余涛
- 作品数：35 被引量：131H指数：7
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金吴阶平医学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 去甲斑蝥素对裸鼠结肠癌移植瘤血管生成的影响及其机制被引量：10
- 2013年
- 目的观察去甲斑蝥素(NCTD)对人结肠癌裸鼠移植瘤血管生成及瘤体血管内皮细胞生长因子(VEGF)、内皮细胞钙黏蛋白(VE-Cd)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响,以探讨NCTD影响血管生成的可能机制。方法裸鼠皮下移植人结肠癌细胞(HCT116)瘤块建立人结肠癌皮下移植瘤模型,随机分为模型组,NCTD高、中、低剂量组和氟尿嘧啶(5-Fu)组。分别腹腔注射生理盐水、NCTD 8、5、2mg/kg和5-FU 20mg/kg,每周2次,连续给药3周。给药结束后剥取瘤体并称重,常规石蜡包埋、制片,采用免疫组化法分析瘤体内微血管密度(MVD)以及VEGF、VE-Cd、MMP-2等促血管生成因子的表达水平。结果与模型组相比,经NCTD干预的荷瘤裸鼠生长状态基本不受影响,但瘤体生长受到抑制,瘤内微血管密度降低,VEGF、VE-Cd、MMP-2蛋白表达减少,且此效应随剂量增大而增强。结论 NCTD在不影响荷瘤裸鼠生长状态的前提下,对人结肠癌裸鼠皮下移植瘤的生长和瘤内微血管的形成具有抑制作用,其机制跟下调VEGF、VE-Cd、MMP-2等促血管生成因子的表达有关。
- 袁昌劲余涛侯风刚李丹刘礼吕秀玮任丽
- 关键词：去甲斑蝥素结肠癌血管生成基质金属蛋白酶2
- 黄连解毒汤对人细胞色素P450酶6个亚型的体外抑制作用研究被引量：9
- 2012年
- 目的:研究黄连解毒汤对人肝微粒体6个亚型CYP1A2、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4的体外抑制作用。方法:采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定对乙酰氨基酚、6α-羟基紫杉醇、4-羟基双氯芬酸、4-羟基美芬妥英、右啡烷、1-羟基咪达唑仑和6β-羟基睾酮,分别代表CYP1A2、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4的活性;黄连解毒汤提取物和7种混合探针底物在人肝微粒体中共同孵育,并计算其IC50值表示对CYP450酶的抑制程度。结果:在人肝微粒体体外孵育体系中,黄连解毒汤对CYP2D6的IC50值为3.54μg/mL,对CYP1A2的IC50值为10.8μg/mL,对CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP3A4_T和CYP3A4_M亚酶的IC50值依次为67.7、299、530、199和607μg/mL。结论:在正常剂量下,黄连解毒汤对人肝微粒体CYP2D6和1A2可能有抑制作用,对人肝微粒体CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4无明显抑制作用。
- 李丹韩永龙余涛傅瑶孟祥乐余奇郭澄
- 关键词：黄连解毒汤细胞色素P450酶药物相互作用
- 乌苯美司对大肠癌细胞增殖与凋亡影响及其机制探讨被引量：8
- 2014年
- 目的:观察乌苯美司对大肠癌细胞增殖与凋亡的影响,并探讨其可能作用机制。方法:分别用低、中、高浓度乌苯美司(1.0、4.0和8.0μmol/L)处理大肠癌细胞,应用CCK-8检测处理前后细胞增殖情况;应用流式细胞仪检测处理前后大肠癌细胞生长周期及凋亡状态;应用MSP检测处理前后DAPK基因启动子甲基化状态,RT-PCR和蛋白质印迹法检测基因表达的改变。结果:正常大肠癌细胞表现为对数增殖状态,低浓度乌苯美司处理后的大肠癌细胞增殖率为61.23%,中浓度为20.25%,高浓度为7.97%,细胞增殖速度与乌苯美司浓度呈负相关;并且经乌苯美司处理后的大肠癌细胞传代5、10和15代的增殖速度均低于正常未处理细胞。