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一种基于PCR技术鉴定单拷贝转基因烟草的方法: 本发明提供了一种在烟草转基因过程中快速鉴定单拷贝转基因植株的方法，其利用烟草核基因组上已知的单拷贝内源基因为内标，提取转基因烟草植株总DNA为模板，同时PCR扩增内源和外源目的基因；反应产物在琼脂糖凝胶上电泳检测，呈现出...; 罗克明宋峰孙敏; 文献传递

蕹菜人工种子研究被引量：18: 1994年; 以蕹菜（ＩｐｏｍｏｅａａｑｕａｔｉｃａＦｏｒｓｋ．）小叶品种带芽节段为繁殖体，用４％海藻酸钠（加入ＭＳ基本培养基及３％蔗糖）和２％氯化钙包裹制作人工种子。结果表明，较佳繁殖体的腋芽长度为０．５～３ｍｍ的带芽节段；人工种子在ＭＳ琼脂培养基上的萌发率达引．０２％，在营养土中的成苗率为２７．５９％，幼苗移栽成活率１００％；低温（４±１℃）贮藏３０、６０和９０天后，萌发率分别为４２％、２６％和１８％。; 汤绍虎孙敏李坤培; 关键词：蕹菜人工种子

果梅ISSR-PCR反应体系的建立和优化被引量：19: 2007年; 以果梅品种桃梅为试材，通过单因子试验分别研究了DNA模板浓度、引物浓度、Mg^2＋浓度、dNTPs浓度、退火温度及循环数等对果梅ISSR-PCR反应的影响．建立了果梅ISSR-PCR的最佳反应体系：20μL反应体系中含10×buffer2μL，2．5mmol／LMgCl2，0．2mmol／LdNTPs，0．32μmol／L引物，20～80ng模板DNA，1UTaq DNA聚合酶．利用优化的反应体系，对19个果梅品种进行体系稳定性检测，结果表明该反应体系的重复性和稳定性良好．; 桂腾琴乔爱民孙敏王心燕孙雪梅; 关键词：果梅反应体系优化稳定性

菜心ISSR-PCR反应体系的优化被引量：10: 2007年; 以菜心（Brassica campestris L．ssp．Chinensis Var．utilis Tssen．et Lee．）为材料，对影响ISSR-PCR扩增结果的因素如Mg^2＋、Taq DNA聚合酶、dNTPs、Primer、模版DNA的浓度及引物退火温度、延伸时间和循环次数进行了探讨，确立了适合菜心ISSR-PCR分析的最佳反应体系和PCR扩增参数：在25pL反应体系中含10×buffer 2．5μL，2．0mmol／LMg^2＋，0．5U Taq DNA聚合酶，0．2mmol／LdNTPs，0．5μmol／L引物，30ng模板DNA．PCR扩增程序：94℃预变性3min；94℃变性1min，49．7～56℃退火（退火温度随引物不同而定）1min，72℃延伸45s，40个循环；72℃延伸5min．; 孙雪梅乔爱民孙敏桂腾琴; 关键词：菜心

重庆采煤沉陷区植物修复对土壤质量的影响被引量：3: 2014年; 利用不同植物修复模式对重庆天府煤矿采煤沉陷区土壤理化性质的变化进行了研究。结果发现:经植物修复4 a各修复模式容重比对照明显减小;土壤孔隙度显著增大(p<0.05),从对照的41.84%变化为油茶45.21%,商陆46.42%和黑麦草的47.87%,黑麦草上升的幅度达到6.03个百分点。有机质含量变化显著(p<0.05),天然植被含量最高,为82.84 g/kg,其次为商陆的80.67 g/kg,对照区含量15.82 g/kg为最低。全氮、碱解氮含量显著减小(p<0.05),全钾、速效钾、全磷、速效磷含量无显著变化(p>0.05)。通过主成分分析不同植物修复区土壤前3个主成分值的散点图来表征土壤理化性质的综合变异性,并对采煤沉陷区植物修复后土壤质量进行了评价。; 张显强石晓玲谌金吾孙利龚卫平孙敏; 关键词：采煤沉陷区土壤理化性质植物修复主成分分析

