黄钦耿
- 作品数：32 被引量：54H指数：4
- 供职机构：福建师范大学更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程农业科学更多>>
- 丙氨酸转氨酶修饰对大肠杆菌L-色氨酸合成的影响
- 2020年
- 探究大肠杆菌细胞内负责L-丙氨酸合成的转氨酶对菌株代谢及L-色氨酸合成的影响。运用Red重组技术分别对编码L-丙氨酸转氨酶的基因alaA、alaC和avtA进行敲除。通过摇瓶和50 L罐中探究其对L-色氨酸积累、L-丙氨酸代谢及菌体生长变化情况。结果显示,除3种L-丙氨酸转氨酶全部缺失的工程菌L-丙氨酸合成受阻、菌体生长受到较强抑制外,其它各任意一种或两种丙氨酸转氨酶缺失菌株的生长并未有较大差异,但色氨酸的合成变化显著。其中alaA和alaC双基因缺失的E.coli FS-T4工程菌,摇瓶发酵L-色氨酸产量达6.08 g/L,L-丙氨酸含量仅0.16 g/L,较出发菌株分别提高了26.7%和降低了91.0%。在50 L罐中E.coli FS-T4工程菌L-色氨酸产量最高可达41.9 g/L,糖酸转化率达20.5%,分别较出发菌株提高了13.8%和5.1%。转氨酶AlaA和AlaC的同时缺失,既可以满足细胞整体氨基酸池的需要,而且有利于减少杂酸的积累,使得更多的碳源流向L-色氨酸的合成。
- 孟帅帅黄钦耿吴松刚刘峰
- 关键词：L-色氨酸L-丙氨酸
- 大肠杆菌ptsG基因的敲除及其对phe生产的影响
- L-phe是重要的食品和医药中间体，利用大肠杆菌发酵葡萄糖生成phe时，对葡糖糖转运起重要作用的磷酸烯醇丙酮酸糖磷酸转移酶系统(PTS)对phe产量合成有很大影响，在大肠杆菌PTS系统中，葡糖糖主要由ptsG基因编码的葡...
- 吴伟斌黄钦耿施巧琴吴松刚
- 关键词：大肠杆菌L-苯丙氨酸基因敲除
- 一种富硒地顶孢霉菌株及其应用
- 本发明公开了一种富硒地顶孢霉菌株及其应用。本发明提供的地顶孢霉FA1603，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO：M2016331。本发明还保护一种地顶孢霉培养物和培养地顶孢霉FA1603的方法。地顶孢...
- 黄钦耿黄建忠蒋顺进方文棋吴松刚
- 文献传递
- 森林红壤微生物的功能生态学分析及宏基因组文库构建
- 经济适用的木质纤维素水解工艺是实现纤维素乙醇商品化的关键环节。研究土壤中多样性的木质纤维素分解微生物及其酶基因资源，将为开发新型木质纤维素水解酶系奠定基础。本文通过对一系列不同环境不同来源的森林土壤的理化及生物酶活性分析...
- 黄钦耿
- 关键词：红壤微生物RFLP分析分子系统进化宏基因组文库
- 文献传递
- 一种产多糖、腺苷和虫草素的融合菌株
- 本发明公开了一种产多糖、腺苷和虫草素的融合菌株。本发明公开的融合菌株为将蛹虫草菌与羊肚菌进行融合筛选得到融合菌株，得到的融合菌株具有以下特征：与蛹虫草菌和羊肚菌相比，融合菌株的生物量均增加，融合菌株的产物种类和产物产量也...
