安敏
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 云芝免疫调节蛋白TVC的纯化与特性被引量：1
- 2010年
- 生物活性蛋白是药用真菌中一类重要的活性功能因子.云芝是中国传统的药用真菌,具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等活性.通过硫酸铵沉淀、阴离子交换层析和凝胶过滤层析等过程,从云芝子实体中分离纯化得到一种新的免疫调节蛋白(命名为TVC).TVC在SDS-PAGE结果中呈现分子量为15kD的单一条带,而在Native-PAGE结果中表现分子量为30kD,表明天然的TVC为同源二聚体.等电聚焦电泳表明,TVC的等电点pI为4.0,为酸性蛋白质,根据periodic acid/Schiff试剂染色反应表明,TVC不含糖,且对大鼠红细胞没有凝集作用,表明TVC缺乏凝集素的典型特征.免疫活性测定,应用流式细胞仪检测发现TVC能增强小鼠脾淋巴细胞的增殖,但对CD4+,CD8+等T细胞无影响;TVC以剂量依赖的方式对人外周血淋巴细胞有增殖活性,同时与刀豆蛋白A有联合增殖效应;TVC还能以剂量依赖方式提高脂多糖LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7产生NO和肿瘤坏死因子TNF-α的产量,表明TVC是一种免疫刺激剂,能够提高机体的免疫反应.N端测序和蛋白质MALDI-TOF/TOF质谱,没有在蛋白质数据库中发现同源蛋白质,说明TVC是一个新的免疫调节蛋白.
- 李锋文华安张永杰安敏刘杏忠
- 关键词：生物活性纯化药用真菌云芝
- 灵芝免疫调节蛋白LZ-8的制备和晶体分析被引量：1
- 2010年
- LZ-8蛋白是从灵芝菌丝中分离到的真菌免疫调节蛋白,具有多种免疫调节功能,然而这一蛋白的作用机制尚不清楚。通过蛋白质晶体结构的解析,能够得到蛋白质空间结构特点,从而阐述蛋白质功能的机制。旨在得到LZ-8蛋白的晶体,并获得空间结构数据。以pET21a为表达载体,获得诱导表达的rLZ-8,通过亲和层析、分子筛凝胶层析和阴离子交换层析纯化,蛋白纯度在98%以上,采用悬滴气相扩散法得到蛋白晶体,并获得3.2?数据,为进一步对真菌免疫调节蛋白功能和结构的研究奠定了基础。
- 安敏高福齐建勋李锋刘杏忠
