史梦婷
- 作品数:12 被引量:9H指数:2
- 供职机构:石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- miR-193a在MDBK细胞中诱导细胞凋亡的研究
- 研究目的:本试验旨在研究miR-193a 在致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(cp BVDV)感染MDBK细胞过程中诱导细胞凋亡的分子机制.材料方法:试验利用TargetScan 和Microcosm Targets 等生物...
- 史梦婷付强孟露萍史慧君包海洋张辉任艳陈创夫
- 结核分支杆菌Rv2031c慢病毒载体的构建及其对RAW264.7细胞凋亡的影响
- 研究结核分支杆菌Rv2031c 基因对小鼠巨噬细胞对RAW264.7 细胞凋亡的影响.根据GenBank数据库中结核分支杆菌Rv2031c 的序列设计引物,以结核分支杆菌国际标准株H37Rv 株灭活的菌液上清液为模版,扩...
- 史梦婷孟露萍包海洋付强史慧君张辉任艳乔军陈创夫
- 结核分支杆菌Rv2031c慢病毒载体的构建及其对RAW264.7细胞凋亡的影响被引量:4
- 2015年
- 研究结核分支杆菌Rv2031c基因对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞凋亡的影响。根据GenBank数据库中结核分支杆菌Rv2031c的序列设计引物,以结核分支杆菌国际标准株H37Rv株灭活的菌液上清液为模版,扩增Rv2031c基因;克隆至慢病毒表达载体plex-EGFP中,经酶切和测序鉴定后,获得plex-Rv2031c-EGFP重组慢病毒载体;将重组慢病毒质粒分别与辅助质粒共转染至293T细胞中,转染48h后收集慢病毒,并侵染RAW264.7细胞;侵染48h时收集细胞,用流式细胞术检测各试验组巨噬细胞的凋亡率;提取细胞总RNA并反转录成cDNA,PCR检测Rv2031c基因在细胞中的表达情况;同时,使用细胞裂解液提取细胞总蛋白,Western blot检测Rv2031c蛋白表达水平。结果表明,成功构建了Rv2031c的慢病毒表达载体plex-Rv2031c-EGFP;构建了过表达Rv2031c的慢病毒Rv2031c-lv;感染Rv2031c-lv的RAW264.7细胞的凋亡率为41.8%,而对照组EGFP-lv感染的RAW264.7细胞其凋亡率为30.0%;PCR结果表明Rv2031c在Rv2031c-lv侵染的RAW264.7细胞中高表达;Western blot结果显示Rv2031c蛋白在Rv2031c-lv侵染的RAW264.7细胞中高表达。该研究成功构建了结核分支杆菌Rv2031c的慢病毒表达载体并验证了其对RAW264.7细胞凋亡的影响,为结核分支杆菌在机体内潜伏期感染的药物研究奠定了基础。
- 史梦婷孟露萍包海洋付强史慧君王慧勤张辉任艳乔军陈创夫
- 关键词:慢病毒RAW264.7细胞细胞凋亡
- miR-193a影响BVDV胞内复制的分子机制研究
- 牛病毒性腹泻-粘膜病(BVD-MD)是一种广泛传播的传染性疾病,主要感染对象是以牛为主的家畜。由于BVDV对于动物群体以及人类都有着重大的影响,因此被列入到了世界动物卫生组织(OIE)国际贸易重点疾病的名单中。关于BVD...
- 史梦婷孟露萍付强史慧君张辉任艳乔军陈创夫
- 文献传递
- miR-193a在MDBK细胞中诱导细胞凋亡的研究
- 研究目的:本试验旨在研究mi R-193a在致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(cp BVDV)感染MDBK细胞过程中诱导细胞凋亡的分子机制。材料方法:试验利用TargetS can和Microcosm Targets等生物信...
- 史梦婷付强孟露萍史慧君包海洋张辉任艳陈创夫
- 文献传递
- miR-193a影响BVDV胞内复制的分子机制研究
- 牛病毒性腹泻-粘膜病(BVD-MD)是一种广泛传播的传染性疾病,主要感染对象是以牛为主的家畜。由于BVDV 对于动物群体以及人类都有着重大的影响,因此被列入到了世界动物卫生组织(OIE)国际贸易重点疾病的名单中。关于BV...
