魏晓芳
- 作品数：9 被引量：30H指数：4
- 供职机构：青岛大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省医药卫生科技发展计划项目山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 非小细胞性肺癌病人相关细胞因子的表达被引量：8
- 2008年
- 目的探讨非小细胞性肺癌(NSCLC)病人局部微环境中免疫反应特点及其对抗肿瘤免疫的影响。方法以5例结核性胸膜炎病人作为对照,采用地高辛末端标记的寡核苷酸探针,以原位杂交技术检测了23例NSCLC病人的新鲜胸腔积液和(或)手术切除标本淋巴细胞和肿瘤细胞中IL-2、INF-γ、IL-4、IL-10、TGF-β1、IL-1、IL-3I、L-8、GM-CSF、TNF-α及TGF-αmRNA的表达。结果病人胸腔积液的单个核细胞及肿瘤组织中,IL-4、IL-10、TGF-α和TGF-β1 mRNA的表达水平明显高于IL-2I、L-12、IL-18、INF-γ;而结核性胸腔积液的单个核细胞中上述细胞因子的水平均降低,并且各细胞因子的表达水平之间没有明显的差异。结论NSCLC病人胸腔积液的单个核细胞及肿瘤组织中,Ⅱ型细胞因子和免疫抑制细胞因子mRNA的表达占主导地位,反映了肿瘤局部的免疫微环境处于抑制状态。上述结果有助于了解肿瘤逃逸的机制,并为制定NSCLC免疫治疗的方案提供了重要的实验依据。
- 刘瑞贞徐珞魏晓芳
- 关键词：细胞因子类原位杂交
- Ghrelin在情感中枢与胃功能调控作用研究
- 目的:/(1/)研究ghrelin在海马CA1区对胃运动的影响及机制;/(2/)阐明ghrelin对胃窦平滑肌细胞钙依赖性钾通道开放的影响和机制;/(3/)观察海马内外源性ghrlein对大鼠学习记忆的影响。
...
- 魏晓芳
- 关键词：GHRELIN海马胃运动学习记忆NOS
- 文献传递
- 海马Ghrelin对大鼠学习记忆的影响及机制研究被引量：5
- 2008年
- 目的探讨海马Ghrelin对大鼠学习记忆能力的影响及机制。方法采用海马CAl区微量注射Ghrelin及一氧化氮合酶（NOS）抑制剂等，利用跳台实验及Morris水迷宫进行定位航行实验和空间搜索实验，观察海马Ghrelin对大鼠学习记忆的影响并分析可能机制。结果海马CA1区注射Ghrelin可明显增加大鼠学习记忆能力，表现为跳台实验中大鼠从安全台跳下的潜伏期明显延长[（5．3±1．7）minVS（3．5±1．6）min，t=2．44，P〈0．05]，5min内大鼠遭受电击次数明显减少[（0．8±0．7）次VS（1．9±1．0）次，t=2．85，P〈0．05]，Morris水迷宫实验中大鼠找到平台的潜伏期明显缩短[（10．6±3．6）minVS（17．2±6．1）min，t=2．95，P〈0，01]，但海马CA1区注射Ghrelin受体阻断剂[D—Lys（3）]-GHRP-6可明显消除上述Ghrelin促进大鼠学习记忆的作用[潜伏期（3．5±1．7）minVS（4．9±1．2）min，t=2．13，P〈0．05]；注射NOS抑制剂L—NAME可明显减弱Ghrelin促进大鼠学习记忆能力[潜伏期（3．4±1．5）minVS（4．9±1．2）min，t=2．47，P〈0．05]；而海马CA1区注射Ghrelin抗血清可明显减弱大鼠认知作用，表现为跳台实验中大鼠从安全台跳下的潜伏期明显缩短[（1．8±1．4）minVS（3．5±1．6）min，t=2．53，P〈0．05]，5rain内大鼠遭受电击次数明显增加[（3．2±0．9）次VS（1．9±1．0）次，t=3．06，P〈0．01]，Morris水迷宫实验中大鼠找到平台的潜伏期明显延长[（25．8±7．0）rainVS（17．2±6．1）rain，t=2．93，P〈0．01]。结论海马CA1区内外源性Ghrelin均可提高大鼠学习记忆能力，而该作用可能与海马内NO合成有关。
- 魏晓芳徐珞刘晓萍
- 关键词：GHRELIN一氧化氮合酶跳台实验MORRIS水迷宫实验学习记忆
- 瑞香狼毒提取液逆转EGFR-TKI耐药肺腺癌H1975细胞的作用及其机制被引量：8
- 2017年
