刘见桥 作品数:129 被引量:354 H指数:9 供职机构: 广州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 广东省医学科学技术研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 文化科学 更多>>
人工周期方案下冻融胚胎移植的安全性评价 刘风华 何玲 李旎 龙晓林 张伟良 杜红姿 黄青 刘见桥 许海燕关键词:胚胎冷冻 自然周期 安全性 乙肝病毒S蛋白诱导人精子凋亡的分子机制 被引量:2 2015年 目的:探讨乙肝病毒S蛋白(HBs)诱导人精子凋亡的分子机制。方法:人精子与不同浓度(0、25、50、100μg/m L)HBs共孵育3 h后,应用Annexin V-FITC/PI双染法检测HBs对精子早期凋亡指标磷脂酰丝氨酸外翻情况,用流式细胞术检测精子细胞内半胱氨酸蛋白酶-3、-8、-9(Caspase-3、-8、-9)活化,用TUNEL结合流式细胞术检测精子DNA的损伤。结果:人精子与25~100μg/m L HBs共孵育3 h后,Annexin V-FITC+/PI-精子,Caspase-3、-8、-9阳性精子,TUNEL阳性精子的比率均显著高于对照组(P〈0.05或P〈0.01),且均呈剂量依赖趋势。结论:25~100μg/m L HBs可诱发人精子胞膜磷脂酰丝氨酸外翻,胞内Caspase-3、-8、-9激活和DNA损伤,从而致使人精子凋亡以影响精子的功能。 康祥锦 丁悦 杨洁 杜红姿 刘见桥 黄天华关键词:HBS 精子功能 解冻移植不同时期胚胎与单卵双胎发生率的相关性分析 被引量:1 2019年 目的比较分析解冻移植周期中处于不同阶段胚胎的单卵双胎(MZT)发生率,可通过避免移植内细胞团松散的囊胚来减少单卵双胎的发生。方法回顾性分析2013-2015年在广州医科大学附属第三医院生殖中心解冻移植的5 069周期、临床妊娠2 724周期情况。根据移植的胚胎情况分为卵裂胚组、桑椹胚组、囊胚组,比较分析卵裂胚组、桑椹胚组、囊胚组的MZT发生情况与临床结局。结果本研究共观察到96例MZT,总的MZT发生率为3. 5%(96/2 724)。卵裂胚组MZT发生率1. 2%(9/737),桑椹胚组MZT发生率2. 5%(3/122),囊胚组MZT发生率4. 5%(84/1 865),3组之间的MZT发生率比较差异有统计学意义(P<0. 05)。结论胚胎的继续培养至囊胚容易增加单卵双胎的发生比例。避免移植内细胞团松散的囊胚可帮助减少单卵双胎妊娠的发生。 张希 李磊 毛玉玲 张文红 杜红姿 刘见桥关键词:单卵双胎 桑椹胚 囊胚 基因编辑技术在人类生殖细胞中的应用研究 被引量:6 2018年 基因编辑技术极大地提高了对基因组靶位点精确修改的效率。人类早期胚胎发育的特异性和目前报道的上万种遗传突变的修复必要性使得基因编辑技术在人生殖细胞中的应用成为必然。对人生殖细胞基因编辑是一个新的领域,涉及到伦理的考虑。因此,这既是个科学问题,同时也是个社会问题。现综述基因编辑技术在人类生殖细胞应用的伦理之争和研究进展。 李广磊 曾艳婷 刘见桥关键词:胚胎发育 遗传疾病 伦理 输卵管切除手术对IVF-ET超促排卵结局的影响 被引量:1 2013年 目的探讨输卵管切除手术对IVF-ET临床结局的影响。方法病历资料分成3组:A组,共320例,既往经子宫输卵管造影(HSG)或腹腔镜检查证明,有双侧输卵管阻塞,行IVF-ET,作为对照组;B组,共68例,曾开腹或腹腔镜下行双侧输卵管切除;C组,共186例,曾开腹或腹腔镜下行单侧输卵管切除,保留对侧输卵管。三组患者IVF-ET前检查未发现输卵管积水等其他输卵管疾病。分别比较患者年龄,不孕年限、Gn启动量、Gn总量、Gn天数、HCG日内膜厚度、HCG日直径>15mm的卵泡数、HCG日E2值,获卵数。结果两组输卵管切除患者不孕年限较对照组低,P<0.05,差异有统计学意义。单侧输卵管切除患者Gn启动量、Gn总量较对照组增加,HCG日内膜厚度及取卵数均较对照组下降,P<0.05,差异有统计学意义。双侧切除患者Gn总量、Gn用药总天数较对照组增加,P<0.05,差异有统计学意义,其余指标对比均无统计学差异。结论输卵管切除手术增加了IVF-ET患者促排卵时Gn启动量、Gn用量及用药总天数,降低了HCG日内膜厚度及取卵数,但对其他临床指标无影响。 王慧慧 刘海波 陈蕊 安庚 刘见桥 龙晓林关键词:输卵管切除 IVF-ET 超促排卵 多次退火环状循环扩增和多重置换扩增技术在β地中海贫血基因变异诊断效率中的差异分析 被引量:4 2016年 目的:探讨最适的β地中海贫血疾病HBB基因单细胞全基因组扩增方法。方法:60份β地中海贫血成纤维细胞(HBB基因变异位点CD17和IVSⅡ654)和48份废弃胚胎单个卵裂球进行多次退火环状循环扩增法(MALBAC)和多重置换扩增法(MDA)扩增及高通量测序,比较位点检测率、等位基因脱扣(ADO)率及扩增均一度等。结果:β地中海贫血疾病HBB基因MALBAC技术位点检测率(100%)高于MDA技术(96.3%);CD17和IVSⅡ654的ADO率MALBAC技术为9.09%和0.00%,MDA技术为23.08%和19.23%;对编码人β-珠蛋白的HBB基因附近60个SNP位点检测显示MALBAC技术ADO率为12.04%,MDA技术为21.25%;MALBAC技术拷贝数变异检测变异系数为0.13,MDA技术为0.15。