于瑾
- 作品数：10 被引量：9H指数：2
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- HPV_(16)L1-E7重组病毒及其重组质粒免疫后小鼠抗体水平动态变化的研究
- 2003年
- 目的 :研究人乳头瘤病毒 16型L1 E7重组腺病毒 (rAd5HPV16 L1 E7virus)及其重组质粒 (rAd5HPV16 L1 E7plasmid)经不同途径免疫后小鼠抗体水平的动态变化。方法 :用 2 93细胞扩增rAd5HPV16 L1 E7重组病毒 ,同时制备rAd5HPV16 L1 E7重组质粒 ,分别以肌肉注射、腹腔注射、滴鼻和灌胃途径免疫小鼠 ,采用ELISA法测定其血清IgG抗体水平。结果 :rAd5HPV16 L1 E7重组病毒及其重组质粒采用不同途径免疫的BALB/c小鼠血清IgG抗体水平均高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,其中以肌注组产生抗体量最多 ,并且出现最早。结论 :rAd5HPV16 L1 E7重组病毒及其重组质粒均能刺激B细胞产生抗体介导的免疫应答 ,免疫途径不同 ,抗体峰值的出现时间亦不同 ,测定抗体的最佳时间亦不同。
- 宋长芹孙洪涛于修平栾怡卞继峰赵蔚明贾继辉周亚滨于瑾齐眉
- 关键词：人乳头状瘤病毒小鼠近交BALBC抗独特型抗体
- HPV16L1-E7重组腺病毒在SCID-Hu IC小鼠和HPV16阳性肿瘤联合嵌合小鼠中防治作用的研究被引量：2
- 2003年
- 目的 建立SCID HuIC小鼠动物模型和HPV16阳性肿瘤联合嵌合模型 ,研究HPV16L1 E7重组腺病毒在SCID HuIC小鼠和肿瘤联合嵌合模型中的防治作用。方法 ①实验组SCID小鼠移植人胎儿多组织 ,对照组注射RPMI 16 4 0培养液 ,8周末检测人IgG抗体 ,人CD4 5、CD3、CD19;②T1和C1组先注射HPV16L1 E7重组腺病毒 ,2周末强化 ,4周末接种CaSki细胞 ;T2和C2组先接种CaSki细胞 ,4周末注射HPV16L1 E7重组腺病毒 ,6周末强化。 8周末检测病毒特异性IgG抗体、人IFN γ及T淋巴细胞增殖 ,测定肿瘤的物理指标以及免疫组化实验。结果 ①实验组人IgG抗体阳性率 90 .0 % (18/ 2 0 ) ,CD4 5为 (49.79± 39.18) % ;CD3为 (42 .2 7± 36 .37) % ;CD19为 (9.2 8±7.4 6 ) % ,对照组人IgG抗体、人CD4 5、CD3及CD19均为阴性 ;②T1和T2组病毒特异性IgG抗体均为阳性、人IFN γ的含量和T淋巴细胞增殖实验 ,病毒特异性蛋白刺激组均高于非刺激组 (P <0 .0 5 ) ,C1和C2组病毒特异性IgG抗体为阴性、人IFN γ的含量及T淋巴细胞增殖均为阴性 ;肿瘤形成率 :T1和T2组分别为 0和 70 .0 % (7/ 10 ) ,而C1和C2组均为 10 0 % ;肿瘤大小 :T2组在 4周末时为 (4.35 5±0 .387)mm3 ,8周末为 (10 2 8± 90 .96 )mm3 ,C2组在 4周末时为 (32 .75± 6 .717)
- 宋长芹于瑾栾怡卞继峰马道新赵蔚明贾继辉周亚滨齐眉王大燕于修平
- 关键词：重组腺病毒
- 干扰素诱导蛋白IFI16与HPV16E6、E7蛋白相互作用的研究被引量：2
- 2004年
- 目的:研究人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus熏HPV)16型E6、E7蛋白与干扰素诱导蛋白IFI16的相互作用,初步揭示IFI16拮抗HPV16E6、E7致瘤活性的分子机制。方法:(1)体外GST阻滞分析:克隆、表达及纯化GST鄄HPV16E6和GST鄄HPV16E7融合蛋白,将含有IFI16蛋白的EB病毒阴性伯基特淋巴瘤穴BJAB雪细胞提取物与上述纯化蛋白孵育,通过WesternBlotting分析蛋白质的体外相互作用;(2)免疫共沉淀分析:构建表达His鄄HPV16E6蛋白的真核表达载体,将表达有IFI16和His鄄HPV16E6蛋白的293T细胞裂解物与抗His抗体孵育,用IFI16抗体检测共沉淀蛋白复合物中IFI16蛋白的存在;将表达有IFI16和HPV16E7蛋白的CaSki和SiHa细胞裂解物与HPV16E7抗体孵育,检测共沉淀蛋白复合物中E7与IFI16是否结合。结果:成功构建了原核表达质粒pGEX鄄4T/HPV16E6及pGEX鄄4T/HPV16E7,并表达、纯化获得GST鄄HPV16E6及GST鄄HPV16E7融合蛋白。体外GST阻滞分析结果表明,用IFI16单抗做WesternBlotting分析可检测到复合物中IFI16蛋白,表明GST鄄HPV16E6和GST鄄HPV16E7均可与IFI16蛋白结合。免疫共沉淀分析进一步证实,共沉淀蛋白复合物中也可检测到IFI16蛋白,证明在细胞中HPV16E6和E7蛋白也能与IFI16蛋白结合。结论:无论在体外还是在细胞中,抑瘤因子IFI16蛋白均能特?
