叶秀华
- 作品数：29 被引量：117H指数：6
- 供职机构：广东省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鸡白细胞介素15基因的克隆及序列分析
- 2005年
- 根据GenBank中所收录的鸡白细胞介素-15(ChIL-15)的cDNA序列设计特异性引物,以经ConA刺激3 h的科宝鸡脾脏淋巴细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法克隆获得了ChIL-15的cDNA.ChIL-15的cDNA全长655 bp,其中第84位～644位是该基因的阅读框(ORF),共编码187个氨基酸.将所克隆的序列与已报道序列相比较,二者核苷酸的同源性为100%(655/655),所编码蛋白质的氨基酸序列同源性也为100%.
- 叶秀华彭小亮覃宗华谢明权蔡建平陈闻王佩瑶
- 关键词：白细胞介素-15基因克隆
- 鸭疫里默氏杆菌病和大肠杆菌病鉴别诊断PCR方法的建立
- 本研究从鸭疫里氏杆菌提取基因组DNA,以细菌16S rRAN基因的通用引物,用PCR方法成功扩增出鸭疫里默氏杆菌的部分16S rRNA基因,克隆及测序结果表明其全长1512bp,G+C含量为51％,该序列已被Geneba...
- 覃宗华蔡建平吕敏娜叶秀华余劲术吴彩艳谢明权
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌大肠杆菌PCR方法
- 文献传递
- 重组鸡γ干扰素对柔嫩艾美球虫卵囊免疫鸡肠道免疫相关细胞数量的影响被引量：3
- 2008年
- 分别给7日龄和14日龄雏鸡免疫柔嫩艾美球虫孢子化卵囊并同时肌肉注射5000 U重组鸡γ干扰素(rChIFN-γ),21日龄再以5×104个同源柔嫩艾美球虫孢子化卵囊攻虫。分别取试验鸡各肠段制作组织切片,经HE和PAS染色后显微镜检查。发现21日龄时,rChIFN-γ加强免疫组鸡肠道黏膜上皮内淋巴细胞(IELs,9.8)和杯状细胞(GCs,26.2)数量显著高于免疫对照组(8.2、24.9);28日龄时,加强免疫组的IELs和GCs数量进一步增多(13.5、34.1)并显著高于免疫对照组(11.8、26.9)。用改良甲苯胺蓝组织化学染色法检测发现,rChIFN-γ可增加十二指肠、空肠、回肠和盲肠黏膜上皮肥大细胞(MCs)数量。结果提示,rChIFN-γ可有效刺激试验鸡肠道黏膜IELs、GCs和MCs的分化与增殖,具有增强肠道黏膜非特异性免疫的作用。
- 叶秀华蔡建平吴志光易亚斯佘锐萍汪明
- 关键词：柔嫩艾美球虫杯状细胞肥大细胞
- ELISA检测1型鸭疫里默氏杆菌抗体方法的建立及应用
- 鸭疫里默氏杆菌感染是危害养鸭业的最重要的传染病之一.本试验分别应用超声波裂解1型鸭疫里默氏杆菌和甲醛灭活鸭疫里默氏杆菌菌体这两种方法制备抗原包被酶标板,建立了1型鸭疫里默氏杆菌抗体检测的间接ELISA法.其中应用裂解物作...
- 吴彩艳覃宗华蔡建平吕敏娜叶秀华余劲术谢明权
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌免疫吸附间接ELISA法IGG抗体
- 文献传递
- 纳豆芽胞杆菌16S rRNA基因的克隆及其系统进化分析被引量：7
- 2005年
- 纳豆芽胞杆菌是从豆豉中分离出的一种具有益生功能的芽胞杆菌。该研究从纳豆芽胞杆菌提取基因组DNA,以芽胞杆菌16S rRNA基因的通用引物,用PCR方法成功扩增出纳豆芽胞杆菌的部分16S rRNA基因,所克隆序列长1 435 bp,G+C含量为55%,该序列已被G eneB ank收录,其编号为AY 864812。BLA ST分析结果显示,AY 864812与G eneB ank中收录的枯草芽胞杆菌16S rRNA基因同源性最高,其中与AY 601722的同源性为100%。用C lusta lx 1.8对相关序列进行系统进化分析,结果显示纳豆芽胞杆菌与枯草芽胞杆菌在进化关系上的地位最近,从分子水平上证实了纳豆芽胞杆菌是枯草杆菌的1个亚种。
- 覃宗华蔡建平叶秀华王佩瑶陈闻王星谢明权
- 关键词：RRNA基因克隆
- 堆型艾美耳球虫cSZ1基因在减毒沙门氏菌的表达及免疫保护效果研究被引量：18
- 2005年
- 用PCR方法扩增堆型艾美耳球虫广东株子孢子表面抗原基因cSZ1的阅读框架 (ORF) ,与质粒表达载体pYA3342连接后转化大肠杆菌E-coliX6 2 12 ,获得阳性重组质粒后将其电转化至减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)X4 5 5 0。经IPTG诱导获得了cSZ1基因在减毒S typhimurium的高效表达 ,表达产物占菌体总蛋白的 9 2 % ,重组蛋白分子量约为 19kDa。将重组减毒S typhimurium分别以 10 8或 10 9CFU 鸡经口免疫 4日龄岭南黄肉鸡 ,免疫后两周血清中可检测到抗cSZ1的特异性IgG ,3周时抗体水平达到峰值 ;2 5日龄时可在肠道检测到特异性IgA的分泌。免疫后 3周 ,试验鸡分别经口攻击感染 5 0 0个E acervulina孢子化卵囊 ,结果显示免疫组与非免疫组有相似的排卵囊曲线 ;计数攻虫感染后第 3 5～ 9 5天卵囊总产量 ,2个免疫组分别能降低 2 5 . 1%和 4 6 . 4 %的卵囊产生。
