侧翼序列，测序并分析。选取100例健康人作为对照。结果基因检测发现，5例患者外周血DNA中的PSENEN基因发生c.229_230insCACC插入突变，导致氨基酸翻译过程中移码，不能形成功能正常的PSENEN蛋白，家系中3例正常亲属及100例健康对照均无该突变。结论反常性痤疮家系存在1个新的插入突变，即PSENEN c.229_230insCACC突变，可能是引起该家系反常性痤疮患病的分子机制。
- 张晓峰苏惠春覃云飞李诚让肖学敏徐浩翔王宝玺
- 关键词：突变Γ分泌酶
- 采用蛋白芯片结合表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱筛选紫外线引起皮肤成纤维细胞损伤的特异性蛋白
- 目的 应用蛋白芯片结合表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术筛选紫外线(UV)引起皮肤成纤维细胞损伤的特异性蛋白.方法 用CM10(弱阳离子交换表面)蛋白芯片结合SELDI-TOF-MS 技术...
- 闫言徐浩翔郑艳华刘洁张建中王宝玺
- 关键词：紫外线皮肤表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱
- 一个遗传性对称性色素异常症家系ADAR1基因的突变分析被引量：3
- 2018年
- 目的检测一个中国汉族遗传性对称性色素异常症（dyschromatosis symmetrical hereditaria，DSH）家系患者ADAR1基因突变。方法收集家系成员的临床资料和血样，PCR扩增ADAR1基因所有编码区并进行测序，分别检测家系中2例患者和2名正常人的突变情况，并选取50名与本家系无关的正常人作为对照；同时检索文献中已报道的有关该病ADAR1基因的突变情况。结果该家系中2例患者均存在ADAR1基因错义突变（C．3463C〉T），导致P．R1155W改变，家另外2名未患病的家系成员和50名健康对照均未发现上述突变。检索文献发现，该位点突变导致该病的已有5个家系报道，这是目前发现突变位点最高的基因。结论ADAR1基因C．3463C〉T错义突变是导致该家系发生DSH的致病性突变，也是目前已知的该基因的热点突变位点。
- 曾荣王丽玮王丽玮何艳艳何艳艳崔盘根徐浩翔
- 关键词：遗传性对称性色素异常症突变
- 溃疡型坏疽性脓皮病1例被引量：1
- 2015年
- 临床资料患者，女，53岁。因面部、四肢红斑、结节、溃疡伴疼痛1年半，加重2个月入院。1年半前患者左小腿出现米粒大丘疹，逐渐增至蚕豆大，后又出现3枚红斑，质硬，在当地治疗（具体不详）皮疹消退，3个月后再次于双下肢出现大小不等的红斑，逐渐增多，中央破溃，伴疼痛，后累及双上肢，在多家医院就诊，曾诊断“结节性脂膜炎”、“结节性红斑”等，对症治疗后无好转，部分溃疡自行愈合，留下瘢痕。2个月前患者症状加重，伴发热，体温波动于38.3℃~39.0℃，来我院就诊，门诊以“溃疡待查”收入院。有糖尿病病史1年余。家族史无特殊。体格检查：一般情况可，浅表淋巴结未触及肿大。皮肤科情况：前额、左眶周、左面部数个直径3~10 cm暗红色浸润性斑块，中央为黑褐色厚痂（图1）；四肢散在红斑、结节，质硬，触痛明显，右前臂、双下肢可见数枚浸润性斑块，表面有黑褐色厚痂（图2）；右小腿屈侧可见数个暗红色浸润性斑块，其上有多个脓点，呈筛孔状，局部见黑褐色痂，伴脓性及血性分泌物，触痛明显。