- 目的:探讨瑞香狼毒(stellera chamaejasme L,SCL)乙醇提取液逆转表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKI)耐药肺腺癌H1975细胞的作用及其机制。方法:用MTT法检测SCL、吉非替尼(gefitinib)及两药联用对H1975细胞的抑制率,细胞划痕实验检测药物对H1975细胞迁移的影响,流式细胞术测定药物对细胞凋亡的影响,Western blotting检测不同药物处理后各组肿瘤细胞凋亡相关蛋白Bcl-2及细胞通路关键分子p-EGFR的表达。观察SCL联用gefitinib后裸鼠移植瘤的体积和总生存期(OS),ELISA检测荷瘤裸鼠血清中Bcl-2、p-EGFR含量。结果 :SCL对H1975细胞IC50为(21.35±2.11)mg/ml,gefitinib的IC50为(11.21±1.68)μmol/L。SCL联用gefitinib后H1975细胞抑制率明显高于gefitinib(1μmol/L)和SCL(5 mg/ml)两组单独应用[(49.78±7.09)%vs(8.45±2.57%)、(12.88±3.64)%,均P<0.01],两药联用H1975细胞迁移指数明显低于gefitinib和SCL两组单独应用[(22.4±6.5)%vs(70.3±4.9)%、(67.1±10.5),均P<0.01],流式细胞仪检测显示两药联用细胞凋亡率明显高于两者单用[(51.68±6.56)%vs(9.88±2.71)%、(9.48±2.45)%,均P<0.01],Western blotting检测H1975细胞凋亡相关蛋白发现,联用组可明显降低Bcl-2和p-EGFR的表达(P<0.01)。抑制移植瘤实验显示,联用药组荷瘤小鼠肿瘤生长缓慢,OS明显延长(P<0.01)。结论:SCL可逆转肺腺癌H1975细胞对EGFR-TKI的耐药,其机制可能与降低EGFR的磷酸化、下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达有关,从而为EGFR-TKI耐药肺腺癌治疗提供了新思路。
- 孙伟红刘淑娟唐淑美马学真魏晓芳朱丹妮宋海平
- 关键词：瑞香狼毒吉非替尼表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂肺腺癌
- 胃动素及其前体mRNA在正常人甲状腺和甲状腺肿瘤组织中表达的研究
- 2008年
- 目的探讨胃动素和胃动素前体mRNA基因在正常人甲状腺的表达，比较人甲状腺胃动素前体mRNA基因序列与人小肠胃动素前体mRNA基因序列的异同；观察胃动素活性肽和胃动素前体mRNA在甲状腺肿瘤中的表达，并比较它们在良、恶性甲状腺肿瘤表达的异同及临床意义。方法采用RT-PCR、Southern杂交和分子克隆等技术，克隆并测定人甲状腺和人小肠黏膜内胃动素前体mRNA基因序列；采用荧光免疫组织化学双染技术、Western印迹和即时荧光定量PCR（real-time PCR），观察胃动素和胃动素前体mRNA在正常甲状腺和甲状腺良、恶性肿瘤组织中表达的异同。结果（1）正常人甲状腺组织有胃动素和胃动素前体mRNA的表达，且胃动素和降钙素共表达于同一细胞，即甲状腺C细胞；（2）人甲状腺组织内胃动素前体mRNA基因序列与基因库报道的人小肠胃动素前体mRNA基因序列（BC112314，NCBI，美国）完全相同；（3）免疫荧光组织化学、Western印迹以及real-time PCR结果均显示，正常人甲状腺和甲状腺肿瘤组织内均有胃动素和胃动素前体mRNA的表达，其中甲状腺髓样癌和嗜酸性腺瘤胃动素及其前体mRNA的表达高于正常甲状腺组织（均P〈0．05）；但甲状腺乳头状癌和滤泡癌胃动素和胃动素前体mRNA的表达则明显降低（均P〈0．05）；而结节性甲状腺肿与正常甲状腺组织相比胃动素和胃动素前体mRNA的表达差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论人甲状腺组织有胃动素和胃动素前体mRNA的表达，且胃动素主要表达于甲状腺C细胞；人甲状腺组织胃动素前体mRNA基因序列与人小肠胃动素前体mRNA基因序列完全相同；甲状腺髓样癌和嗜酸性腺瘤内胃动素及其前体mRNA的表达明显增高，而甲状腺乳头状癌和滤泡癌内胃动素及其前体mRNA的表达明显降低。提示胃动素可能通过影响甲状腺滤泡旁细胞的分泌活
- 徐珞钟凤郭菲菲赵文娟孙向荣魏晓芳
- 关键词：甲状腺疾病促胃动素降钙素
