刘永哲
- 作品数：8 被引量：15H指数：2
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- 锌对L6细胞葡萄糖消耗量和蛋白激酶B/糖原合酶激酶3β表达的影响（英文）
- 2014年
- 目的 以L6细胞为研究对象,观察锌对正常L6细胞及棕榈酸诱导的胰岛素抵抗L6细胞葡萄糖消耗量及胰岛素信号通路关键分子蛋白激酶B（protein kinase B,PKB/AKT）/糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase,GSK3β）表达的影响。方法 培养L6成肌细胞,分化后用0.4 mmol/L棕榈酸作用24h造胰岛素抵抗细胞模型,用100 nmol/L胰岛素和不同浓度的锌（0,10,20,50,100μmol/L）作用3h,葡萄糖氧化酶法测定基础状态和胰岛素刺激状态下细胞对葡萄糖的摄取量;用100 nmol/L胰岛素和不同浓度的锌（0,10,20,50μmol/L）作用15 min,Western blot法检测磷酸化AKT及磷酸化GSK3β表达水平。结果 10-50μmo/L的锌能明显提高正常L6细胞葡萄糖的消耗量和AKT/GSK3β的磷酸化表达,锌与胰岛素共刺激能显著激活AKT/GSK3β;而对于胰岛素抵抗L6细胞,10-50μmo/L锌单独作用可明显提高其葡萄糖消耗量和GSK3β的磷酸化,10-50μmo/L锌与胰岛素共刺激能激活AKT的磷酸化表达。结论10-50μmol/L的锌可提高L6细胞的葡萄糖消耗量,这种作用可能与其增强AKT和GSK3β磷酸化水平有关。
- 卢慧子吴蕴棠孙忠刘永哲王永明桑倩刘信艳
- 关键词：锌葡萄糖摄取
- 妊娠期邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯暴露对成年后子代雄鼠精子的致突变作用被引量：4
- 2014年
- 目的探讨妊娠期邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)暴露对成年后子代大鼠精子的致突变作用。方法将32只健康SPF级SD孕鼠随机分为4组,分别为对照(玉米油)组和2、10、50 mg/kg DEHP染毒组,每组8只。自GD13至GD19,采用灌胃方式进行,每天1次。每窝随机选取1只初生雄性仔鼠,观察其生殖器的发育情况;于70日龄时,观察精子的畸形情况。结果妊娠期DEHP暴露雄性仔鼠的体重、肛殖距系数(AGI)及主要生殖器(睾丸、附睾、精囊腺)的脏器系数与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);主要生殖器未见畸形。2 mg/kg及50 mg/kg DEHP染毒组子代雄性大鼠精子的头部畸形率和总畸形率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而各剂量DEHP染毒组子代雄性大鼠的尾部畸形率与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在本实验条件下,妊娠期较低(2 mg/kg)及较高(50 mg/kg)剂量DEHP暴露对子代雄鼠的精子均具有遗传毒性作用。
- 张钰刘永哲高娜张华婧黄玉敬张彩凤石东星孙增荣
- 关键词：精子畸形遗传毒性
- 邻苯二甲酸-单-乙基己基酯对原代培养新生大鼠海马神经元细胞活性和凋亡率的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨邻苯二甲酸-单-乙基己基酯[mono-（2-ethylhexyl）phthalate,MEHP]对新生大鼠海马神经元细胞活性和凋亡率的影响。方法取出生24 h内清洁级SD大鼠海马组织神经元原代培养8 d后,分别加入含终浓度0（溶剂对照）-100μmol/L MEHP的培养液暴露12、24 h。采用MTT法检测细胞活性,采用Hoechst 33258染色法检测神经元的凋亡情况。结果随着MEHP暴露剂量的升高,新生大鼠海马神经元的存活率、凋亡率均呈先上升后下降的趋势。结论 MEHP可抑制新生大鼠海马神经元细胞活性,促进神经元凋亡。提示MEHP对新生大鼠的海马神经元具有毒性作用。
