张仁和
- 作品数：11 被引量：15H指数：2
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- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 奶牛真胃右方变位超声声像图特征的研究
- 2016年
- 比较分析了临床健康的荷斯坦奶牛和真胃右方变位奶牛（未发生真胃扭转）的真胃B超声图像的特征,旨在探讨采用B超体外探测诊断奶牛真胃右方变位的可行性。采用3.5MHz的扇形探头和线阵探头,对长春市某奶牛场5头典型真胃右方变位荷斯坦奶牛和10头身体状况良好的荷斯坦奶牛分别对其右侧第12~8肋间及其肋弓后缘和其腹底进行超声探查,采集并分析获得的B超声像图。正常情况下,真胃壁表现为1条弱回声细线,分层不明显,真胃内容物整体表现为混合型回声,偶尔可观察到呈弱回声的波浪状褶皱结构的真胃皱襞。右方变位后,由于真胃体积增大,真胃沿腹壁向后、向背侧延伸,可到达肋弓和背中线位置,内容物表现为气体和液体的混合状态,超声检查时更容易探及真胃皱襞。对所有病牛都采取剖腹探查进行了确证。结果表明,在B超声像图中,真胃右方变位前、后声像图特征明显,容易与前胃及其他邻近组织、器官区分开,B超可用于真胃右方变位奶牛及健康奶牛的鉴别诊断。
- 田宇张仁和杨威李心慰张昆坡张敏王哲刘国文李小兵
- 关键词：真胃右方变位声像图
- 反刍动物真胃左方变位B超影像分析
- 真胃左方变位（left displacement of abomasum,LDA）是奶牛常见疾病，不仅引起奶牛产奶量急剧下降，如治疗不及时还可造成奶牛淘汰，甚至死亡，是影响奶牛养殖业发展的重要疾病。因此，该病的早期诊断和...
- 张仁和
- 关键词：真胃左方变位B超探查声像图奶牛小尾寒羊
- 文献传递
- 低pH环境对体外原代培养犊牛瘤胃上皮细胞炎性通路的影响被引量：1
- 2015年
- 本试验旨在研究低p H环境对瘤胃上皮细胞(REC)炎性因子表达的影响。建立犊牛原代REC体外培养模型,在不同p H(5.5和7.2)的培养环境下,采用VFA和NF-κB p65抑制剂PDTC处理。运用Western blot和RT-PCR技术,检测NF-κB p65和IκB蛋白的表达与细胞炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α和NF-κB p65 m RNA表达。结果显示,在低p H环境(p H 5.5)处理组,NF-κB p65和IκB蛋白的表达显著升高;IL-1β、IL-6、TNF-α和NF-κB p65的m RNA表达水平均显著或极显著高于对照组(P<0.05/P<0.01)。组内差异不显著(P>0.05)。
- 郭立辉王婷婷赵晨旭王亚洲黄伟坤邓清华张玉明殷立恒张仁和李心慰李小兵刘国文王哲
- 关键词：低PH
- SREBP-1c基因重组腺病毒的构建及其在犊牛原代肝细胞中的表达
- 2013年
- 将携带有化学合成的SREBP-1c基因的质粒先用XbaⅠ酶切,Klenow补平突出末端,纯化回收后再用HindⅢ酶切,切胶回收目的基因片段;并将其克隆至用EcoRⅤ/HindⅢ酶切回收的pShuttle-EGFP-CMV(-)TEMP穿梭载体上。经酶切鉴定后,重组穿梭质粒和腺病毒pAdxsi质粒分别用I-CeuⅠ+I-SceⅠ双酶切处理,T4DNA连接酶连接,获得重组质粒pAdxsi-GFP-SREBP1c,酶切鉴定后经Pac I酶切线性化转染HEK293细胞,经包装扩增后用TCID50测定病毒滴度。以重组腺病毒感染犊牛原代肝细胞,采用qRT-PCR和Western blot检测细胞中SREBP-1cmRNA和蛋白的表达量。结果显示,重组腺病毒酶切鉴定正确,滴度可达1.2×1010,腺病毒感染犊牛原代肝细胞中SREBP-1cmRNA和蛋白的表达显著升高。结果表明,本试验成功构建了SREBP-1c基因过表达重组腺病毒,且SREBP-1c在犊牛原代肝细胞中高度表达。
- 杨文涛丁红研付世新邓清华宋玉祥史晓霞张璐莹张仁和郭立辉刘芳宁刘兆喜李心慰陈灰张良赵晨旭李小兵王哲
- 关键词：SREBP-1C重组腺病毒
- 非酯化脂肪酸对体外培养犊牛原代肝细胞中炎性因子表达及其活性的影响被引量：7
- 2014年