- 史梦婷孟露萍付强史慧君张辉任艳乔军陈创夫
- 慢病毒介导牛pre-miR-29b表达的Balb/c小鼠模型建立研究被引量:1
- 2019年
- 为了通过慢病毒感染的方法建立 pre-miR-29b 表达的 Balb /c 小鼠模型,从而研究 miR-29b在动物模型体内过表达对牛病毒性腹泻病毒( Bovine viral diarrhea virus,BVDV)感染和复制的影响,试验根据 miRBase 数据库中牛 miR-29b 前体 pre-miR-29b 序列设计引物,以 MDBK 细胞全基因组DNA 为模板,PCR扩增 pre-miR-29b 基因,并克隆至空质粒 pLL3.7 中;共同转染 pLL3. 7-pre-miR-29b 及慢病毒包装辅助质粒( pRSV-Rev、pCMV-VSVG 和 pMDLg/pRRE)至 HEK-293T 细胞中,于48,72 小时时收集病毒液,浓缩后接种至 HEK-293T 细胞中进行慢病毒效价测定。将6只 Balb/c小鼠平均分成2组,即空质粒 pLL3.7 感染组和慢病毒 pLL3.7-pre-miR-29b 感染组,每只小鼠尾静脉注射5.0×10^7 infection units(IU)/mL 病毒液,于注射后96小时时处死小鼠,采集肝脏、脾脏、肾脏等器官,提取总 miRNA,并反转录成 cDNA,使用TaqMan 荧光定量RT-PCR法检测 miR-29b 在小鼠不同器官中的表达情况。结果表明:试验成功扩增得到牛 pre-miR-29b 并构建出 pLL3.7-pre-miR-29b;成功包装 pLL3.7-pre-miR-29b慢病毒,其效价为 5.8×10^8 IU /mL;经尾静脉注射慢病毒后,在慢病毒pLL3.7-pre-miR-29b 感染的小鼠不同器官中均有较高水平的 miR-29b 表达。说明试验成功建立了慢病毒介导牛 pre-miR-29b表达的 Balb/c小鼠模型。
- 田瑞鑫王勇王勇史慧君史梦婷史慧君史梦婷张辉
- 关键词:慢病毒BALB/C尾静脉注射TAQMAN荧光定量牛病毒性腹泻病毒
- 结核分支杆菌Rv2031c慢病毒载体的构建及其对RAW264.7细胞凋亡的影响
- 研究结核分支杆菌Rv2031c基因对小鼠巨噬细胞对RAW264.7细胞凋亡的影响。根据Gen Bank数据库中结核分支杆菌Rv2031c的序列设计引物,以结核分支杆菌国际标准株H37Rv株灭活的菌液上清液为模版,扩增Rv...
- 史梦婷孟露萍包海洋付强史慧君张辉任艳乔军陈创夫
- 文献传递
- miR-193a在MDBK细胞中诱导细胞凋亡的研究被引量:1
- 2014年
- 本试验旨在研究miR-193a在致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(cp BVDV)感染MDBK细胞过程中诱导细胞凋亡的分子机制。试验利用TargetScan和Microcosm Targets等生物信息学在线软件预测凋亡相关的miR-193a靶基因Bax,并利用双荧光素酶报告基因系统验证miR-193a的靶基因;用过表达miR-193a的慢病毒pre-miR-193a-lv和抑制miR-193a表达的慢病毒pre-miR-193a-inhibitor-lv分别侵染MDBK细胞,48h后收集细胞,然后用实时荧光定量PCR、Western blotting和流式细胞仪检测凋亡通路中Bax的表达水平及MDBK细胞凋亡率。结果预测并验证了miR-193a的靶基因为Bax;双荧光素酶报告基因分析结果显示miR-193a能直接结合到Bax 3′UTR区域中的miRNA反应位点,并极显著下调Bax的表达水平(P<0.01);流式细胞仪检测凋亡率结果显示,感染pre-miR-193a-lv慢病毒的MDBK细胞凋亡率极显著升高(P<0.01)。结果表明miR-193a能直接靶向凋亡通路中Bax基因,从而促进凋亡的发生。
- 史梦婷付强孟露萍史慧君包海洋张辉任艳陈创夫
- 关键词:BAX凋亡
- miR-193a影响BVDV在牛胞内复制的分子机制研究
- 关于BVDV引起的持续性感染发生的分子机制尚未研究清楚,最关键的是BVDV与宿主细胞之间相互作用关系尚未系统性阐述。大量研究表明,当病毒入侵机体细胞,机体细胞会主动诱发凋亡,或凋亡被诱导,进而导致被感染细胞的死亡以及病毒...
- 史梦婷
- 关键词:家畜养殖家畜免疫
- 文献传递