孙涛
- 作品数:25 被引量:48H指数:5
- 供职机构:上海交通大学农业与生物学院更多>>
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- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鸡传染性支气管炎病毒结构蛋白基因的克隆及序列测定被引量:2
- 2003年
- 根据IBV病毒的已报道基因序列设计了用于扩增鸡传染性支气管炎病毒M41株S1基因和T株核衣壳蛋白基因(N)的引物,经RT-PCR得到了预期大小的扩增产物;将目的条带纯化并回收以后,克隆到pMD18-T质粒载体中,对插入片段进行序列测定,并与已发表的IBVS1、N基因序列进行了比较和分析,表明具有高度同源性。证明我们克隆了IBVS1和N结构蛋白基因。
- 孙涛王欣陆苹
- 关键词:鸡传染性支气管炎病毒结构蛋白基因克隆
- 基质蛋白第221、226位氨基酸位点发生突变的重组水泡性口炎病毒构建和致病性研究
- 2018年
- 重组水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)是一种具有良好应用前景的病毒载体,可用于制备疫苗和治疗肿瘤,但该载体可导致实验动物产生神经毒性,因此其使用仍存在安全性问题。为减低乃至去除野生型VSV的致病性,对该病毒基质蛋白M的第221、226位氨基酸进行了定点突变,制备了新型重组VSV,并围绕新型重组病毒的致病性展开了体外和体内试验。在体外试验中,221、226双位点突变重组VSV病毒(VSVM221,226)的复制能力相比野生型VSV(VSVXN2)降低可达20倍,且激发IFN-β达(871±1.3)pg/m L。在体内试验中,接种VSVM221,226小鼠体重下降仅约(8.9±0.2)%和(12.3±0.4)%,而接种VSVXN2小鼠体重下降高达(32.6±0.5)%和(30±2)%,且有死亡现象发生。试验结果表明,相比VSVXN2以及221、226单位点突变VSV,VSVM221,226的致病性显著降低,其致弱效应可能是由于病毒感染有效激活宿主细胞产生Ⅰ型干扰素所致。VSVM221,226有希望成为一个安全、有效的疫苗载体。
- 吴昊赵秋华孙郭艳柯勇毕波方心葵孙涛
- 关键词:水泡性口炎病毒基质蛋白
- 口蹄疫病毒RNA复制酶基因3D的克隆、表达及纯化被引量:3
- 2005年
- 利用 RT- PCR扩增了口蹄疫病毒 (FMDV )的 RNA复制酶基因 ,并将其克隆到原核表达载体 p ET- 32 a(+)中。重组质粒在大肠杆菌中表达后的目的蛋白为可溶性形式 ,纯化产物用感染 A型 FMDV的豚鼠康复血清进行 Western-blotting检测 ,结果表明 。
- 孙涛陆苹
- 关键词:口蹄疫病毒基因表达基因克隆
- 针对N基因片段的RT-PCR快速检测鸡传染性支气管炎病毒
- 通过对不同鸡传染性支气管炎病毒(IBV)毒株已发表序列的比较分析,发现N基因一个片段具有高度的保守性。根据这个保守区段设计了一对RT-PCR引物,利用这对引物建立了一种快速检测IBV病毒的方法。实验证明该方法具有较高的特...
