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金黄色葡萄球菌对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞PDGF-BB mRNA及蛋白表达的影响被引量：3: 2015年; 为研究金黄色葡萄球菌(S.aureus)对奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)中PDGF-BB m RNA及蛋白表达的影响,本研究采用热灭活的不同浓度的S.aureus菌液(0、105、106、108cfu/m L)作用于BMEC,分别在不同时间点(6 h、12 h、24 h、48 h)利用荧光定量PCR和western blot方法检测PDGF-BB m RNA及其蛋白的相对表达量。结果显示,不同浓度菌液处理组的PDGF-BB m RNA相对表达量随着作用时间延长表达量升高(p<0.05)。6 h处理组随着菌液浓度的升高,PDGF-BB m RNA的相对表达量呈升高趋势;12 h处理组随着菌液浓度的升高,PDGF-BB m RNA的相对表达量呈降低趋势;24 h和48 h处理组105cfu/m L菌液处理组PDGF-BB m RNA相对表达量最高(p<0.05)。同时,各时间点不同浓度菌液处理组PDGF-BB蛋白的相对表达量和m RNA表达基本一致。本研究表明,热灭活的S.aureus能够促进BMEC PDGF-BB m RNA和蛋白的表达。; 吴建美王凤龙丁玉林毕艳楠王一王金玲莫内赵占宽; 关键词：金黄色葡萄球菌奶牛乳腺上皮细胞

大肠杆菌对体外培养的奶牛乳腺成纤维细胞TGF-β1和NF-κB及TLR4表达的影响被引量：2: 2015年; 为研究大肠杆菌对奶牛乳腺成纤维细胞(BMFB)TGF-β1表达的影响以及对其信号转导通路Toll样受体4(TLR4)的表达和核转录因子κB(NF-κB)活化的影响,采用热灭活的不同浓度大肠杆菌菌液(0、1×105、1×106、1×108 CFU/mL)作用于奶牛乳腺成纤维细胞,分别于不同时间点(作用后第6、12、24、48小时)运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测TGF-β1和TLR4mRNA的表达,运用Western-blot检测TGF-β1、TLR4和p-NF-κB-p65蛋白的相对表达量。结果显示,大肠杆菌作用BMFB后,TGF-β1mRNA和蛋白的表达量显著的升高,并且TGF-β1mRNA的表达呈明显的时效及量效关系,于第24小时达到高峰后降低(P<0.05);TGF-β1蛋白的表达量呈量效性(P<0.05)。TLR4mRNA和蛋白表达水平显著升高,并且TLR4mRNA和蛋白的表达呈时效性和量效性,分别于作用后第24和12小时达到最高后逐渐下降(P<0.05)。p-NF-κB-p65的表达与大肠杆菌作用浓度呈正量效关系,表达量随作用时间延长先升高后逐渐降低(P<0.05)。上述研究结果表明,热灭活的大肠杆菌能够促进BMFB的TLR4表达,并激活BMFB p-NF-κB-p65蛋白的表达,从而促进TGF-β1的表达。; 王一吴建美毕艳楠丁玉林王凤龙; 关键词：大肠杆菌 TGF-Β1 NF-ΚB

金黄色葡萄球菌对体外培养的奶牛乳腺成纤维细胞PDGF-BB及其受体PDGFRβ表达的影响被引量：2: 2015年; 为研究不同浓度的金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺成纤维细胞(BMFB)血小板源性细胞生长因子(PDGF-BB)及其受体PDGFRβ表达的影响,采用不同浓度的热灭活金黄色葡萄球菌(0、105、106和108 CFU/mL)作用于BMFB细胞,分别于不同的时间点(6、12、24和48h)采用RT-PCR法检测PDGF-BB及PDGFRβmRNA表达,Western-blot法检测PDGF-BB及PDGFRβ蛋白的表达。结果显示,金黄色葡萄球菌作用于BMFB后,PDGF-BB mRNA表达量的升高呈明显的时效关系和量效关系(P<0.05);PDGF-BB蛋白表达升高呈明显的时效关系(P<0.05)。PDGFRβmRNA的表达量较对照组升高,呈正量效关系和正时效关系,在12h达到峰值后下降,同时mRNA表达量呈负量效关系(P<0.05);PDGFRβ蛋白表达量呈正时效关系(P<0.05)。本研究证实了金黄色葡萄球菌可以上调BMFB PDGF-BB及PDGFRβmRNA和蛋白的表达。; 吴建美丁玉林毕艳楠王一王金玲莫内赵占宽王凤龙; 关键词：金黄色葡萄球菌 PDGF-BB