- 黄钦耿黄建忠梁玲骆梅香翁雪清陈瑞琛吴松刚
- 文献传递
- 西双版纳地区热带雨林土壤酸杆菌(Acidobacteria)群体结构和多样性分析被引量：28
- 2010年
- 酸杆菌(Acidobacteria)广泛存在于自然界,在许多生态系统中发挥重要作用。本文以西双版纳热带森林的土壤为研究对象,提取土壤的总基因组DNA为模板,采用特异引物扩增酸杆菌16SrRNA基因,构建酸杆菌门细菌16SrRNA基因克隆文库,利用限制性片段长度多态性(RFLP)对随机克隆进行筛选、测序,对该生态环境下酸杆菌菌群种类和组成进行了系统发育分析。结果表明该地区热带森林土壤的酸杆菌有5个类群:分别为Gp1、Gp2、Gp3、Gp5和1个未知分类的酸杆菌种。其中Gp1是该土壤环境下酸杆菌门的绝对优势菌群,约占整个酸杆菌群的50%-80%,其次是Gp2,占12%-25%,不同采样点酸杆菌类群的分布趋势是一致的。研究表明西双版纳热带森林土壤中的酸杆菌类群具有适应其土壤环境的广泛的多样性。
- 王春香田宝玉吕睿瑞林伟铃徐燕黄钦耿黄建忠
- 关键词：热带森林红壤RFLP分析生态多样性
- 基因敲除策略在氨基酸产生菌代谢工程中的应用
- 微生物基因敲除技术是遗传工程研究的重大飞跃之一。它为定向改造细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等氨基酸生产菌、培育微生物新品种提供了重要的技术支持。随着大量模式生物及重要功能微生物全基因组的解明以及功能基因的定位，人们从基因水平...
- 黄钦耿施巧琴吴松刚
- 关键词：微生物细胞代谢工程基因敲除技术
- 黄色短杆菌ilvN基因定点突变和ilvBN、ilvC串联表达对L-缬氨酸产量的影响被引量：1
- 2016年
- 由ilv BN、ilv C基因编码的乙酰羟酸合成酶(AHAS)和乙酰羟酸异构还原酶(AHAIR)是L-缬氨酸合成途径的两个关键酶。本实验以黄色短杆菌Brevibacterium flavum MD515为出发菌株,通过PCR技术扩增其ilv BN和ilv C基因,对调节亚基ilv N进行定点突变,获得抗反馈抑制突变型编码基因ilv BNrC;然后将其插入穿梭表达载体p Z8-1中,构建串联表达质粒p Z8-1-ilv BNrC并转化出发菌株,筛选获得工程菌株B.flavum MD515/p Z8-1-ilv BNrC。摇瓶发酵该工程菌株L-缬氨酸产量达29.5 g·L-1,较出发菌株提高27.7%,同时生长速度和生物量也比出发菌株有所提高,丙氨酸含量降低,L-亮氨酸及L-异亮氨酸含量提高。在30 L发酵罐连续补料发酵60 h后L-缬氨酸产量达61.7 g·L-1,糖酸转化率为39.2%。菌株MD515/p Z8-1-ilv BNrC发酵液透光率较出发菌株高且蛋白含量低,这些特性有利于发酵液后期的分离提取。
- 曾邦定黄钦耿梁玲郭小雷王明兹施巧琴吴松刚
- 关键词：L-缬氨酸定点突变共表达
- 木聚糖酶高产菌株的鉴定及产酶条件的优化被引量：3
- 2009年
- 目的:通过了解木聚糖酶高产菌株A79的遗传背景,并优化其产木聚糖酶的液体发酵条件,为下一步工业化生产和木聚糖酶制剂的研制奠定基础。方法:通过形态观察和18S rDNA基因的分子系统进化分析,对菌株A79进行鉴定;通过单因素和均匀设计试验,优化其产胞外木聚糖酶的液体发酵条件。结果:通过对18S rDNA基因的分子系统进化分析,菌株A79被鉴定为黑曲霉(Aspergillus nigerA79)。其最佳产酶培养基为:玉米芯5.0%,麸皮0.5%,纤维物质1.0%,玉米浆1.1%,(NH4)2SO40.8%,蛋白胨0.8%,CaCO30.5%,KH2PO40.23%,MgSO4.7H2O 0.08%,微量元素(Mandels)0.08%,pH自然。最佳发酵条件为:接种量5%(2.0×107),28℃2、50r/min振荡培养96h。结论:经优化培养,酶活力由前期的50 000u/ml提高到90 000u/ml,增加了近50%。
- 徐燕田宝玉江贤章黄钦耿王春香黄建忠
- 关键词：木聚糖酶系统进化分析产酶条件
- 一株高产L‑亮氨酸工程菌及其应用
- 本发明公开了一株高产L‑亮氨酸工程菌及其应用。本发明提供了制备重组菌的方法，包括如下步骤：包括如下步骤：将α‑异丙基苹果酸合成酶突变体编码基因导入目的菌中，得到重组菌；所述α‑异丙基苹果酸合成酶突变体为将α‑异丙基苹果酸...
- 黄钦耿黄建忠梁玲翁雪清吴伟斌黄祥峰施巧琴吴松刚
- 文献传递
