徐幼平 作品数:37 被引量:277 H指数:11 供职机构: 浙江大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 浙江省自然科学基金 霍英东青年教师基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
草酸对植物体内Ca^(2+)浓度及信号传导途径的影响 被引量:3 2014年 从影响植物体内Ca2+浓度及其信号通路的角度分析了草酸的致病作用分子机制.采用Fluo-4染色和荧光检测方法,在激光共聚焦显微镜下观察分析了草酸对拟南芥植株体内Ca2+浓度的影响.结果表明:1mmol/L草酸处理后拟南芥体内Ca2+浓度变化不大;但10mmol/L草酸处理迅速、强烈地降低了拟南芥体内Ca2+浓度,处理10min后几乎完全检测不到Ca2+荧光信号.同时,利用实时定量反转录聚合酶链反应技术分析了草酸对3个与Ca2+浓度稳定和信号传导相关的CRT基因以及3个Ca2+信号途径重要基因CDPK1、CDPK2和CAMTA3的表达动态的影响.结果显示:除了处理6h后CRT3的基因表达外,0.1和1mmol/L草酸处理对上述基因表达的影响总体趋势一致,但1mmol/L草酸处理的影响程度更显著;草酸处理对不同基因的表达影响也有显著区别:1mmol/L草酸处理后CRT基因家族与CDPK1基因表达持续上调,CDPK1基因表达上调倍数显著大于CRT基因;CAMTA3基因表达持续下调,到处理后24h,表达几乎被完全抑制;而CDPK2基因表达则在处理后6h显著上调,到处理后24h略微下降.这些结果说明草酸可通过改变Ca2+浓度及Ca2+信号通路对植物与核盘菌互作起重要的调控作用. 李阳 赵媛 徐幼平 王继鹏 蔡新忠关键词:菌核病 核盘菌 草酸 CA^2+浓度 水旱作物轮作田块土壤中微生物群落结构的PLFA法比较分析 被引量:14 2013年 轮作是一项经济和有效的控制土传病害的措施。为进一步明确轮作作用机理,采用磷脂脂肪酸(phospholipid fatty acid,PLFA)谱图分析技术,分析了不同种植模式田块土壤微生物的PLFA构成特征。结果显示,水稻-棉花和水稻-玉米轮作田块中的微生物PLFA总量均高于水稻-水稻连作田块,水稻-水稻连作田块的微生物PLFA总量比连作前水稻田下降。土壤微生物群落结构比较分析结果显示,这些田块土壤中细菌占主导,真菌和放线菌含量次之,原生动物最少。但是,轮作田中每一类微生物含量均高于连作田块,细菌尤为显著。这些结果表明,不同种植模式田块土壤的微生物群落数量和种类均存在着明显差异,水稻-旱作轮作导致土壤微生物群落数量增加,种类发生改变。 徐幼平 蔡新忠 祝小祥关键词:作物轮作 土壤微生物 微生物群落结构 一种油菜短肽BnPEP6的免疫激发功能应用 本发明提供一种油菜短肽BnPEP6的免疫激发功能应用,具体涉及一种油菜(Brassica napus)短肽BnPEP6在菌核病防控中的应用。本发明首次通过人工合成短肽BnPEP6,阐明其对菌核病抗性的激发作用,并提供其通... 蔡新忠 陈松余 叶云峰 徐幼平侵染广西烟草的中国番茄黄化曲叶病毒及其伴随的卫星DNA分子的基因组特征 被引量:22 2006年 从中国广西靖西的烟草病株上分离到病毒分离物G102和G103,用双生病毒特异性引物均扩增出约500bp的片段,两者序列同源性达99%。对G102基因组DNA-A全序列测定表明,其全长为2728个核苷酸,与中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCCNV)同源性最高,达96.5%。进一步研究发现,G102和G103都伴随有长为1342个核苷酸的卫星DNA分子(DNAβ),这两个DNAβ分子的全序列与TYLCCNV的DNAβ同源性最高,分别为92.9%和93.4%。这是首次明确广西分离的TYLCCNV也伴随有卫星分子。 徐幼平 周雪平关键词:中国番茄黄化曲叶病毒 BEGOMOVIRUS DNA-A DNAΒ 番茄子叶总蛋白双向电泳体系的建立 被引量:32 2010年 通过对IPG胶条梯度、上样方式、上样量、聚焦条件等4方面条件的优化,建立了番茄子叶总蛋白双向电泳体系,即采用TCA丙酮沉淀法提取番茄子叶总蛋白,选用24cmpH3-7NL的IPG胶条,采用水化上样,上样量300μg,按聚焦程序Ⅰ或Ⅱ聚焦后进行双向电泳分离和银染染色。