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高雪军: 作品数：49 被引量：119H指数：6; 供职机构：兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>; 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学理学化学工程更多>>

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风疹病毒松叶株全基因序列测定与分析: 2012年; 目的对我国现用风疹病毒(Rubella virus,RV)疫苗生产毒株松叶株(Matsuba)进行全基因组测序,分析其在减毒过程中的遗传与变异特点,为其安全性评价及遗传学质量控制的标准化提供依据。方法利用RT-PCR法分段扩增我国现用Matsuba疫苗株主代种子基因组全序列,分别将产物插入到T-A克隆载体pGEM-T easy中,构建病毒cDNA文库,进行全基因组序列测定与分析。结果我国现用Matsuba疫苗株主代种子基因组全长9 762 nt,含2个ORF,分别位于核苷酸41～6388位和6512～9700位,编码2 116、1 062个氨基酸;与GenBank中登录的Matsuba.GMK3野毒株和Matsuba疫苗株核苷酸同源性分别为97.5%和99.9%,氨基酸同源性分别为98.8%和99.9%;其在减毒的过程中共有37个氨基酸位点发生变异,其中非结构蛋白P150有18个氨基酸位点发生突变,结构蛋白E1和E2主要抗原位点氨基酸未发生变异,E1-177位糖基化位点突变丢失。结论我国现用风疹病毒Matsuba疫苗株与同类减毒株具有较高的同源性,其主要的抗原位点在减毒保种过程中高度保守,为在分子水平上保证Matsuba株毒种及其生产疫苗的安全性提供了依据。; 刘晨鸣冯德杰赵雅静魏然魏至栋高雪军朱莉萍; 关键词：风疹病毒基因组

顶空气相色谱法检测破伤风抗毒素中的甲苯残留量被引量：1: 2017年; 目的建立检测破伤风抗毒素中甲苯残留量的顶空气相色谱法。方法参照《中国药典》三部(2015版)"残留溶剂测定法",采用Agilent DB-1301毛细管色谱柱(15.0 m×530μm×1.00μm)及氢火焰离子化检测器;顶空进样器各参数分别为:平衡温度70℃,平衡时间30 min,定量环温度80℃,传输线温度90℃,进样量1 m L;气相色谱仪各参数为:进样室温度100℃,柱温箱温度60℃,检测器温度220℃,载气氮气流速5 m L/min,采集时间5min;并对该方法的系统适用性、专属性、线性范围、准确度和精密度、检测限和定量限进行验证及初步应用。结果甲苯保留时间2.429 min,峰面积的RSD为1.9%,以甲苯色谱峰计算得到的理论塔板数N=12 900,甲苯色谱峰与其相邻色谱峰的分离度R=6.03。方法的专属性强,制品中的其他物质不干扰甲苯的出峰;标准曲线的范围为1.0×10-4%~2.0×10-3%,相关系数r大于0.99;加标试验的回收率分别为96.0%~102.9%、100.7%~111.0%,重复性和日间精密度RSD均小于5%。检出限为2.6×10-6%,定量限为1.0×10-5%。测定10批破伤风抗毒素成品和10批破伤风抗毒素原液,其甲苯残留量均低于检出限,远低于规定的限度0.089%。结论该方法简便、快速、准确度、灵敏度高、精密度好,适用于破伤风抗毒素类制品中甲苯残留量的检测。; 慕艳红徐英侯风萍裴钰傅元欣魏然高雪军; 关键词：顶空气相色谱法甲苯破伤风抗毒素

口服轮状病毒活疫苗病毒感染滴度测定的影响因素被引量：1: 2007年; [目的]对影响轮状病毒活疫苗病毒滴度测定的因素进行研究。[方法]用细胞微量病变滴定法(CCID50)结合酶联免疫吸附试验(ELISA)[1]检测口服轮状病毒活疫苗病毒感染滴度。[结果]在疫苗滴度检测中处理疫苗所用的胰酶量,胰酶37℃处理疫苗时间,及感染细胞培养收冻时间均对疫苗的感染滴度产生影响。病毒滴度均随着胰酶量、温度和培养时间的增加均有先增高后降低的现象(P﹤0.001),用15￣20μg/ml胰酶、37℃处理疫苗50￣60 min,4￣5 d收冻为较佳试验条件。[结论]胰酶量、温度和培养时间对口服轮状病毒活疫苗病毒感染滴度的测定结果均有不同程度的影响,在检测中要选择合适的条件,使检测结果更具有真实性,实际工作中采用20μg/ml胰酶、37℃处理疫苗50 min、收冻时间为5 d的组合条件进行试验。; 崔焰孙晓琳鱼轲侯玲高雪军吕雯楣刘晓华; 关键词：轮状病毒病毒滴度减毒活疫苗病毒感染