对照组大肠癌细胞吸光度值为0.554 2±0.01,低浓度组为0.359 4±0.217,中浓度组为0.153 4±0.013,高浓度组为0.091 8±0.004,吸光度值组间差异有统计学意义,P<0.001;各组与对照组相比差异亦有统计学意义,P<0.001。而细胞凋亡率依次增高,正常组大肠癌细胞凋亡率为1.53%,低浓度组为24.33%,中浓度组为35.74%,高浓度组为46.27%,差异有统计学意义,F=9.18,P=0.025。正常大肠癌细胞DAPK基因启动子呈甲基化状态,mRNA和蛋白质表达缺失,经低、中、高浓度乌苯美司处理后,DAPK基因启动子被逆转成去甲基化状态,mRNA和蛋白质恢复表达,表达量与乌苯美司浓度正相关,处理的大肠癌细胞传代后仍可检测到DAPK基因mRNA表达。结论:乌苯美司可抑制大肠癌细胞增殖,并促进其凋亡,其作用机制可能与调整DAPK基因启动子甲基化状态有关。
- 袁昌劲黄晓东余涛孔庆志
- 关键词：肠肿瘤乌苯美司死亡相关蛋白激酶细胞增殖流式细胞术
- 体外肝代谢模型的优缺点及其应用被引量：8
- 2011年
- 在所有参与药物生物转化的器官中,肝脏是最主要的场所。药物在肝脏或者肝外的代谢是药物消除的一种主要方式。由于药物在肝脏的代谢直接与其药理活性和毒性特征相关,进而影响药物在临床上的安全性和有效性,因此药物在肝脏的代谢是临床前新药研发过程中的一个非常重要的环节。近年来,相对于整体模型来说,体外研究模型以其快速、准确、高通量的优势在药物的肝脏生物转化研究中被药物研发的科学工作者广泛使用。目前常用的体外研究模型包括重组酶、微粒体、胞质溶胶、肝脏S9(S9)、细胞株、转基因细胞株、原代肝细胞、干细胞诱导分化的肝细胞、精密肝切片和肝脏灌流。笔者将对这些方法进行详细的概述,并对各自的优缺点进行比较并阐述其具体应用方向,方便研究人员选择合适可行的代谢模型,研究药物在肝脏中可能的生物转化模式,最终对药物在人体内的消除方式作出科学的预测。
- 李丹韩永龙余涛孟祥乐余奇王军郭澄
- 去甲斑蝥素对人脐静脉内皮细胞迁移、黏附、管腔形成能力及血管内皮生长因子受体、内皮细胞钙黏着蛋白表达的影响被引量：11
- 2012年
- 去甲斑蝥素（norcantharidin，NCTD）作为我国自行研发的抗癌药物已在临床应用多年，其抗癌活性强，不良反应小，靶点多。肿瘤生长和转移依赖于肿瘤血管生成，肿瘤血管的生成是一个多因素参与的复杂过程，促血管生成因子的释放和活化在该过程中起重要作用。
- 余涛刘曼曼李丹刘见荣余清清侯风刚李琦
- 关键词：去甲斑蝥素细胞迁移细胞黏附管腔形成
- 人CYP39A1基因过表达慢病毒载体构建及其在HepG2中表达
- 2021年
- [目的]构建人CYP39A1基因过表达慢病毒载体,并建立CYP39A1基因过表达的HepG2细胞株,为研究CYP39A1在肝细胞肝癌中的作用机制奠定基础。[方法]构建具有嘌呤霉素抗性的CYP39A1慢病毒载体,经酶切鉴定及DNA测序鉴定后,包装成重组慢病毒颗粒;用嘌呤霉素筛选获得CYP39A1过表达的HepG2稳转细胞,采用qPCR和Western Blot检测CYP39A1的mRNA和蛋白相对表达量。[结果]成功扩增CYP39A1基因片段,大小为1451 bp。确定嘌呤霉素在HepG2中的最佳筛选浓度为2.0μg/mL,目的基因CYP39A1被慢病毒成功导入HepG2细胞中,荧光显微镜下能直接观察到EGFP。成功构建CYP39A1过表达及其阴性对照病毒,CYP39A1过表达病毒滴度为1.0×10^(9) TU/mL,阴性对照病毒的滴度为3.0×10^(8) TU/mL。转染CYP39A1过表达组和阴性对照组的qPCR实验结果显示:在HepG2细胞中,过表达组的CYP39A1的mRNA表达量为阴性对照组的516.55±85.24倍(P<0.001)。Western Blot也显示有Flag-CYP39A1的蛋白过表达。[结论]成功构建CYP39A1过表达的HepG2稳转细胞株,且CYP39A1的过表达组mRNA和蛋白均有上调。可为进一步探讨CYP39A1基因在肝细胞肝癌发生发展中的作用提供工具。