不同树龄凹叶厚朴7种次生代谢产物积累研究被引量：5: 2013年; 目的:建立研究同一地域来源、不同树龄的凹叶厚朴7种次生代谢产物质量分数变化,为确定凹叶厚朴最佳采收条件提供参考依据.方法:利用高效液相色谱法(HPLC)对绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、槲皮素、和厚朴酚与厚朴酚进行分离,并建立标准曲线及回归方程.分析随着树龄的增加,其叶、枝皮、茎皮和根皮中7种次生代谢产物质量分数积累情况.结论:不同树龄的凹叶厚朴叶片、枝皮、茎皮和根皮中7种代谢产物质量分数随着树龄积累差异较大,绿原酸、芦丁、金丝桃苷、槲皮苷和槲皮素等主要存在于在树龄相对较小的叶片和枝皮中,随着树龄从7年增加至26年其积累变化不明显;厚朴酚与和厚朴酚主要分布于凹叶厚朴的树皮中,其中根皮质量分数最高,茎皮、枝皮次之;7至13年树龄的植株,其厚朴酚与和厚朴酚积累量随树龄增加而明显增加,13至26年树龄的植株随树龄增加二者积累量增幅不大.因此,凹叶厚朴的最适采收对象是树龄超过13年之后的植株.; 谌金吾杨占南胡庭坤王凤英孙际薇孙敏; 关键词：树龄凹叶厚朴 HPLC法次生代谢产物

香石竹DcPAL1基因的克隆及其原核表达被引量：4: 2012年; 苯丙氨酸解氨酶(PAL)是植物苯丙烷类代谢途径的关键酶。利用RT-PCR及RACE技术从香石竹茎中克隆到苯丙氨酸解氨酶基因的全长cDNA,命名为DcPAL1(GenBank登录号为FJ864719)。DcPAL1全长2 397bp,预测其开放阅读框长2 121bp,编码一个含有706个氨基酸的蛋白质,其分子量为76.8kD,等电点5.84,且含有PAL的特征序列和活性位点。构建pET-DcPAL1原核表达载体,并转入大肠杆菌(Escherichia coli)中表达,获得1个与预测大小一致的外源蛋白,主要以包涵体形式存在。用Ni2+-NTA螯合琼脂糖层析柱亲和层析得到了纯化的表达蛋白。; 张继栋曹锦萍乔爱民李红梅孙敏何生根; 关键词：香石竹苯丙氨酸解氨酶基因克隆原核表达

发根农杆菌介导的药用植物遗传转化研究进展被引量：34: 2000年; 发根农杆菌介导的植物遗传转化是近年来发展起来的一项新的植物遗传转化技术。本文就发根农杆菌 Ri质粒的结构、发根农杆菌介导的植物遗传转化的方法和步骤。; 陈敏王和勇廖志华孙敏; 关键词：发根农杆菌毛状根药用植物

转化毛状根获得萝芙木生物碱的研究被引量：27: 1993年; 药用植物萝芙木(Rauvolfia verticillata)的无菌苗被含有Ri质粒的发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)感染后,诱导出毛状根(Hairy root)。将毛状根分离、除菌后,在不含激素的MS固体或液体培养基上培养,从296个株系中筛选出RV 19、RV 26、RV 37和RV53四个生长速度快、分枝数量多等优良特性的无性系。对毛状根中次生代谢产物的提取和测定表明,四个无性系均含有原植物体所具有的吲哚生物碱。为应用转化毛状根技术获得植物次生代谢产物开辟了一条新的有效途径。; 孙敏汤绍虎杨兰英; 关键词：萝芙木夹竹桃科药用植物毛状根生物碱

长柄双花木愈伤组织诱导及植株再生被引量：5: 2006年; 以长柄双花木当年生嫩梢上的叶柄、嫩茎、嫩叶为外植体,对影响长柄双花木愈伤组织诱导和继代、分化主要因素进行研究。结果表明:在培养基MS+NAA0.5mg/L+2,4-D2.0mg/L上,三种外植体均可诱导出愈伤组织,其中叶片愈伤组织诱导率最高。该培养基还可作为愈伤组织继代培养基,但继代培养周期不超过2周。愈伤组织接种在MS+BA2mg/L上分化不定芽,根的诱导在1/2MS+IBA0.5mg/L培养基上进行。; 曾建军肖宜安孙敏; 关键词：长柄双花木愈伤组织继代培养

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孙敏