结论:β地中海贫血单细胞诊断MALBAC法优于M D A法。 孙筱放 李浩贤 刘维强 张慧敏 刘见桥 杜红姿延长体外培养时间增加单卵双胎风险 目的 单卵双胎(MZT)的危险因素尚不明确.IVF中MZT可能与透明带操作如AZH、ICSI,以及囊胚移植,高龄,激素使用等有关.本研究将评估MZT发生的相关因素.方法 数据来自2014-2015年2月,移植1-3个胚胎... 刘寒艳 刘见桥 杜红姿 陈仕萍新鲜移植周期中不孕原因对妊娠结局的影响 2016年 目的 研究各种不孕因素对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)和卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)新鲜移植周期妊娠结局的影响。方法 回顾性分析2010年1月-2014年12月广州医科大学附属第三医院生殖医学中心IVF/ICSI周期的患者,分析不孕原因对各种妊娠指标的影响。结果 盆腔输卵管因素组及男方因素组妊娠率、着床率高于双方因素组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。其余各组之间妊娠率、着床率、流产率及活产率比较差异无统计学意义(P〉0.05)。盆腔输卵管因素组异位妊娠率(40.2%)显著高于男方因素组(1.68%)和子宫内膜异位症组(0.61%)(P〈0.05)。Logistic回归分析发现:多囊卵巢综合征(PCOS)组妊娠率和活产率显著低于盆腔输卵管因素组(OR=0.773,95%CI:0.639~0.935,P〈0.05;OR=0.774,95%CI:0.625~0.958,P〈0.05)。盆腔输卵管因素组与其余各组早期自然流产率比较差异无统计学意义(P〉0.05)。男方因素组和双方因素组异位妊娠率显著低于盆腔输卵管因素组(OR=0.410,95%CI:0.239~0.705,P〈0.05;OR=0.656,95%CI:0.430~0.999,P〈0.05)。结论 在IVF/ICSI新鲜移植周期中,PCOS患者妊娠率和活产率显著低于盆腔输卵管因素患者。盆腔输卵管因素患者与其余各不孕因素患者相比,早期自然流产率差异无统计学意义。盆腔输卵管因素患者异位妊娠率显著高于男方因素和双方因素患者。 吴乙璇 李斯晨 郑海燕 黄青 刘海英 康祥锦 刘见桥关键词:体外受精-胚胎移植 不孕 妊娠 多囊卵巢综合征 小鼠睾丸特异性基因Vad1.2重组蛋白的构建及多克隆抗体制备 2014年 目的:构建小鼠睾丸特异性基因Vad1.2重组蛋白,制备多克隆抗体。方法:将小鼠睾丸组织Vad1.2转录本行RT-PCR扩增,通过DNA重组技术插入克隆载体p ET15b,进行酶切及DNA序列分析。将表达载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)RIL感受态细胞,10 mmol/L IPTG诱导表达重组蛋白,通过10%SDS-PAGE、Western blotting及质谱分析进行鉴定。随后对重组Vad1.2蛋白进行纯化和进一步鉴定。最后,制备兔抗小鼠Vad1.2多克隆抗体,并通过Vad1.2-EGFP质粒转染GC-2spd(ts)细胞对其特异性进行验证。结果:大肠杆菌BL21(DE3)RIL细胞中诱导表达并纯化的小鼠Vad1.2重组蛋白构建正确并经Western blotting和质谱分析得到证实。所制备的多克隆抗体可特异性识别GC-2spd(ts)细胞中过表达的Vad1.2-EGFP融合蛋白。结论:成功构建小鼠Vad1.2重组蛋白,并制备多克隆抗体,为Vad1.2基因的进一步研究奠定了实验基础。 孙源 刘见桥 杜红姿 曹善柏关键词:精子发生 重组蛋白 多克隆抗体 卵母细胞经冷冻步骤改良的玻璃化法冻融后临床效果分析 被引量:1 2017年 目的探讨卵母细胞经冷冻步骤改良的玻璃化法冻融后行卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)受精的临床效果。方法回顾性对比分析经改良法冻融后的卵母细胞(解冻卵组)与同期基本资料与其匹配的ICSI患者的新鲜卵母细胞(新鲜卵组)受精后的临床结局。结果解冻卵组和新鲜卵组的受精率(77.6%vs 76.1%)、卵裂率(98.5%vs 100.0%)、D3优质胚胎率(36.2%vs 27.5%)、优质囊胚(47.7%vs 47.3%)及可利用囊胚比率(52.2%vs 52.6%)差异无统计学意义;解冻卵组有62.5%的患者子宫内膜准备是自然周期,新鲜卵组所有患者均是超促排卵周期;但解冻卵的临床妊娠率及继续妊娠率分别为87.5%和81.3%,均显著性高于新鲜卵组的59.2%和51.3%;流产率新鲜卵组略高(7.1%vs 13.3%),但差异无统计学意义。结论改良后的冻卵方法极大地改善了卵母细胞的发育潜能,几乎无异于新鲜卵母细胞。 黄玉玲 刘见桥 杜红姿 高兴成 张文红 康祥景 罗阳 李磊关键词:卵母细胞 玻璃化冷冻 临床妊娠