- 张华婧高娜刘永哲燕美玲张钰孙增荣
- 关键词：海马神经元
- DNA甲基化与表型效应及环境因素相互关系被引量：2
- 2015年
- DNA甲基化作为表观遗传现象的分子基础由Holliday和Pugh于20世纪70年代发现。表观遗传是指DNA序列不发生变化但基因表达却发生了可遗传改变，这些信息能经有丝分裂和减数分裂在细胞和个体世代间传递，而不借助于DNA序列的改变，即表观遗传是非DNA序列差异的核遗传。DNA甲基化是表观遗传学重要改变之一。研究表明，除遗传机制外，环境因素还可通过表观遗传机制，如诱导DNA甲基化模式改变等，在不改变DNA序列前提下，改变基因表达，从而引起表型发生变化。本研究针对DNA甲基化、表型效应、环境因素三者之间关系及DNA甲基化在环境因素所致表型效应中的作用综述如下。
- 刘永哲于敏
- 关键词：DNA甲基化环境因素
- 携带双报告基因真核表达载体pHSV1-TK-IRES2-EGFP在小鼠骨髓间充质干细胞内的表达
- 2012年
- 背景:单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶(herpes simplex virus 1-thymidine kinase,HSV1-TK)与绿色荧光蛋白(EGFP)双报告基因共表达载体构建及其在骨髓间充质干细胞内的表达研究报道较少。目的:构建pHSV1-TK-IRES2-EGFP真核表达载体,并检测其在体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞内的表达。方法:应用聚合酶链式反应从质粒pHSV106中扩增出HSV1-TK基因后与pMD18-T载体连接,构成重组质粒pHSV1-TK/18T。重组质粒以限制性内切酶BglⅡ和SalⅠ进行双酶切,将其插入同样双酶切处理的pIRES2-EGFP载体内;并将新构成的重组质粒pHSV1-TK-IRES2-EGFP以脂质体法转染小鼠骨髓间充质干细胞。结果与结论:酶切鉴定结果表明,扩增的HSV1-TK基因序列正确,大小为1130bp;重组质粒载体内的HSV1-TK序列与GeneBank报告的序列完全一致;骨髓间充质干细胞转染后在荧光显微镜下可以观察到有特异性绿色荧光出现,HSV1-TK的mRNA有表达。实验成功构建了pHSV1-TK-IRES2-EGFP真核表达载体,在体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞内能有效的表达。
- 吴立川杨昆刘永哲陈鹏徐文贵
- 关键词：骨髓间充质干细胞阳离子脂质体增强型绿色荧光蛋白
- 锌对胰岛素抵抗靶细胞活力和葡萄糖消耗量影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨锌对胰岛素抵抗靶细胞活力和葡萄糖消耗量的影响。方法建成Hep G2细胞、3T3-L1细胞和L6成肌细胞胰岛素抵抗模型后,用10-7mol/L胰岛素和不同浓度锌（0、20、50、100、200、400μmol/L）孵育细胞,通过MTT法和葡萄糖氧化酶法测定基础状态和胰岛素刺激状态下3种胰岛素抵抗细胞葡萄糖的消耗量。结果不同剂量的锌孵育3种细胞3 h后,200、400μmol/L的锌可明显抑制各组细胞的活力（P〈0.05）;50-100μmol/L的锌干预3 h能在不同程度上提高Hep G2、3T3-L1正常细胞和胰岛素抵抗细胞的葡萄糖消耗量,但其作用效果明显低于胰岛素;其中100μmol/L的锌与胰岛素共同作用的效果分别优于胰岛素或锌单独作用的效果（P〈0.05）;对于L6肌细胞,20、50和100μmol/L锌均能明显提高基础状态下正常细胞和胰岛素抵抗细胞的葡萄糖消耗量（P〈0.05）;仅有20μmol/L锌和胰岛素共同作用的效果优于胰岛素或锌单独作用的效果（P〈0.05）。结论不同浓度的锌可以在一定程度上提高3种胰岛素抵抗的靶细胞葡萄糖摄取量,且不同的细胞具有不同的适宜作用剂量。