- 李丹余涛徐庆雪封时张旭张勇刚曾智
- 关键词：HEPG2细胞肝细胞肝癌
- 薏苡仁油对HCT116细胞血管生成拟态形成的影响及机制被引量：5
- 2016年
- 目的观察薏苡仁油(CLSO)对人结肠癌HCT116细胞血管生成拟态形成能力的影响,并观察CLSO对细胞迁移能力和迁移诱导蛋白-7(Mig-7)表达水平的影响,藉此探讨CLSO影响血管生成拟态形成的可能机制。方法 MTT法检测CLSO对HCT116的无毒浓度(增殖抑制率<10%时的浓度),选取无毒浓度以下不同浓度的CLSO作用于三维培养的HCT116细胞,观察其对HCT116细胞形成血管生成拟态的影响;并用划痕实验观察各组细胞的迁移能力,蛋白印迹法检测各组中Mig-7蛋白的表达水平。结果体外三维培养环境下,经CLSO作用的HCT116细胞形成血管生成拟态的结构比对照组减少。划痕实验中对照组、CLSO 5和10μL/mL浓度组的平均迁移距离依次缩小,迁移率分别为17.07%、9.19%、2.10%,2个实验组和对照组相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。蛋白印迹法检测显示经不同浓度CLSO作用于HCT116细胞后实验组条带灰度值/内参条带灰度值的比值比对照组小,Mig-7蛋白表达受到抑制,其中10μL/mL浓度组的抑制作用比5μL/mL组更明显,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论CLSO体外对HCT116形成血管生成拟态的能力存在抑制,其机制可能与下调Mig-7蛋白表达,从而影响细胞的迁移能力有关。
- 余涛刘礼吕秀玮贺文煜袁昌劲
- 关键词：薏苡仁油结肠癌血管生成拟态细胞迁移
- 去甲斑蝥素抗肿瘤分子机制研究进展被引量：7
- 2012年
- 去甲斑蝥素(Norcantharidin,NCTD)具有综合性抗肿瘤作用机制,它可以通过调控细胞周期,抑制DNA复制来抑制肿瘤细胞增殖;激活线粒体途径,调整促凋亡和抗凋亡基因及蛋白的比例诱导肿瘤细胞发生凋亡;还能影响细胞的黏附和运动能力,减少胞外基质降解从而抑制肿瘤细胞的侵袭和转移;通过减小促血管生成因子和抗血管生成因子的比例,影响内皮细胞的功能来抑制肿瘤血管的生成;并能影响肿瘤细胞多种信号转导通路,这几个方面共同作用达到抗肿瘤效果。
- 余涛刘曼曼侯风刚李丹李琦
- 关键词：去甲斑蝥素药理抗肿瘤
- 大肠癌中医辨证分型研究进展被引量：4
- 2012年
- 回顾了近年来大肠癌中医病因病机及辨证分型方面的研究进展,应统一中医证型及其标准,加强对大肠癌四诊客观化的相关研究尤为重要。
- 刘曼曼余涛陈旻侯风刚
- 关键词：大肠癌中医辨证分型
- 基于Oncomine和TCGA数据库分析SLC2A1基因在肺腺癌中的表达意义被引量：5
- 2019年
- 目的阐明SLC2A1基因在肺腺癌中的表达及临床意义。方法通过检索Oncomine和TCGA等生物信息数据库中有关SLC2A1的信息,并对所获取的数据资料挖掘并进行二次分析,对SLC2A1在肺腺癌中的作用进行荟萃分析。结果 Oncomine数据库中共收集了448项不同类型SLC2A1的研究结果,关于在肿瘤与对照组织中SLC2A1表达有统计学差异的结果有47项,其中SLC2A1表达增高的有43项,表达降低的有4项。肺腺癌中高表达的研究有8项、低表达的有0项。共有8项研究数据集涉及SLC2A1在肺腺癌组织和正常组织中的表达,包括786例样本。在数据库中综合比较这8项研究成果,发现与对照组相比,SLC2A1在肺腺癌中的表达高于正常组织(P<0.05)。另外,免疫组织化学显示SLC2A1在肺腺癌组织中表达较强或中等,而在正常组织中表达较弱或呈阴性。TCGA数据库中挖掘的结果也同样显示高表达SLC2A1的患者总体死亡率较高,低表达SLC2A1的患者预后较好(P<0.05)。结论基于公共数据库中肿瘤相关的基因信息,提示SLC2A1的m RNA水平在肺腺癌组织中呈现高表达,并与肺腺癌预后相关,其有望成为肺腺癌药物治疗的重要治疗靶点。
- 李丹余涛曾智吴杰叶鹏
- 关键词：肺腺癌