- 陆苹孙涛王欣
- 关键词:RT-PCR鸡传染性支气管炎病毒N基因
- 文献传递
- 鸡传染性支气管炎病毒N基因片段的RT-PCR扩增及序列分析被引量:3
- 2001年
- 根据 IBV病毒的已报道基因序列设计了一对可扩增 N基因片段的引物 ,并得到了预期的 43 8bp长的扩增产物 ;将目的条带纯化并回收以后 ,克隆到 p MD1 8-T质粒载体中 ,对插入片段进行序列测定 ,并与已发表的 IBV N基因序列进行了比较和分析 ,证明扩增产物是正确的 ,从而建立起了一种准确、实用的检测、鉴定 IBV方法。
- 孙涛陆苹
- 关键词:N基因RT-PCR
- 鸡传染性支气管炎病毒T株核衣壳蛋白基因(N)的克隆及序列测定被引量:2
- 2002年
- 根据IBV病毒已报道基因序列设计了一对用于扩增鸡传染性支气管炎病毒T株核衣壳蛋白基因 (N)的引物 ,经RT_PCR得到了预期大小的扩增产物 ;将目的条带纯化并回收以后 ,克隆到pMD18_T质粒载体中 ,对插入片段进行序列测定 ,并与已发表的IBVN基因序列进行了比较和分析 ,表明具有高度相似性。
- 孙涛陆苹
- 关键词:传染性支气管炎基因克隆核衣壳蛋白基因
- 鸡传染性支气管炎病毒上海地方分离株的RT-PCR快速检测被引量:5
- 2001年
- 根据已报道的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)基因序列设计了 1对可用于扩增不同病毒株N基因片段的引物 ,得到了预期的 438bp长的产物 ,并将此RT PCR方法与鸡胚盲传法结合用于分离、检测IBV。分离病毒的扩增条带经纯化和回收以后 ,克隆到pMD18 T质粒载体中。在对插入片段进行序列测定后 ,我们将测序结果与已发表的IBVN基因序列进行了比较 ,证实具有极高的同源性 ,表明分离的是IBV。据此建立起一种更加快速、有效的分离、鉴定IBV的方法。
- 孙涛王欣陆苹
- 关键词:IBVN基因分离株传染性支气管炎病毒
- 沙乌头猪保种选育技术及保种成效探析
- 2023年
- 畜禽遗传资源是重要的生物资源,是培育新品种和新品系、保护动物多样性、实现畜牧业可持续发展的重要材料,也是满足人们未来各种需求的重要基因库。地处崇明生态岛的沙乌头猪是我国优良地方品种,具有毛色全黑、性成熟早、繁殖力强、母性好、耐粗食、肉质鲜美、嫩而多汁等诸多优点,对低温潮湿的海岛地理气候有较强的适应能力,是杂交优势明显的高产母本品种。通过场内活体保种的方法,维持优良性状稳定,筛选沙乌头猪优秀杂交组合,逐步扩大种群数量,维持遗传多样性,实现对地方猪种的有效保护、畜禽遗传资源利用和可持续发展。
- 张午霞孙涛
- 关键词:保种
- 重组水泡性口炎病毒基质蛋白制备及ELISA检测方法的建立被引量:6
- 2014年
- 水泡性口炎由水泡性口炎病毒(VSV)引起。VSV基因组编码5个结构蛋白,其中基质蛋白(matrix protein,M)是其重要毒力因子,可阻遏宿主细胞mRNA由胞核向细胞质的转运,并抑制感染病毒的细胞产生I型干扰素IFNα/β,使病毒得以快速繁殖。本实验克隆了印第安那型VSV的M基因,在大肠杆菌表达系统中表达制备重组M蛋白,以M蛋白为抗原建立了检测特异M蛋白抗体的间接ELISA方法。采用建立的ELISA方法分析了VSV感染小鼠体内M蛋白抗体的变化规律。
- 张世宽陈备娟肖贤孙涛毛慧玲
- 关键词:水泡性口炎病毒基质蛋白ELISA
- 成人T细胞白血病细胞靶向型水泡性口炎病毒的构建及应用
- 2011年
- 目前肿瘤治疗主要使用放疗、药物化疗,具有很大的毒、副作用,研发肿瘤靶向性药物是未来发展趋势.成人T细胞白血病(adult T cell leukemia,ATL)是一种由HTLV-1病毒引起的人恶性CD4 T淋巴细胞白血病,目前尚无有效治疗方法.溶瘤性水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)是一种肿瘤治疗病毒载体,利用HIV-1囊膜蛋白gp160对野生型VSV病毒进行假型化改造,研制了具备人CD4受体靶向性的重组VSV病毒(VSV-△G-gp160G),在对ATL病人肿瘤细胞进行的体外杀伤实验(ex vivo)中,显示出良好的应用前景.
- 方心葵王欣孙涛
- 关键词:水泡性口炎病毒成人T细胞白血病病毒治疗