奶牛乳汁中白细胞介素-6与体细胞凋亡的相关性分析被引量：2: 2014年; 为了解奶牛乳腺炎病例乳汁中白细胞介素-6(IL-6)与体细胞凋亡的相关性,探讨了患有不同程度乳腺炎的奶牛乳汁中IL-6水平变化,并研究了IL-6与乳汁体细胞凋亡的相关性。利用无菌消毒法对某奶牛饲养场的82头奶牛采集乳样,采用放射免疫分析法测定乳清IL-6,应用流式细胞仪检测乳汁体细胞凋亡率。结果表明,隐性乳腺炎乳汁中IL-6水平极显著高于无乳腺炎乳汁中IL-6水平(P<0.01),临床乳腺炎乳汁中IL-6水平极显著高于无乳腺炎乳汁和隐性乳腺炎乳汁中IL-6水平(P<0.01);奶牛乳腺炎病例乳汁中IL-6水平与上皮细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞凋亡呈明显负相关(P<0.01),其中IL-6与中性粒细胞的相关系数接近1或达到1,二者的相关性最明显,IL-6对中性粒细胞凋亡抑制最明显。奶牛乳汁中IL-6水平与奶牛乳腺炎的发病程度密切相关,IL-6不同程度的抑制牛乳汁中体细胞的凋亡过程,IL-6对中性粒细胞的凋亡过程的明显抑制与奶牛乳腺炎有重要关系。; 智宇丁玉林吴建美毕艳楠王一王凤龙; 关键词：奶牛乳腺炎白细胞介素-6 体细胞凋亡

外源性IL-6与TNF-α对乳腺炎奶牛乳汁中性粒细胞凋亡的影响: 2016年; 为了明确外源性白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-仅（TNF-仅）对奶牛乳腺炎乳汁中性粒细胞凋亡的影响，试验分离乳腺炎奶牛乳汁的中性粒细胞并进行体外培养，以不同浓度的外源性IL-6（0．05ng／mL、0．1ng／mL、0．2ng／mL、0．5ng／mL）与TNF-α（2ng／mL、5ng／mL、10ng／mL、20ng／mL）以及IL-6和TNF-α联合液（1：100，1：50，100：1，50：1，1：1）对其进行作用，在不同时间点（6，12，24，48，72小时）收集细胞，应用流式细胞仪检测细胞凋亡的情况。结果表明：外源性IL-6对乳腺炎奶牛乳汁中性粒细胞凋亡产生抑制作用；TNF-α在6～48h范围内对乳腺炎奶牛乳汁中性粒细胞凋亡产生促进作用；IL-6与TNF-α按不同比例混合后共同作用于体外培养的奶牛乳汁中性粒细胞后，IL-6占比多时以抑制细胞凋亡为主，TNF-仅占比多时以促进细胞凋亡为主。说明外源性IL-6和TNF-α能影响乳腺炎奶牛乳汁中性粒细胞的凋亡，能为奶牛乳腺炎的预防和治疗提供试验依据。; 赵弥张迪丁玉林吴建美毕艳楠王金玲王一于亚娟王凤龙; 关键词：奶牛乳腺炎

奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺上皮细胞TGF-β1、bFGF、PDGF-BB及其受体mRNA表达量的影响: 为了研究金黄色葡萄球菌引起奶牛乳腺炎的纤维化机制,本研究以患乳腺炎奶牛分离得到的金黄色葡萄球菌感染牛乳腺上皮细胞为模型.用不同浓度(0CFU/mL、105CFU/mL、106CFU/mL、108CFU/mL)的热灭活金黄...; 吴建美王凤龙丁玉林王金玲; 关键词：奶牛乳腺上皮细胞

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