张启波
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
- 供职机构：昆明医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省卫生科技计划项目云南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Kringle5基因的表达、纯化及其抗膀胱肿瘤作用的初步研究
- 2010年
- 目的获得高纯度并且有活性的K5蛋白.方法继构建了重组质粒pGEX-5X-1-K5的基础上,转化感受态细胞BL-21、DH-5α、Top10,并优化了表达条件,经过裂解、洗涤、溶解包涵体后,用带GST标签的谷胱甘肽琼脂糖4B亲和柱进行纯化,Bradford法测蛋白浓度,分别用ECV304细胞和裸鼠皮下移植瘤模型对蛋白进行了活性测定.结果获得了表达量最高的条件:BL21感受态细胞,诱导时间:6 h,纯化后的K5蛋白纯度达到95%以上,K5浓度为5μg/mL时抑制率最高.裸鼠模型上,K5组肿瘤的生长速度明显慢于PBS对照.结论含有GST的融合蛋白表达载体,表达量多、易于纯化、成本低、蛋白纯度高,并能有效的抑制ECV304细胞,抑制裸鼠皮下移植瘤的生长,为K5的工业化大规模生产奠定了基础.
- 胡明宇王剑松柯昌兴韦海荣赵献张启波
- 关键词：KRINGLE5蛋白纯化膀胱肿瘤
- 改良型TAT-VP3融合蛋白对膀胱癌的抑制效应研究
- 2012年
- 目的探讨改良型TAT-VP3融合蛋白对膀胱癌细胞的抑制效应,为其临床应用于肿瘤的生物大分子药物治疗提供实验基础。方法运用免疫细胞化学染色法确定改良型TAT-VP3融合蛋白进入到膀胱癌细胞EJ的细胞核内,CCK-8检测EJ细胞的生长抑制率,通过透射电镜观察凋亡细胞的超微结构变化,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率。结果改良型TAT-VP3融合蛋白进入膀胱癌EJ细胞核内;经该融合蛋白作用后,EJ细胞凋亡率呈时间和剂量依赖关系,细胞周期随着药物作用浓度和时间的增加而改变,EJ细胞的生长抑制率随其浓度的增加和作用时间的延长而呈明显上升趋势。结论改良型TAT-VP3融合蛋白对膀胱癌EJ细胞的增殖具有一定的抑制作用,并对该细胞具有凋亡诱导作用。
- 李俊张之甲韩冰冰詹辉王剑松张启波马真
- 关键词：细胞凋亡VP3蛋白膀胱癌
- 改良型TAT—VP3融合基因原核表达载体的构建及表达被引量：1
- 2010年
- 目的 构建改良型TAT-VP3融合基因原核表达载体,并表达目的 蛋白.方法 采用PCR法设计和扩增改良型TAT-VP3融合基因,克隆至表达载体pThioHisA中,构建非融合表达载体,转化大肠杆菌BL21（DE3）plyS,经IPTG诱导表达,15%SDS-PAGE鉴定.结果 成功构建了改良型TAT-VP3融合基因的原核表达载体,经酶切、测序鉴定,证明构建正确.经SDS-PAGE鉴定可见相对分子质量16400的特异性目的 条带,37℃诱导8h的蛋白表达量最高,且多数以包涵体形式存在.结论 已成功构建改良型TAT-VP3融合基因原核表达载体,并表达目的 蛋白,为进一步的蛋白制备和应用研究奠定了基础.
- 张启波赵庆华詹辉颜汝平杨峻峰李俊王剑松
- 蛋白类抗肿瘤药物及其应用研究进展
- 2010年
- 蛋白类抗肿瘤药物高效低毒,且能有效避免放疗化疗的副作用,一直以来都是肿瘤治疗的研究目标,其中靶向性蛋白药物的研究更是近年来抗肿瘤研究的热点.目前,通过基因工程技术构建融合蛋白,靶向治疗肿瘤,已成为蛋白类药物抗肿瘤研究的主要方向.
- 张启波詹辉王剑松
- 关键词：抗肿瘤药蛋白质类
- 内皮抑素/人纤溶酶原融合基因与肿瘤治疗
- 2009年
- Endok5作为Endostatin和Kringle5的融合基因,能联合应用两种基因不同的作用机制,从不同途径阻断血管生成.两种基因的协同作用比单纯治疗手段明显抑制了肿瘤细胞的生长,有效降低了肿瘤细胞的细胞毒性.就其分子生物学特征及其在肿瘤治疗中的研究现状作一综述.
- 胡明宇张启波柯昌兴王剑松
- 关键词：融合基因肿瘤治疗基因治疗
- 改良型TAT-VP3融合蛋白的表达、纯化及鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的表达改良型TAT-VP3融合蛋白,并对其进行纯化.方法利用IPTG温控诱导改良型TAT-VP3融合蛋白表达,并经GST亲和层析纯化,目的蛋白进行SDS-PAGE和Western bolt鉴定.结果改良型TAT-VP3融合蛋白经温控诱导后得到稳定表达,经SDS-PAGE鉴定可见相对分子质量42 kD的特异性目的条带,经GST亲和层析纯化后,得到了纯度较高的目的蛋白.Western bolt验证了表达蛋白的特异性.结论已成功表达及纯化出改良型TAT-VP3融合蛋白,为进一步研究其免疫原性和抗肿瘤活性奠定了基础.
- 张启波王剑松詹辉颜汝平杨峻峰李俊
- 关键词：纯化