- 于瑾赵蔚明齐眉宋长芹赵丽刘传聚Peter Lengyel于修平
- 关键词：干扰素诱导剂E6蛋白E7蛋白
- HPV_(16)L1-E7重组腺病毒载体疫苗免疫BALB/c小鼠的研究被引量：2
- 2002年
- 目的:探讨人乳头瘤病毒16型L1-E7重组腺病毒载体疫苗的免疫效应。方法:①将rAd5HPV16L1-E7载体疫苗在293细胞中扩增后,以肌肉注射、腹腔注射、滴鼻和灌胃途径免疫小鼠,采用ELISA法测其血清IgG抗体水平;②制备脾细胞悬液,加入到96孔无菌培养板中,并分别加入rAd5HPV16L1-E7特异性蛋白和RPMI1640+10%胎牛血清,加入3H-TdR1μCi/孔,做T-细胞增殖实验;③取经过培养56h的培养液进行IFN-γ的测定。结果:不同途径免疫的BALB/c小鼠血清IgG抗体水平均高于对照组(P<0.05),但以肌注组产生抗体量最多,IFN-γ和T-细胞增殖亦高于对照组(P<0.05)。结论:rAd5HPV16L1-E7重组活病毒疫苗既能刺激T-细胞产生细胞介导的免疫应答,又能刺激B-细胞产生抗体介导的免疫应答,说明其具有很好的免疫原性。
- 宋长芹于修平栾怡卞继峰赵蔚明贾继辉李勇周亚滨于瑾齐眉宋静王津秋阎淑芳
- 关键词：重组腺病毒载体疫苗BALB/C小鼠抗独特型抗体
- 融合蛋白弓形虫主要表面抗原P30-CTXA2/B在大肠杆菌中的表达
- 2002年
- 目的 :克隆并表达含有刚地弓形虫主要表面抗原P30及霍乱毒素A2 /B亚基基因的原核表达载体 ,为弓形虫疫苗的研究奠定基础。方法 :通过PCR方法扩增出P30基因片段 ,将其克隆入含有霍乱毒素A2 /B亚基基因的表达质粒pUAB0 2 4 ,在大肠杆菌JM10 9(DE3)中表达融合蛋白。行SDS PAGE电泳及West ernblotting检测鉴定。结果 :酶切电泳证明质粒构建正确。SDS PAGE显示IPTG诱导可以产生特异性条带。Westernblotting进一步证实该条带为p30 CTA2 /B融合蛋白。结论 :成功构建的表达载体pUAB0 2 4 p30可有效表达特异性的融合抗原蛋白P30 CTA2 /B。
- 古钦民于瑾王伟卞继峰何深一周怀瑜李瑛赵群力丛华
- 关键词：弓形虫属霍乱毒素大肠杆菌
- 融合蛋白p30-CTA2B在大肠杆菌中的表达
- 目的:弓形体病是最常见的人兽共患病之一,此外,它在HIV患者以及接受器官移植的患者等免疫功能低下的人群中有较高的发病率。对于弓形体病,目前尚无有效的治疗方法。因此,弓形体疫苗的研究成为预防及治疗弓形体病重要的发展方向。本...