- 覃宗华谢明权蔡建平艾哈迈德叶秀华
- 关键词：堆型艾美耳球虫减毒沙门氏菌免疫保护孢子化卵囊IPTG广东株
- 柔嫩艾美耳球虫表面抗原SAG2基因的克隆与表达被引量：6
- 2006年
- 根据生物信息学预测的基因序列设计引物,应用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子总RNA扩增获得了鸡柔嫩艾美耳球虫表面抗原2(surface antigen 2,SAG2)基因序列,将其与pGEM-T easy载体连接后转化E.coliDH5α,筛选阳性克隆,以带有限制酶切位点的特异性引物用PCR方法扩增不含SAG2 N端信号肽序列的ORF序列后克隆至表达载体pET-32 a(+),构建了重组表达质粒pET-32 a(+)-SAG2,并将其转化至E.coliBL21(DE3)。经IPTG诱导,获得了SAG2重组抗原在大肠杆菌的高效表达,重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的35%,融合蛋白的分子量约为47 ku。菌体经超声处理后进行SDS-PAGE分析表明,表达蛋白以包涵体的形式存在。
- 简永利蔡建平于三科覃宗华林青叶秀华陈闻党海斌
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫基因克隆
- 不同剂量和免疫次数对鸡毒害艾美耳球虫免疫保护力的影响被引量：17
- 2006年
- 以相对增重率(RBWG)、饲料转化率(FCR)和盲肠相对卵囊产量(ROP)为指标,评价了1次或2次分别以1×103个或3×103个毒害艾美耳球虫(E.necatrix)孢子化卵囊(SO)/鸡剂量免疫接种后特异性免疫力的产生和持续时间。笼养岭南黄肉雏鸡于3日龄1次或3日龄和10日龄2次分别接种不同剂量的E.necatrix SO后,于17日龄(2次免疫组为24日龄)、34日龄和50日龄时以14×104SO/鸡剂量的同源卵囊攻虫,结果表明,免疫后2周卵囊接种鸡已产生坚强免疫力,1次免疫接种者(17日龄)高、低2个不同剂量组的RBWG、FCR和ROP分别为95.5%、2.32、24.54%和101.4%、2.32、21.1%;而2次免疫组(24日龄)的上述指标则分别为106.5%、2.44、9.3%和98.2%、2.38、7.48%。至34日龄和50日龄攻虫时,这些指标均有不同程度的下降,且随着时间延长,下降更为明显,但2次免疫处理组的这些指标均明显优于1次免疫者;同一次处理的不同剂量组间无明显差异。结果揭示,雏鸡口服免疫接种一定剂量的E.necatrix孢子化卵囊后可迅速诱导鸡体特异性免疫力的产生,但免疫保护力在笼养条件下持续时间较短。
- 卞国志蔡建平谢明权翁亚标覃宗华叶秀华
- 关键词：卵囊免疫接种
- 重组ChIFN-γ增强鸡球虫细胞免疫作用的研究被引量：23
- 2005年
- 初步探讨了重组鸡γ干扰素(rChIFN_γ)对鸡体抗球虫细胞免疫的增强效果,分别给7日龄和14日龄雏鸡邓E.tenella孢子化卵囊免疫并同时肌肉注射5 00 U rChIFN_γ后,于21日龄以同源E.tenella攻虫。试验结果显示:rChIFN_γ处理组的试验雏鸡脾脏和胸腺免疫器官指数显著高于免疫对照组(P<0.05),在21日龄时的淋巴细胞转化水平(1.14)也显著高于卵囊免疫对照组(0.95)(P<0.05);ABC染色结果表明rChIFN_γ可以显著增加试验雏鸡脾脏和盲肠的CD4+、CD8+T淋巴细胞数量;Griess(NO2-)结果表明:rChIFN_γ处理组在21日龄的NO2-含量(2.77 ug/mL)显著高于免疫对照组(2.14 ug/mL)(P<0.05);溶菌酶(LSZ)试验表明,21日龄时rChIFN_γ处理组的LSZ含量(22.80 ug/mL)显著高于免疫对照组(19.79 ug/mL)(P<0.05)。结果提示rChIFN_γ具有抗球虫免疫的增强效果,能显著提高鸡体抗球虫保护性细胞免疫水平。
- 叶秀华蔡建平吴志光汪明
- 关键词：IFN-Γ柔嫩艾美尔球虫溶菌酶免疫作用E.TENELLA
- 鸡白细胞介素17在毕赤酵母细胞中的分泌表达
- 将去除信号肽的鸡IL-17基因编码框克隆至酵母表达载体pPIC9K,用SalⅠ将pPIC9K-IL17线性化后,电转化毕氏酵母GS115,以PCR鉴定重组菌株.筛选后得到His+Mut+转化子,在BMGY和BMMY培养基...
- 余劲术覃宗华蔡建平叶秀华吕敏娜吴彩艳谢明权
- 关键词：毕赤酵母
- 文献传递