实验室检查：血常规WBC 8.28＆#215;109/L，RBC 4.17＆#215;1012/L， HGB 120.0 g/L，PLT 96＆#215;109/L；尿常规尿糖（3＋）；生化血糖14.38 mmol/L，糖化血红蛋白11.5％，胰高血糖素70.19 pg/mL；抗核抗体、补体、免疫球蛋白、抗髓过氧化物酶抗体、抗中性粒细胞蛋白酶抗体、铁蛋白、免疫蛋白电泳、梅毒血清学检查、乙肝5项、丙肝抗体均阴性；组织真菌培养阴性，分泌物细菌培养＋药敏：表皮葡萄球菌，氧氟沙星、阿莫西林、青霉素、万古霉素敏感。心电图：下侧壁心肌供血不足；B 超：脂肪肝、胆结石、子宫肌瘤。皮损组织病理示：表皮缺失，真皮及皮下脂肪小叶内可见广泛的炎症细胞浸润，以淋巴样细胞及组织样细胞为主，细
- 曹燕陈浩张韡陈敏徐浩翔
- 关键词：坏疽性脓皮病溃疡型结节性脂膜炎抗髓过氧化物酶抗体抗中性粒细胞梅毒血清学检查
- 波形蛋白与疾病关系的研究进展被引量：9
- 2009年
- 波形蛋白是中间纤维家族中的一种重要成员,主要存在于中胚层来源的细胞中。新近研究发现,波形蛋白的表达和分布位置的改变,可以影响细胞完整性、细胞信号转导、细胞生长、迁移、凋亡和基因表达等多种功能,从而引发一些疾病,本文综述了波形蛋白与疾病发生和诊断方面的研究进展。
- 徐浩翔王宝玺
- 关键词：波形蛋白疾病
- 胆碱能受体激动剂逆转天疱疮棘层松解的机制研究被引量：6
- 2015年
- 目的 研究胆碱能受体激动剂对天疱疮棘层松解的逆转作用及其机制.方法 将HaCaT细胞与寻常型天疱疮IgG（PV-IgG）共培养建成天疱疮细胞模型后,再加入胆碱能受体激动剂卡巴胆碱共培养,以PV-IgG诱导的天疱疮细胞模型作为对照,通过细胞解离实验定量分析卡巴胆碱对棘层松解的逆转情况,用免疫荧光方法定性观察桥粒蛋白变化;分别用RIPA和Triton X-100裂解细胞,得到总蛋白和胞质蛋白,用蛋白免疫印迹灰度值定性分析HaCaT细胞表面与黏附相关的桥粒芯蛋白3（Dsg3）、桥斑珠蛋白（PG）的变化,不同时间点p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）、表皮生长因子受体（EGFR）的磷酸化水平;用定量聚合酶链反应（qPCR）检测上述细胞表面蛋白在mRNA水平的变化;通过免疫共沉淀方法定性分析Dsg3与PG相互作用的变化情况.结果 PV-IgG组细胞碎片数为46.67±2.03,卡巴胆碱组为18.67±2.52,两组比较,t=11.22,P＜ 0.01;免疫荧光实验发现,卡巴胆碱可以逆转PV-IgG所致的桥粒分子内化.在天疱疮细胞模型中,细胞总的Dsg3和PG含量下降,非桥粒部分的Dsg3下降,非桥粒PG含量增加,且Dsg3与PG的相互作用减弱,加入卡巴胆碱后可逆转上述变化.卡巴胆碱也可使Dsg3 mRNA的相对表达量（2-△△Ct）由1.428±0.215增加至4.974±0.948（t=3.65,P=0.01）,PG mRNA的相对表达量由1.563±0.247增加至13.420±1.715（t=6.85,P＜0.01）.磷酸化实验中,卡巴胆碱可以抑制EGFR磷酸化,而对p38 MAPK磷酸化无明显影响.结论 胆碱能受体激动剂卡巴胆碱具有逆转棘层松解的作用,这种逆转作用的机制可能包括：抑制Dsg3和PG内化并增加其表达,增强Dsg3与PG的相互作用,抑制棘层松解关键信号EGFR的磷酸化.