- 在建立犊牛原代肝细胞体外培养模型的基础上,通过培养液中添加不同浓度的非酯化脂肪酸(Nonesterified fatty acids,NEFAs),运用实时荧光定量PCR和ELISA方法,测定NEFAs对肝细胞中炎性因子TNFα、IL-6和IL-1β的mRNA表达及其活性的影响。结果显示,NEFAs作用肝细胞9h后,与对照组相比,高浓度NEFAs(1.8mmol/L)组肝细胞中TNFα、IL-1β的mRNA表达水平显著增加(P<0.05),IL-6的mRNA表达水平在2.4mmol/L时极显著增加(P<0.01),低浓度NEFAs(0.6、1.2mmol/L)组肝细胞中TNFα、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平无显著差异(P>0.05);并且TNFα、IL-1β的活性在NEFAs浓度达到1.8、2.4mmol/L显著高于对照组(P<0.01),且呈剂量依赖性作用,IL-6的活性在在NEFAs浓度达到1.8mmol/L显著高于对照组(P<0.01),在2.4mmol/L也高于对照组,但差异不显著。结果表明,高浓度NEFAs在一定程度上能引起或加剧奶牛肝细胞炎性反应,可能是导致产后奶牛肝功能炎性损伤主要因素。
- 史晓霞王建国李玉宋玉祥丁红研韩盈盈张玉明殷立恒王婷婷张仁和郭立辉邓清华李心慰李小兵刘国文王哲
- 关键词：肝细胞炎性因子
- 组胺对体外培养犊牛原代瘤胃上皮细胞炎性因子的影响被引量：3
- 2016年
- 体外培养奶牛瘤胃上皮细胞，在不同pH的培养液（5．5和7．2）中添加不同浓度的组胺（0、0．5、2．5、12．5和62．5μmol／L）。运用实时荧光定量PCR和ELISA方法，检测组胺对瘤胃上皮细胞炎性因子白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）mRNA表达及其含量的影响。结果显示，PH5．5的培养液组，与对照组相比，TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平均显著或极显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01）；TNF-α、IL-6和IL-1β的含量在2．5、12．5和62．5μmol／L组胺处理组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01）。pH7．2的培养液组，TNF—α和IL-6mRNA表达水平在2．5和12．5μmol／L组胺处理组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01），IL-1βmRNA表达水平在2．5、12．5和到62．5μmol／L组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01）；而TNF-α含量在62．5μmol／L组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01），IL-6在2．5、12．5和62．5μmol／L组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01），IL-1β在12．5和62．5μmol／L组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01）。在组胺各浓度组，TNF-α、IL-6和IL-1β1TIRNA表达水平在pH5．5条件下均显著高于pH7．2，但含量差异不显著。结果表明，低pH条件下，高浓度组胺增加奶牛瘤胃上皮细胞炎性反应，促进奶牛亚急性瘤胃酸中毒的发展。
- 王婷婷郭立辉赵晨旭王亚洲邓清华张玉明殷立恒张仁和李心慰李小兵刘国文王哲
- 关键词：组胺炎性因子
- 奶牛ApoB100基因的克隆、表达及多克隆抗体的制备
- 2013年
- 为了进一步研究ApoB100在肝脏脂肪代谢中的功能,试验采用构建pET-28a-ApoB100表达质粒的方法对其进行研究。结果表明:用IPTG成功诱导表达出ApoB100蛋白,并且获得了高效价多克隆抗体。说明表达质粒pET-28a-ApoB100构建成功。
- 王力张加力杨文涛丁红研张仁和王哲李小兵赵权
- 关键词：APOB100基因克隆多克隆抗体
- p38介导β-羟丁酸对原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响被引量：1