- 胃电刺激对大鼠海马胃扩张反应神经元及胃动素和nNOS表达的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:观察胃电刺激(GES)对大鼠海马CA1区胃扩张(GD)相关神经元放电活动的影响及脑内一氧化氮合酶(nNOS)和胃动素(MTL)表达的改变,初步探讨GES的中枢作用机制.方法:选用成年Wistar大鼠58只,采用细胞外记录神经元单位放电方法,记录海马CA1区神经元自发放电活动,根据神经元对胃扩张刺激反应的不同,分为胃扩张兴奋性神经元(GD-E)和胃扩张抑制性神经元(GD-I).观察3组不同参数的胃电刺激(GES-A,GES-B和GES-C)对CA1区内GD-E和GD-I放电频率的影响:GES-A(6 mA,0-3 ms,40 Hz,2 s-on,3 S-off)为标准参数;GES-B的串刺激波宽增至3 ms;GES-C的串刺激频率减少至20 Hz,其他参数均同GES-A.采用放射免疫法检测胃电刺激对大鼠不同脑区MTL含量的影响;并采用免疫荧光组织化学染色方法观察胃电刺激2 h对大鼠海马内nNOS免疫阳性神经元的表达.结果:CA1区记录的87个神经元中有79个神经元(90.8%)对胃扩张刺激(GD,3-5 mL,10-30 s)有反应,其中40个(50.6%)为GD-E神经元,39个(49.4%)为GD-I神经元.GES-A,-B,-C分别兴奋了62.5%,100%和62.3%的GD-E神经元,GES-B对GD-E神经元的作用明显强于GES-C (神经元兴奋率GES-B 100%vs GES-C 62.3%,P<0.05).在GD-I神经元中有63.6%,85.7%和50%的GD-I神经元分别被GES-A,-B和-C所兴奋,其中GES-C的兴奋作用较弱(P=0.041,vs GES-A:P=0.021,vs GES-B).GES-A刺激胃窦部2h,下丘脑(48.93±6.98 fmol/mg vs 96.23±12.93 fmol/mg,P<0.01)、中脑(30.96±4.86 fmol/mg vs 53.17±8.96 fmol/mg,P<0.05)、延脑(46.27±7.83 fmol/mg vs 73.86±9.37 fmol/mg,P<0.05)和海马(32.23±6.51 fmol/mg vs 62.72±10.07 fmol/mg,P<0.05)中MTL免疫反应物(MTL-IR)的含量与假手术对照组相比明显减少,但脑桥内MTL-IR的含量与假手术对照组相比无显著差异;且海马CA1区(16.75±0.91 cells/mm^2 vs 20.46±1.30 cells/mm^2,P<0.05)和CA2-3区(14.91±1.17 cells/mm★★★2 vs 18.73±1.10 cells/mm^2,P<0.05)nNOS免疫阳性神经元表达明显减少.结论:GES可兴奋海马CA1区内胃扩�
- 鹿勇徐珞孙向荣魏晓芳陆江陈建德
- 关键词：胃电刺激胃动素免疫荧光组织化学放射免疫
- 血清肿瘤坏死因子-α和表皮生长因子与肺癌的关系被引量：1
- 2007年
- 目的 探讨血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和表皮生长因子（EGF）与肺癌关系,为肺癌诊断、病情判断提供实验依据。方法 采用放射免疫法检测46例肺癌、35例肺良性疾病和32例健康体检者血清TNF-α和EGF水平。结果 肺癌病人血清TNF-α和EGF水平显著高于肺良性疾病组和健康对照组（F=175.41、106.05,q=16.14～23.34,P〈0.01）,而肺良性疾病组与健康对照组差异无显著性（q=2.53、2.52,P〉0.05）。肺癌转移者比未转移者血清TNF-α和EGF水平更高（t=6.43、9.70,P〈0.01）,肺癌化疗后血清TNF-α和EGF水平明显下降（t=5.39、3.02,P〈0.05）。结论 血清TNF-α和EGF水平可作为肺癌诊断、病情估计、疗效判断的指标之一。
- 刘瑞贞徐珞魏晓芳
- 关键词：肺肿瘤肿瘤坏死因子Α表皮生长因子血清放射免疫测定
- allo-HSCT后淋巴细胞亚群重建与GVHD及感染的相关性
- 2024年
