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产肠毒素大肠埃希菌STa-K99融合蛋白重组腺病毒载体的构建及表达被引量：2: 2013年; 为构建产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)STa-K99融合蛋白重组腺病毒载体Ad STa-K99,通过PCR技术分别克隆了STa及K99基因,并与腺病毒穿梭质粒连接构建了穿梭质粒pAd5 STa-K99,将pAd5STa-K99和骨架质粒(含GFP基因)分别用PacⅠ酶切线性化,利用LipofectamineTM LTX&PLUS共转染293细胞进行同源重组包装重组腺病毒,通过PCR及Western blot对重组腺病毒进行鉴定。结果显示,重组腺病毒Ad5STa-K99构建正确并表达融合蛋白,且表达的融合蛋白能够被抗体所识别,为研制由ETEC引起的新生动物腹泻重组腺病毒载体疫苗奠定了基础。; 邓光存包少文杨继辉曾瑾李武刘晓明; 关键词：黏附素重组腺病毒载体

产气荚膜梭菌β1毒素抗体的间接ELISA方法: 本发明公开了一种产气荚膜梭菌β1毒素抗体间接ELISA检测方法，包括步骤一、产气荚膜梭菌β1毒素抗体的间接ELISA方法的建立，步骤二、结果判定标准的确定。本发明属于病原微生物检测技术领域，具体是提供了一种特异性好、灵敏...; 马臣杰曾瑾马玲玲李勇宋孚洋刘晓明马红梅吴霜马嘉琦王东李文; 文献传递

肺泡上皮细胞减轻巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染中TLR信号介导的炎症反应: 本研究模拟体内肺泡的气液相环境,采用肺脏上皮细胞与巨噬细胞的气液相共培养模型,探讨肺脏上皮细胞对巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染的免疫调节作用.通过建立人肺泡上皮细胞A549与人单核细胞U937分化而来的巨噬细胞的气液相共培养...; 孙颖飞杨易程龙贾元元任奇杰李勇刘晓明王玉炯

经典Wnt信号途径在肺脏上皮细胞抗结核分枝杆菌感染中的作用被引量：3: 2013年; 目的:肺脏上皮细胞在抵抗外源微生物入侵中发挥着重要保护作用,最近研究揭示,在器官组织发育中发挥调控作用的经典Wnt信号具有免疫调节功能。因此,有必要研究肺脏上皮细胞A549中Wnt信号经典途径在抗结核分枝杆菌(Mtb)感染中的免疫调节作用。方法:用牛结核分枝杆菌卡介苗(BCG)刺激转入Wnt信号报告基因质粒BATflash的A549细胞,利用双荧光素酶报告系统、Western blot和ELISA方法分析细胞中Wnt信号经典途径主要相关信号因子和免疫反应炎症因子的表达变化。结果:BCG感染A549细胞后抑制了Wnt信号报告荧光素酶的活性,Western blot结果表明,随着细胞浆内磷酸化β-catenin含量增加,Wnt信号的抑制基因GSK3β和Axin2表达上调,而细胞核中的效应子β-catenin基因活性组分和下游转录因子TCF4与Lef-1的表达下调;BCG感染过表达β-catenin的细胞时导致IL-6、NF-κB、MyD88和TRAF6蛋白表达下调,但不影响TNF-α的表达。结论:肺脏上皮细胞在抗结核分枝杆菌感染过程中通过下调Wnt信号活性而抑制细胞中的MyD88/TRAF6/NF-κB信号通路来降低免疫反应以保护宿主细胞免受感染造成的免疫损伤。; 石娟杨佳丽马凌洁包少文马彦程龙马春燕李勇李勇

猪肺脏气道上皮细胞的形态与结构研究被引量：3: 2013年; 为了研究猪气道上皮细胞的类型和分布的形态学特征,试验采用组织化学染色[苏木精-伊红(H.E.)和高碘酸-希夫(PAS)染色]和免疫组织化学(IHC)染色等方法对猪肺脏大气道各个区段(气管、支气管和细支气管)主要上皮细胞的类型进行形态学观察,并对其组成比例进行统计分析。结果表明:猪肺脏大气道上皮主要由基底细胞、克拉拉细胞、纤毛细胞和杯状细胞等组成,其中不同区段上皮细胞的类型组成比例有所差异;并且这种形态组成特征和人类的肺脏比较接近,而与小鼠肺脏气道上皮细胞形态组成有较大差异。说明猪肺脏比小鼠肺脏更适合用于人类肺脏疾病的研究。; 杨佳丽石娟马凌洁马彦程龙郝秀静曾瑾李勇刘晓明; 关键词：肺脏气道上皮细胞免疫组织化学

血清中sIL‑7R在诊断系统性红斑狼疮肾炎中的应用: 本发明公开了一种血清中sIL‑7R在诊断系统性红斑狼疮肾炎中的应用，其是将血清sIL‑7R蛋白作为标志物来诊断系统性红斑狼疮肾炎的。本发明通过酶联吸附法，荧光定量法通过蛋白，mRNA水平检测系统性红斑狼疮肾炎患者血清中s...; 池淑红刘晓明薛青石娟杨佳丽; 文献传递

不同方法对滩羊卵母细胞孤雌激活及重构胚发育影响的研究: 2015年; 旨在探索宁夏滩羊卵母细胞孤雌激活及胚胎培养条件,并建立转Cherry基因滩羊体细胞重构胚的融合与体外培养体系。试验分析了3种激活方法即电激活、Ionomycin结合6-DMAP与电激活结合6-DMAP对成熟的滩羊卵母细胞激活的影响,以及3种胚胎培养液mSOFaa、M16和KSOM的培养筛选,并优化了滩羊体细胞重构胚的融合与体外培养条件。结果表明:在卵母细胞孤雌激活中,最适电压为1 600V/cm,获得卵裂率和囊胚率分别为58.5%和19.5%;5μmol离子霉素结合2 mmol 6-DMAP能有效地激活成熟的滩羊卵母细胞,卵裂率为81.0%,囊胚率为26.2%;并发现mSOFaa胚胎培养液的卵裂率和囊胚显著优于M16和KSOM培养液;在转基因重构胚融合中发现在电压1 800V/cm、脉冲时间10μs、脉冲次数2次和间隔时间为1s的条件下,卵裂率和囊胚率为40.0%、21.4%。本试验建立的滩羊孤雌激活和转基因重构胚融合与体外培养体系为宁夏滩羊的分子育种奠定了基础。; 李勇李勇程龙孙毅杨易杨易; 关键词：滩羊孤雌激活转基因电融合重构胚

一种用于多种细胞3D互作嵌套培养的实验装置: 本实用新型涉及细胞培养技术领域，尤其是一种用于多种细胞3D互作嵌套培养的实验装置，包括培养皿体，所述培养皿体上方连接有培养皿盖，所述培养皿体内腔底壁固定连接三个呈三角分布的定位管，三个所述定位管上均插接支撑杆，三个所述支...; 刘晓明杨佳丽王玉炯; 文献传递

结核分枝杆菌诱导人巨噬细胞和肺泡上皮细胞SOX基因家族的表达差异研究: 研究人SOX基因家族在结核分枝杆菌感染其靶细胞-人巨噬细胞和肺泡上皮细胞中的表达差异.采用结核分枝杆菌强毒株H37Rv感染人U937单核细胞分化的巨噬细胞和A549肺泡上皮细胞,qRT-PCR检测感染后两种细胞内人SOX...; 贾元元杨易孙颖飞任奇杰李勇刘晓明

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刘晓明