刘洪瑞
- 作品数：22 被引量：83H指数：6
- 供职机构：中国医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 应用m2-Gi1α融合蛋白鉴别M2受体的特异性药物被引量：2
- 2005年
- 目的表达m2-Gilα融合蛋白,通过检测GDP与m2-Gilα融合蛋白的亲和力大小来鉴别m2受体的特异性激动剂、拮抗剂和反向激动剂。方法用两步PCR反应重组m2-Gilα融合蛋白cDNAs,并插入到pBacPAK9病毒载体中,利用Sf9细胞表达M2受体蛋白和m2-Gilα融合蛋白,通过[3H]QNB结合饱和实验及[35S]GTPγS竞争性替代结合实验,检测受体表达水平及GDP 与m2-Gilα融合蛋白的亲和力。结果m2-Gilα融合蛋白表达水平是(18.14±0.17)pmol·mg(膜蛋白)-1。m2-Gilα融合蛋白与[3H]QNB的结合量随着[3H]QNB浓度的升高而增加,10 μmol·L-1GTDγS使m2-Gilα融合蛋白与[3H]QNB的饱和结合曲线明显下移。Ach使m2-Gilα融合蛋白与[35S]GTPγS竞争性替代结合曲线明显右移,Pilo稍次之,alcuronium,AF—DX116,Iso及atropine 则使曲线左移,GDP的IC50值分别是168.4,152.3,6.84,6.12,5.59,4.52 μmol·L-1,无配体存在时为14.7μmol·L-1。结论表达的m2-Gilα融合蛋白具备M2配体结合的特性及G蛋白耦联受体的信号转导功能,对于有基础活性的m2-Gilα融合蛋白,Ach, Pilo是完全激动剂;atropine,alcuronium。
- 韩雪松郭政东刘洪瑞叶洪飞郭政礼王海波
- 关键词：融合蛋白
- 滨蒿内酯对哮喘豚鼠模型的平喘作用及机制的研究
- 目的:研究Sco对哮喘豚鼠模型的平喘作用及其对气道炎症及血浆和肺组织活性氧(reactive oxygen species,ROS)的作用,以明确其平喘作用的机制。方法:制备正常的和哮喘的豚鼠离体气管环标本,通过测定其张...
- 刘洪瑞李智袁旭赵明沂韩雪松韩立伟
- 文献传递
- 不同配体对m_5乙酰胆碱受体-G蛋白亚单位G_(11)融合蛋白表达和功能的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 制备毒蕈碱乙酰胆碱受体m5亚型与G 蛋白亚单位G1 1 (m5AChR G1 1 )融合蛋白 ,探索m5AChR与G1 1 之间的耦联功能、相互作用及其影响因素。方法 两步PCR法建立m5AChR与G1 1 融合cDNAs,并在Sf9细胞内表达。 [3 H]QNB和 [3 5S]GTPγS结合实验检测m5AChR与G1 1 融合蛋白的功能。结果m5AChR G1 1 融合蛋白的表达水平为 (60 .4± 2 .0 )nmol·g-1 膜蛋白。不同配体存在使融合蛋白中G1 1 与GDP的亲和力发生变化。乙酰胆碱(ACh)、卡巴胆碱、毛果芸香碱、异丙铵、异丙嗪及阿托品存在时 ,GDP的IC50值分别为 1 35,63 ,1 82 ,4.1 ,8.9和 5.9μmol·L-1 ,无配体存在时 ,GDP的IC50 值为 2 3.4μmol·L-1 。结论 杆状病毒Sf9细胞系统表达的m5AChR G1 1 融合蛋白具备m受体配体结合特性和组分间耦联的功能。m5AChR G1 1 融合蛋白对GDP亲和力取决于m受体配体的性质 。
- 郭政东王海波李智刘洪瑞郭政礼赵立斌
- 关键词：配体毒蕈碱融合蛋白胆碱能激动剂胆碱能拮抗剂乙酰胆碱受体
- 滨蒿内酯对哮喘豚鼠模型的平喘作用及机制的研究
- 2003年
- 刘洪瑞李智等
- 关键词：滨蒿内酯哮喘平喘作用动物模型药理
- 滨蒿内酯对哮喘豚鼠模型的平喘作用及机制的研究
- 目的:研究Sco对哮喘豚鼠模型的平喘作用及其对气道炎症及血浆和肺组织活性氧(reactive oxygen species,ROS)的作用,以明确其平喘作用的机制。方法:制备正常的和哮喘的豚鼠离体气管环标本,通过测定其张...