若采用制备胶,以获取高含量蛋白点,则将上样量提高至1.5mg,按聚焦程序Ⅲ进行聚焦后进行双向分离,并采用胶体考马斯亮蓝染色。采用该优化的体系可以获得分辨率高、重复性好的双向电泳图谱。 黎飞 徐秋芳 臧宪朋 赖亿玉 程维舜 徐幼平 蔡新忠关键词:番茄 双向电泳 子叶 一个编码推定的钙依赖磷酸酶催化亚基的番茄全长cDNA序列的克隆及其表达分析 被引量:1 2008年 钙依赖磷酸酶(Calcineurin)作为Ca2+信号传感器中继因子对受Ca2+调节的生物学过程起重要调控作用。本研究克隆了一个番茄全长cDNA序列,该序列与钙依赖磷酸酶催化亚基(Calcineurin A,CNA)序列同源。推定的蛋白产物由315个氨基酸组成,明显短于非植物来源的该类蛋白。该蛋白含有钙依赖磷酸酶类金属磷酸酶中保守的催化作用活性位点基序,以及两个潜在的钙调蛋白结合位点,故暂时命名为LeCAL1(Lycopersicon esculentum calcineurin A like 1)。对CNA序列的分析结果表明,植物与非植物CNA差异明显,在系统进化树中形成距离很远的两大分支。植物CNA中,LeCAL1与拟南芥CNA同源性较高,而与水稻CNA较低。对LeCAL1在番茄中的表达分析结果显示,Cf/Avr介导的过敏性反应的产生诱导LeCAL1基因的表达,表明钙依赖磷酸酶可能在番茄抗叶霉病中起调节作用。 张志新 徐幼平 曹文渊 蔡新忠关键词:番茄 CLADOSPORIUM 水稻基因OsUEP3及抗病调控功能的应用 本发明提供一个水稻抗病调控基因,该基因的开放阅读框长390bp,编码一种泛素延伸蛋白,由129个氨基酸组成。该蛋白N端为76个氨基酸的泛素分子,C端则是53个氨基酸的60S核糖体蛋白L40e。本发明通过构建该基因的超表达... 蔡新忠 徐幼平 郭伟毅文献传递 一种基于菌丝悬浮液的核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)接种方法的建立 被引量:15 2010年 通过分析核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum)菌丝培养时间、菌丝体浓度以及接种后的保湿时间等因子对接种后油菜植株发病的影响,建立了一套有效的基于菌丝悬浮液的核盘菌喷雾接种方法体系.主要步骤包括:从在平板活化3 d后核盘菌菌落边缘打取菌碟(Φ6 mm),按10块?100 mL-1加入液体培养基中,25℃、200 r?min-1下振荡培养4 d,用匀浆机匀浆30 s制成菌丝悬浮液,终浓度调至600 nm波长下吸光度值为1.0~2.0,用空压机喷雾接种油菜植株,保湿48 h.该方法适用于油菜苗期对菌核病的抗病性评价,还可用于立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)的接种研究. 臧宪朋 徐幼平 蔡新忠关键词:核盘菌 接种方法 立枯丝核菌 抗病性评价 水稻基因OsASR2及抗病调控功能的应用 本发明提供一个水稻抗病调控基因,命名为OsASR2。该基因的开放阅读框长549bp,编码一种ASR蛋白,由182个氨基酸组成。该基因编码蛋白包含ABA/WDS结构域。本发明通过构建OsASR2基因表达受到抑制的RNAi水... 蔡新忠 徐幼平 郭伟毅 程维舜Ca^(2+)信号通路对本氏烟叶位介导的核盘菌抗性的影响 被引量:4 2014年 组合采用药理学、分子生物学和反向遗传学等技术,分析叶位对本氏烟抗核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的影响及其机制.结果表明,叶位显著影响本氏烟对核盘菌的抗性,随着叶位自上而下,该抗性逐渐增强.药理学分析结果显示,Ca2+通道抑制剂LaCl3和NaVO3处理消除了本氏烟叶片对核盘菌抗性的叶位间差异.定量反转录聚合酶链反应检测结果显示,3个Ca2+信号通路基因NbCNGC20、NbCAMTA3和NbCML1在本氏烟不同叶位叶片中的表达存在显著差异,随着叶位自上而下逐渐增加.病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)分析结果表明,钙调素类似蛋白基因NbCML1的沉默导致叶位介导的本氏烟对核盘菌抗病性的丧失.这些结果说明叶位对本氏烟抗核盘菌具有显著影响,揭示了包括NbCML1基因在内的Ca2+信号通路对叶位介导的核盘菌抗性的重要调控作用. 吕琳慧 徐幼平 任至玄 康冬 王继鹏 蔡新忠关键词:核盘菌 叶位 信号通路 抗病性