周琳婷
- 作品数：7 被引量：28H指数：4
- 供职机构：上海生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种采用可溶性噻唑盐WST-8检测细胞病变的方法
- 《中国生物制品规程》2000版附录中,测定重组人干扰素α1b(IFN-α1b)效价是采用细胞病变效应抑制法,用结晶紫法判断并计算待测样品效价。结晶紫法使用的是570nm波长,一般实验室并不常用,且操作步骤复杂,需吸出病毒...
- 周琳婷
- 关键词：细胞病变
- 文献传递
- 微载体浓度与细胞接种密度对MDCK细胞生长的影响被引量：7
- 2014年
- 目的探讨微载体浓度与犬肾脏上皮（Madin-Darby canine kidney,MDCK）细胞接种密度之间的关系,及其对MDCK细胞生长代谢的影响。方法实验设计了4组不同的单个微载体周围的细胞数范围,分别为0-10、10-20、20-60和60-120个,每组范围分别通过控制微载体浓度或细胞接种密度得到2组不同条件的实验组,即12 g/L微载体组和5×104个/ml MDCK细胞组、7 g/L微载体组和1×105个/ml MDCK细胞组、3 g/L微载体组和5×105个/ml MDCK细胞组、1 g/L微载体组和1×106个/ml MDCK细胞组,其中1、3、7、12 g/L微载体组细胞接种密度均为2×105个/ml,5×104、1×105、5×105、1×106个/ml MDCK细胞组微载体浓度均为3 g/L。经转瓶培养,每隔24 h取样,进行细胞计数,并检测细胞代谢。按确定的最佳细胞接种密度和微载体浓度培养MDCK细胞72 h后,接种0.01 MOI的甲型流感病毒株A/PR8/34,检测病毒的HA效价。结果当一个微载体周围的细胞数控制在20-60个之间,微载体浓度为3 g/L,细胞接种密度为5×105个/ml时,活细胞密度（viable cell density,VCD）可达3×106个/ml以上,细胞在72-96 h之间,能获得一个较为稳定的平台期,葡萄糖等营养物不会消耗过多以致耗竭,而乳酸、氨等代谢副产物的累积对培养环境造成的压力较小,有利于后期流感病毒的接种,同时还可达到理论最高活细胞值的60%以上。HA效价可达12 log2HA units/50μl。结论控制单个微载体周围细胞数在20-60个之间,细胞生长和代谢显著优于其他条件,且有利于病毒的复制,提高了病毒滴度。为基于MDCK细胞大规模高效生产流感病毒疫苗的工业化生产提供了数据参考。
- 贾涵婧王逸群黄锭罗剑周琳婷陈则刘旭平谭文松周燕
- 关键词：微载体细胞密度
- 非洲绿猴肾细胞(Vero)无血清细胞库的建立被引量：4
- 2007年
- 目的建立Vero细胞无血清细胞库。方法采用序贯适应和直接适应方法,将Vero细胞从有血清培养适应到无血清培养,建立Vero细胞无血清细胞主库和工作库,采用STR图谱并结合染色体计数对Vero细胞进行鉴别,并对Vero细胞无血清细胞库进行致瘤性和病毒外源因子检定。结果两种方法均能使Vero细胞适应到无血清培养,其中直接适应法可大大缩短适应代次,因此选择其作为建立Vero细胞无血清细胞库的方法。Vero细胞无血清主库和工作库的STR图谱与日本细胞库公布的Vero细胞STR图谱完全一致,Vero细胞库无外源因子污染,无致瘤性。结论Vero细胞无血清细胞库可用作生物制品生产用候选细胞基质。
- 何春艳唐丽丽李嘉韩玉英吴书军周琳婷应通锋秦洁
- 关键词：非洲绿猴肾细胞无血清培养细胞库
- 细胞密度和营养供给对H1N1流感病毒产率的影响被引量：4
- 2015年
- 探究细胞培养生产流感病毒过程中,高细胞密度引起低单位细胞病毒产率(Svy)的原因及找到解决方法。通过增加微载体浓度以及换液操作获得较高的细胞密度;考察了感染时细胞密度(CCI)和病毒感染用维持培养基对病毒产量和单位细胞病毒产率的影响。在12.6 g/L微载体培养过程中,通过换液操作,可获得高细胞密度,达到1.47×107 cells/m L。在CCI为1×107cells/m L条件时,选择合适的维持培养基,其Svy最高达到5.14×103 virions/cell,比同等条件下用DMEM维持培养基的Svy值提高了近一倍。高密度培养MDCK细胞生产流感病毒时,充分考虑不同阶段的培养条件和营养需求,可以提高细胞密度和单位细胞病毒产率,进而提高流感病毒的产量。该研究结果为工业化生产流感病毒疫苗提供了基础数据。
- 孔文刚黄锭罗剑周琳婷陈则刘旭平谭文松邓献存
- 关键词：MDCK流感病毒
- 流感病毒聚合酶结构功能及其作为抗病毒靶点研究进展
- 2014年
- 流感病毒RNA聚合酶是由PB2,PB1,PA三个亚基组成的蛋白质复合物,分别由流感基因片段1,2,3编码。在流感病毒基因组RNA复制,病毒mRNA转录以及维持病毒生命周期中发挥着重要作用。近年来随着对其深入研究,为抗流感病毒药物的研制奠定了基础。本文主要介绍了RNA聚合酶各个亚基的结构、功能,亚基间相互作用以及RNA酶抑制剂的研究进展。
- 李贝贝周琳婷吴金妍
- 关键词：流感病毒RNA聚合酶
- 制备流感疫苗的细胞基质研究进展被引量：4
- 2014年
- 考虑到鸡胚生产流感疫苗的局限性,研究者们开始关注细胞培养疫苗生产技术.此文主要介绍了几种常用的细胞基质（如Vero、PER.C6、Madin-Darby狗肾细胞和其他动物细胞）,阐述了利用细胞培养技术制备流感疫苗的方法及研究进展.相关研究显示细胞基质生产的流感疫苗与鸡胚生产的流感疫苗相比,效果相似或者更好.
- 周琳婷李贝贝吴金妍陈则
- 关键词：流感疫苗细胞培养技术VERO细胞MDCK细胞
- 采用可溶性噻唑盐WST-8检测细胞病变被引量：10
- 2004年
- 目的 建立一种简便和客观的检测细胞病变的方法。方法 活细胞代谢过程中 ,可溶性噻唑盐WST 8在电子载体 1 MethoxyPMS存在时被还原形成的可溶性甲染料 ,通过读取A4 50 6 30 间接检测活细胞的个数 ,可用于细胞病变的检测。将WST 8法用于rhIFN α1b效价的检测 ,并与结晶紫法和常规镜检相比较。结果 相关性研究表明在一定细胞浓度范围内 (2 0 0～ 5 5 0 0 0细胞 孔 )Wish活细胞个数与A4 50 6 30 值呈线性相关 ,相关系数为 0 998。WST 8法检测rhIFN α1b的效价结果与结晶紫法和常规镜检结果基本一致 ,相关系数分别为 0 911(P <0 0 0 1)和0 94 5 (P <0 0 1)。结论 WST
- 何春艳周琳婷陈延赵春女徐帆洪
- 关键词：细胞病变效价