- 刘洪瑞李智袁旭赵明沂韩雪松韩立伟
- 文献传递
- 滨蒿内酯对哮喘豚鼠血清和肺组织匀浆中白细胞介素4与干扰素γ失衡的调节作用(英文)被引量：10
- 2005年
- 背景:滨蒿内酯是传统中药茵陈的主要有效成分之一,具有免疫抑制、消炎和舒张支气管平滑肌的作用。滨蒿内酯是否能改善哮喘豚鼠血清及肺组织匀浆中白细胞介素4与干扰素γ(IL-4/IFN-γ)失衡、进而抑制IgE的产生而发挥平喘作用目前尚不清楚。目的:研究滨蒿内酯的平喘作用及其对哮喘豚鼠免疫功能的调节作用。设计:以实验动物为研究对象,随机对照的验证性研究。单位:一所大学的天然药物研究室。材料:实验于2000-07/2002-03在中国医科大学药理教研室完成。选择健康雄性豚鼠84只,体质量200±50)g,清洁级。(干预:分别采用10g/L组胺与1g/L乙酰胆碱混合液引喘及10mL/L卵蛋白致敏复制法制备急性和迟发性哮喘豚鼠模型,采用雾化吸入途径给予滨蒿内酯药治疗,观察引喘潜伏期,并分别采用化学发光法、放免法和双抗夹心法检测迟发性哮喘豚鼠血清及肺组织匀浆中IgE,IL-4和IFN-γ的含量。主要观察指标:引喘潜伏期以及实验动物血清及肺组织匀浆中IgE,IL-4和IFN-γ含量。结果:滨蒿内酯明显延长急性和迟发性哮喘引喘潜伏期,哮喘组豚鼠血清及肺组织匀浆中IgE,IL-4含量较对照组明显增加(P<0.05),IFN-γ含量明显降低(P<0.05);而滨蒿内酯组IgE水平及IL-4含量较哮喘组豚鼠显著降低(P<0.05),IFN-γ的含量则明显升高(P<0.05)。结论:滨?
- 刘洪瑞柳春李智滕赞
- 关键词：哮喘白细胞介素4
- 人结直肠癌平滑肌组织毒蕈碱受体特性的变化被引量：1
- 2003年
- 郭政东王海波刘洪瑞韩雪松
- 关键词：人结直肠癌平滑肌毒蕈碱受体
- m受体融合蛋白表达、信号转导及鉴别亚型特异性配体
- 郭政东王海波王昊郭政刘洪瑞赵立斌韩雪松
- 应用PCR方法将人m1/m3/m5或m2/m4的i3环cDNAs与G11α或Gilα亚单位的cDNAs分别重组，经[3H]QNB放射配体结合实验证明融合蛋白中的m1-m5受体保持了药理学特性,在融合蛋白中G11α/Gil...
- 关键词：
- 关键词：毒蕈碱受体融合蛋白亲和性
- 滨蒿内酯对豚鼠哮喘模型抑制作用的研究
- 2000年
- 刘洪瑞李智等
- 关键词：滨蒿内酯哮喘动物实验
- m_1AChR-G_(11)融合蛋白的表达和功能的检测被引量：5
- 2003年
- 目的 表达m1AChR G11融合蛋白 ,检测不同配体对m1AChR与G11间相互作用的影响。方法 两步PCR建立m1AChR G11重组cDNAs ,并在Baculovirus InfectedInsectcells(Sf9)细胞内表达。 [3 H]QNB和 [3 5S]GTPγS结合实验检测m1AChR G11融合蛋白功能。结果 m1AChR G11融合蛋白的表达水平为 4 5 39± 2 2 6pmol·mg-1protein。不同配体的存在使融合蛋白中G11与GDP的亲和力发生变化。乙酰胆碱 ,卡巴胆碱 ,AF 10 2B ,Isopropamide ,R (+) hyoscyamine和阿托品存在以及无配体存在时 ,GDP的IC50 值分别是 131 82、6 1 6 6、2 8 18、3 2 4、6 0 2、5 2 5和 16 6 μmol·L-1。结论 Sf9细胞系统表达的m1AChR G11融合蛋白具备m受体配体结合的特性和组分间偶联功能。m1AChR G11融合蛋白对GDP的亲和性决定于m受体配体的性质 。
- 郭政东王海波李智刘洪瑞于秀华郭政礼赵立斌
- 关键词：融合蛋白G蛋白激动剂拮抗剂