- 2013年
- 本试验旨在探讨β-羟丁酸(BHBA)对体外原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响以及p38MAPK在其中的调控作用。选择培养72h的肝细胞,添加不同浓度的BHBA(0、0.6、1.2、2.4mmol/L),培养9h,每个浓度3个重复。另外选取细胞,p38MAPK抑制剂SB203580(10μmol/L)预处理1h后,添加BHBA,使其终浓度为2.4mmol/L;PI/Annexin V-FITC双染,运用荧光显微镜观察肝细胞凋亡情况;ELISA法检测p38的活性;实时荧光定量PCR方法检测p38、Caspase-3、Caspase-9、bcl-2基因的mRNA表达水平。结果表明,与对照组相比,1.2和2.4mmol/L BHBA组的肝细胞凋亡明显增加;p38酶活性明显升高;p38、caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平均显著增加(P<0.01),bcl-2基因mRNA表达水平显著降低(P<0.05);添加p38抑制剂后,caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平显著降低(P<0.01),bcl-2基因mRNA表达水平显著增加(P<0.05)。高浓度的BHBA可以诱导体外原代培养犊牛肝细胞凋亡,p38在BHBA诱导的细胞凋亡中发挥重要作用。
- 宋玉祥李玉李心慰史晓霞丁红研韩盈盈李娜张仁和张玉明王婷婷殷立恒郭立辉李小兵王哲刘国文
- 关键词：P38凋亡基因肝细胞犊牛
- 催乳素对奶牛脂肪细胞脂代谢关键基因的作用被引量：2
- 2015年
- 催乳素(prolactin,PRL)是启动和维持泌乳的重要激素,在泌乳期间能调节机体将营养物质和能量优先流向乳腺,用于乳脂和乳蛋白的合成。本试验采用体外分离培养奶牛前脂肪细胞,诱导分化为成熟脂肪细胞,加入PRL探讨其对脂肪细胞脂代谢相关基因的作用。结果显示,奶牛白色脂肪细胞存在催乳素受体(prolactin receptor,PRLR),且在PRL质量浓度为75μg/L,作用时间为9h时,PRLR表达量达到最高,此时调节脂合成的核转录因子SREBPE-1c及下游控制脂合成的基因FAS和LPL均显著降低,75μg/L组与对照组相比差异极显著(P<0.01);控制脂分解的基因HSL显著升高,75μg/L组与对照组相比差异显著(P<0.05);细胞培养上清液中的甘油含量显著升高,75μg/L组与对照组相比差异显著(P<0.05)。结果表明,PRL能直接作用于奶牛白色脂肪细胞,降低脂合成作用并促进脂分解作用。
- 殷立恒杜希良雷林邓清华张玉明王婷婷郭立辉张仁和李心慰刘国文
- 关键词：催乳素奶牛脂肪细胞
- 胰岛素、胰高血糖素对体外培养犊牛肝细胞CPT-Ⅰ和CPT-ⅡmRNA表达的影响被引量：1
- 2014年
- 体外原代培养犊牛肝细胞,添加不同浓度的胰岛素(insulin,INS)(0、1、10、100、1 000nmol/L)和胰高血糖素(glucagon,GLN)(0、1、10、100、1 000nmol/L),每个处理做3个重复,分别培养1h后,提取总RNA。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法,检测肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ(carnitine palmitoyl transferase,CPT-Ⅰ)和肉碱棕榈酸转移酶Ⅱ(carnitine palmitoyl transferase,CPT-Ⅱ)mRNA表达的变化。结果显示,随着培养液中INS含量的升高,肝细胞中CPT-ⅠmRNA和CPT-ⅡmRNA的表达量逐渐降低,呈现一定的剂量依赖性。随着培养液中GLN含量的升高,肝细胞中CPT-ⅠmRNA和CPT-ⅡmRNA的表达量均升高,呈现一定的剂量依赖性,且当GLN的添加浓度高于100nmol/L时,CPT-ⅠmRNA和CPT-ⅡmRNA的表达量显著升高(P<0.01)。结果表明,INS可在一定程度上抑制脂氧化关键酶的表达,GLN可显著促进脂氧化关键酶的表达。
- 丁红研李玉史珍杨威张仁和杨文涛邓清华刘国文王哲李小兵
- 关键词：胰岛素胰高血糖素