- 目的探讨血液病病人异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后外周血淋巴细胞各亚群的重建规律,以及淋巴细胞各亚群变化与移植后移植物抗宿主病(GVHD)及感染的关系。方法采用流式细胞术,检测32例allo-HSCT病人清髓处理前3 d和移植后14、30、90、180、365、730 d时的淋巴细胞亚群分布情况,并分析病人GVHD以及感染与淋巴细胞各亚群变化的关系。结果与移植前比较,血液病病人移植后总淋巴细胞、CD3^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、CD16^(+)CD56^(+)NK细胞、CD19^(+)B细胞重建的速度不同,其中NK细胞恢复最快,不到30 d就恢复至移植前水平;其次为CD8^(+)T细胞,约30 d恢复至移植前水平;CD3^(+)T细胞在移植后60 d基本可以达到移植前水平;而B细胞以及CD4^(+)T细胞恢复较慢,B细胞约360 d恢复至移植前水平,CD4^(+)T细胞在移植后730 d仍未恢复到移植前水平。移植后第90天,发生急性移植物抗宿主病(aGVHD)病人5例,其CD3^(+)T细胞(t’=3.334,P<0.05)、CD4^(+)T细胞(t=3.836,P<0.05)和CD16^(+)CD56^(+)NK细胞(t=3.300,P<0.05)绝对计数均低于非急性移植物抗宿主病(non-aGVHD)组,差异有统计学意义。移植后第365天,发生慢性移植物抗宿主病(cGVHD)病人17例,其CD4^(+)T细胞计数低于非慢性移植物抗宿主病(non-cGVHD)组,差异有统计学意义(t=2.918,P<0.05)。与无感染组(n=5)比较,移植后第180天病毒感染组(n=6)淋巴细胞(t=2.441,P<0.05)、CD4^(+)T细胞(t=3.513,P<0.05)、NK细胞(t=3.728,P<0.05)、B细胞(t=2.937,P<0.05)降低;细菌感染组(n=8)淋巴细胞(t=2.535,P<0.05)、CD4^(+)T细胞(t’=6.726,P<0.05)降低,CD8^(+)T细胞升高(t’=-2.945,P<0.05);真菌感染组(n=4)CD4^(+)T细胞降低(t=2.579,P<0.05),CD8^(+)T细胞升高(t=2.423,P<0.05);混合感染组(n=9)淋巴细胞(t=2.195,P<0.05)、CD3^(+)T细胞(t=2.649,P<0.05)、CD4^(+)T细胞(t=3.728,P<0.05)、CD8^(+)T细胞(t=2.579,P<0.05)、B细胞(t=3.045,P<0.05)和NK细胞(t=2.207,P<0.05)绝对计数均降低。
- 王淑惠慕莹韩洁魏晓芳刘秋媛阎丽平
- 关键词：造血干细胞移植淋巴细胞亚群移植物抗宿主病
- 肝素诱导的树突状细胞上调Toll羊受体3促进慢性乙型肝炎患者外周血Th0向Th1分化被引量：6
- 2015年
- 目的 探讨肝素体外诱导的树突状细胞（DC）促进慢性乙型肝炎（CHB）患者CD4＋T细胞亚群由Th0向Th1分化的机制. 方法 分离CHB患者外周血单个核细胞,以重组人白细胞介素（rhIL）-4、重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）和肝素诱导培养DC.流式细胞仪和定量PCR检测肝素处理及未处理的DC中Toll样受体（TLRs）分子表达水平.对高表达的TLRs,用TLRs-siRNA干扰处理后检测DC的功能变化.免疫磁珠分离外周血CD4＋T细胞亚群.酶联免疫吸附（ELISA）法检测Poly（I∶C）和R848刺激后DC上清液中IL-12及DC和CD4＋T细胞混合培养上清液中干扰素（IFN）v和IL-4的含量.均数的比较采用配对t检验.结果 肝素处理的DC （heparin-DC）其TLR3表达水平明显高于未处理的DC （t=2.849,P＜0.05;t=3.027,P＜ 0.05）;而两组间TLR7和TLR8的表达水平差异无统计学意义;Heparin-DC在Poly（I∶C）刺激下分泌IL-12水平明显高于未处理的DC（t=8.68,P＜0.01）,同时高于R848刺激的heparin-DC（t=19.01,P＜0.01）;经TLR3-siRNA干扰后,heparin-DC分泌的IL-12水平明显降低（t=31.49,P＜0.01）.TLR3-siRNA干扰后的heparin-DC与同种异体的CD4＋T细胞共培养,其CD4＋IFN Y ＋T细胞比例与未干扰组相比明显降低（1.64％±0.57％对比6.31％±0.88％,P＜0.01）,同时其上清液中Thl型细胞因子IFNY的水平也显著降低（t=20.83,P＜0.01）,而IL-4分泌水平变化无统计学意义.结论 肝素在体外可能通过上调CHB患者树突状细胞TLR3的表达水平而促进外周血Th0向Th1细胞的分化.
- 孙伟红魏晓芳走明鸟牛爱荣李长优高岱清
- 关键词：TOLL样受体3肝素树突状细胞TH1