- 赵晓钰卢慧子吴蕴棠孙忠刘永哲王永明桑倩刘信艳
- 关键词：锌胰岛素抵抗
- 出生前邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯暴露对成年后子代大鼠生殖腺促性腺激素释放激素和促性腺激素释放激素受体基因表达的影响
- 2015年
- 目的探讨出生前邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）暴露对成年后SD大鼠生殖腺促性腺激素释放激素（GnRH）、促性腺激素释放激素受体（GnRHR）mRNA表达水平的影响。方法将32只健康SD孕鼠随机分为0（溶剂对照组）和2、10、50 mg/kg DEHP染毒组,每组8只。于妊娠第14~19天,采用灌胃方式进行染毒,染毒容量为10 ml/kg,每天1次。仔鼠出生后正常饲养10周,采用实时荧光定量PCR检测卵巢和睾丸GnRH及GnRHR mRNA的表达水平。结果与对照组相比,仅2 mg/kg DEHP染毒组成年雌性仔鼠卵巢组织内的GnRH mRNA表达水平升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;而各剂量DEHP染毒组成年雌性仔鼠卵巢组织内GnRHR mRNA的表达水平均无明显改变。各剂量DEHP染毒组成年雄性仔鼠睾丸组织GnRH及GnRHR mRNA的表达水平与对照组相比,差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论出生前低剂量DEHP暴露可能通过上调成年后子代雌鼠卵巢GnRH基因表达水平,干扰雌性生殖内分泌调控功能,且可能存在低剂量效应。
- 石东星刘永哲张彩凤胡瑞霞道龙孙增荣王百齐
- 关键词：邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯促性腺激素释放激素促性腺激素释放激素受体
- 骨髓间充质干细胞移植治疗矽肺小鼠肺炎及肺纤维化被引量：7
- 2013年
- 背景：矽肺对职业人群健康的影响日益严峻，目前没有有效治疗的方法。目的：观察骨髓间充质干细胞移植对矽肺的治疗作用。方法：36只C57BL／6小鼠随机摸球法均分为3组。对照组小鼠气管内注入生理盐水；矽肺模型组和骨髓问充质干细胞移植组小鼠气管内注入二氧化硅混悬液建立矽肺模型；骨髓间充质干细胞移植组于造模后6h尾静脉输注骨髓间充质干细胞。结果与结论：肺组织羟脯氨酸的含量矽肺模型组和骨髓间充质干细胞移植组高于对照组，差异均有显著性意义（P〈0．01）；骨髓间充质干细胞移植组含量明显低于矽肺模型组，差异有显著性意义（P〈0．01）。矽肺模型组和骨髓间充质干细胞移植组小鼠的肺系数均高于对照组（P〈0．01），其中骨髓间充质干细胞移植组低于矽肺模型组，差异有显著性意义（P〈0．01）。白细胞介素1β的表达矽肺模型组和骨髓问充质干细胞移植组高于对照组（P〈0．01）；骨髓间充质干细胞移植组低于矽肺模型组，差异均有显著性意义（P〈0．01）。转化生长因子β1在肺组织中的表达同样为矽肺模型组（P〈0．01）和骨髓间充质干细胞移植组（P〈0．05）高于对照组；骨髓间充质干细胞移植组低于矽肺模型组，差异有显著性意义（P〈0．01）。说明骨髓间充质干细胞移植可以减轻肺部炎症反应和纤维化程度。
- 潘雍杨昆刘永哲
- 关键词：干细胞干细胞移植矽肺肺纤维化小鼠羟脯氨酸