- 李志量张洁尘徐浩翔杨永红冯素英王宝玺
- 关键词：天疱疮胆碱能激动剂HACAT细胞
- 人参皂苷Rg1保护UVB所致皮肤成纤维细胞急性损伤被引量：5
- 2015年
- 目的:确定人参皂苷Rg1对UVB损伤成纤维细胞的保护作用。方法:体外培养人皮肤成纤维细胞,分为正常对照组、UVB照射组、UVB照射+人参皂苷Rg1组(5,10和20μg/mL),MTT法检测细胞增殖活性,ELISA法检测细胞中SOD活性、MDA和细胞上清液中MMP-1和MMP-3的含量,Western blot法检查细胞中MMP-1和MMP-3的表达。结果:UVB联合不同浓度人参皂苷Rg1组较UVB照射组,细胞SOD活性升高,MDA、MMP-1和-3含量均有不同程度下降,人参皂苷Rg1浓度越高作用越明显。结论:人参皂苷Rg1对UVB造成的皮肤成纤维细胞损伤具有保护作用。
- 刘勇徐浩翔惠云张晓峰肖学敏王宝玺
- 关键词：人参皂苷RG1皮肤成纤维细胞UVB
- BP180NC16a-ELISA检测大疱性类天疱疮多中心随机双盲对照试验被引量：4
- 2011年
- 目的 探讨BP180抗体诊断试剂盒检测大疱性类天疱疮（BP）的灵敏度和特异度.方法 多中心随机双盲平行对照临床试验.使用BP180抗体诊断试剂盒（ELISA）检测106例临床已经确诊的活动期BP患者和106例对照人群（含非BP的其他大疱性疾病以及硬皮病、银屑病、SLE、妊娠晚期孕妇、健康献血员等）血清样本,并与间接免疫荧光（IIF）试验进行灵敏度和特异度的对比.结果 106份BP患者血清样本中81份BP180抗体诊断试剂盒为阳性,其灵敏度为76.4%;83份抗表皮抗原抗体检测试剂盒（IIF法）为阳性,其灵敏度为78.3%.106份对照组血清标本中95份BP180抗体诊断试剂盒为阴性,其特异度为89.6%;102份抗表皮抗原抗体检测试剂盒为阴性,其特异度为96.2%.BP180抗体诊断试剂盒（ELISA）与对照试剂盒的灵敏度和特异度相比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 BP180抗体诊断试剂盒可作为诊断BP的一种辅助手段.
- 李妍陈喜雪赵俊郁汪科钟珊晋红中闫言陈金波徐浩翔曾跃平吴圣贤朱学骏
- 关键词：免疫学试验BP180
- 反常性痤疮一家系nicastrin基因突变研究被引量：1
- 2016年
- 目的 研究一家系2例汉族反常性痤疮患者γ分泌酶基因的突变。 方法 提取家系中5名成员（2例患者、先证者父亲、2例目前未发病者）的外周血DNA，扩增nicastrin蛋白（NCSTN）、早老素（PSEN） 1、早老素增强子（PSENEN）、前咽缺陷蛋白（APH1）基因所有外显子和侧翼序列进行测序，并以100例无关系健康人作为对照。同时比较先证者皮损与4个健康对照NCSTN基因mRNA表达差异。 结果 检测到2例患者血样DNA存在NCSTN基因中第477位碱基发生C→A的杂合突变，即c.477C〉A，其余3名家系成员及健康对照未发现相应突变；查询美国国家生物技术信息中心网站单核苷酸多态性数据库也未发现此突变。另外，先证者皮损NCSTN mRNA水平较健康对照明显减少。 结论 NCSTN基因新的无义突变c.477C〉A是该反常性痤疮家系的致病突变，并可能通过无义介导的mRNA降解途径导致该基因功能失活。
- 肖学敏徐浩翔惠云张晓峰何艳艳李诚让王宝玺
- 关键词：基因突变系谱