- 于瑾古钦民王伟卞继峰
- 文献传递
- 用含霍乱毒素A_2/B的载体在大肠杆菌中表达弓形虫主要表面抗原P30被引量：3
- 2003年
- 目的 克隆并表达含有弓形虫P30抗原及霍乱毒素A2 /B亚基基因的原核表达载体 ,为弓形虫疫苗的研究奠定基础。方法 应用PCR方法扩增出P30基因片段后 ,克隆入含有霍乱毒素A2 /B亚基基因的表达质粒pUAB0 2 4 ,在大肠杆菌JM10 9(DE3)中表达融合蛋白。通过SDS -PAGE电泳及Westernblotting进行检测鉴定。 结果 电泳证明质粒构建正确 ,SDS -PAGE显示经IPTG诱导可以产生特异性条带 ,Westernblotting进一步证实该条带为P30 -CTA2 /B融合蛋白。结论 表达载体pUAB0 2 4 -P30可有效表达特异性的融合弓形虫抗原蛋白P30 -CTA2 B。
- 于瑾古钦民李瑛何深一王伟卞继峰周怀瑜赵群力丛华
- 关键词：霍乱毒素弓形虫表面抗原P30
- 人乳头瘤病毒致癌机制和新型疫苗研究
- 于修平卞继峰赵蔚明栾怡周亚滨齐眉宋长芹于瑾耿昭卢翌程轶喆唐伟
- 课题详细研究了中国妇女宫颈癌中乳头瘤病毒感染、病毒和宿主细胞基因突变、蛋白质表达的相关性，及E6蛋白与p53蛋白家族成员p53/p63/p73分子间的作用关系。在克隆表达了乳头瘤病毒的关键基因、并定位其B细胞表位基础上，...
- 关键词：
- 关键词：人乳头瘤病毒致癌机制疫苗
- 一种新型双启动子DNA疫苗载体的构建及在人乳头瘤病毒新型疫苗研究中应用
- 目的:DNA疫苗或者称为基因免疫被称为疫苗研究中继死疫苗、减毒活疫苗之后的的第三次革命,最近病原体疫苗研究中的两个重大进展均是基于DNA疫苗,即Ebola病毒和HIV病毒DNA疫苗的应用研究已经取得了令人鼓舞的研究成果,...
- 卞继峰于修平赵蔚明杨海宁于瑾耿昭张茂修
- 关键词：人乳头瘤病毒DNA疫苗双启动子
- 文献传递
- 滴鼻接种HPV16 L1-E7 DNA初始引发及HPV16 L1 VLP强化免疫可增强小鼠黏膜和细胞免疫
- 2006年
- 目的探讨HPV16 L1-E7 DNA疫苗初始引发及HPV16L1病毒样颗粒(VLP)强化接种小鼠诱发免疫反应的效应,为进一步用于HPV16相关恶性肿瘤的防治提供实验依据。方法以HPV16 L1-E7嵌合蛋白、HPV16 L1 VLP以及HPV16 L1-E7 DNA单独或联合滴鼻免疫雌性BALB/c小鼠,连续使用3周。免疫后采血及收集阴道分泌物,检测特异性抗体。在末次免疫2周后,取小鼠脾细胞,用HPV 16 L1-E7蛋白刺激,检测T细胞增殖反应及IFN-γ水平。结果HPV16 L1-E7嵌合蛋白滴鼻接种可诱导小鼠产生血清HPV16 L1特异性IgG,强化免疫后抗体水平明显增高(P<0.01);阴道局部产生HPV16 L1特异性IgA;在HPV16 L1-E7抗原刺激下,脾细胞上清液中IFN-γ水平升高。HPV16 L1-E7 DNA疫苗初始引发和HPV16 L1蛋白加强免疫可增高阴道分泌液中HPV16 L1特异性IgA水平,增高脾淋巴细胞中特异性T细胞产生IFN-γ的水平。结论嵌合病毒样颗粒HPV16 L1-E7和HPV16 L1-E7 DNA疫苗初始引发及HPV16 L1蛋白强化滴鼻接种适用于预防HPV原发性黏膜感染和治疗HPV16相关肿瘤。
- 栾怡于修平赵蔚明于瑾杨宁唐伟
- 关键词：乳头瘤病毒