气相色谱法对轮状病毒疫苗中β-丙内酯测定的研究被引量：6: 2010年; 用气相色谱法对轮状病毒疫苗生产过程中采用的β?丙内酯灭活剂进行残留量的检测,检测结果表明:采用HP-INNOWAX毛细管色谱柱(15m×0.53mm×1.0μm),氢火焰检测器检测轮状病毒疫苗中β?丙内酯是极其灵敏的,该法最低检测限为:1.43×10-4μl/μl。实验还证明:轮状病毒疫苗中已不存在β?丙内酯。; 徐英魏然姜英周旭高雪军朱莉萍; 关键词：气相色谱法轮状病毒疫苗

麻疹病毒S191疫苗株N基因稳定性研究及免疫细胞表位分析被引量：3: 2008年; 研究麻疹病毒（Measles virus，MeV）疫苗株S191毒种和传代病毒核蛋白（Nucleoprotein，N）基因稳定性及其遗传与变异特点；对该序列一些重要位点的氨基酸进行比较，探讨其功能结构及生物学活性变化以及S191疫苗株的保护效果。利用RT-PCR方法扩增S191减毒株23、26、27、29、32、37不同代次N基因，测序进行比对分析。S191传代病毒N基因序列之间核苷酸同源性99．7％-100％，氨基酸同源性为99．6％-100％；S191株与7个疫苗株之间核苷酸序列同源性达99．1％-99．4％；S191和中国流行代表株序列同源性在95．0％～95．4％；S191与世界流行代表株同源性达94．7％-99．4％；S191疫苗株和中国流行代表株CHN93／7（Hla）的4个重要T细胞表位氨基酸保持一致。S191各传代病毒基因具有较高稳定性，该疫苗有一定的保护作用。; 冯德杰高雪军赵雅静刘晨鸣魏至栋朱莉萍; 关键词：麻疹病毒 N基因免疫效果

静注人免疫球蛋白中IgG含量检测方法的探讨被引量：1: 2009年; 为了更好地进行生产质量控制,快速、准确的测定静注人免疫球蛋白中的IgG含量。实验中对2001-2008年的静注人免疫球蛋白中的IgG含量检测结果进行了抽样统计分析。分析结果表明：样品40倍稀释后测得的吸光值与标准曲线第三点的吸光值无显著性差异;样品40倍稀释后测得的IgG含量与样品进行20、30、40倍三个稀释度测得的IgG含量的平均值无显著性差异。从而证明,样品40倍稀释后测得的IgG含量可以代表该批样品的IgG含量,无需进行20、30倍的稀释。检测方法会更省时、省力、省材料。; 徐英冯泓高雪军何彦林周海云; 关键词：静注人免疫球蛋白免疫球蛋白吸光度

反相HPLC法测定静注人免疫球蛋白中胆酸钠残留量: 建立了反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定静注人免疫球蛋白(1VIG)中残余胆酸钠的方法。用固相提取柱SPE吸附、浓缩制品中的残余胆酸钠,以外标法定量。结果表明,测定胆酸钠获得了良好的回收率(平均为96.0%),方法...; 冯德杰高雪军朱莉萍; 文献传递

反相HPLC法测定静注入免疫球蛋白中胆酸钠残留量: 建立了反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定静注入免疫球蛋白(1VIG)中残余胆酸钠的方法。用固相提取柱SPE吸附、浓缩制品中的残余胆酸钠，以外标法定量。结果表明，测定胆酸钠获得了良好的回收率(平均为96.0％)，方法...; 冯德杰高雪军朱莉萍; 关键词：高效液相色谱; 文献传递

携带人血管抑制因子K1-5基因的腺相关病毒载体的构建及其对血管内皮细胞的抑制作用被引量：1: 2005年; 目的构建含人血管抑制因子K15基因的重组腺相关病毒载体rAAVK5,研究其在体外表达及对血管内皮细胞的抑制作用。方法将K15基因插入通用型AAV载体质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAVK5。用pSNAVK5转染BHK21细胞,经G418选择培养基培养载体细胞株BHKK5。用辅助病毒感染BHKK5细胞包装出重组病毒rAAVK5。研究rAAVK5感染BHK细胞获得的培养上清对血管内皮细胞的抑制作用。结果已获得了重组病毒rAAVK5,滴度达0.5×1012v.g.ml。免疫斑点印迹实验表明,rAAVK5可介导人血管抑制因子K15的体外表达,表达产物对血管内皮细胞增殖具有抑制作用。结论重组病毒rAAVK5在体外对血管内皮细胞的增殖具有抑制作用。为进一步用rAAV病毒载体进行抗血管生成基因治疗的动物实验及临床应用打下了基础。; 高雪军伍志坚封多佳吴小兵侯云德; 关键词：血管内皮细胞腺相关病毒载体 BHK-21细胞选择培养基 BHK细胞基因插入

离子色谱法测定脑膜炎球菌多糖蛋白结合疫苗中的1,4-丁二胺含量被引量：1: 2015年; 目的采用离子色谱法测定脑膜炎球菌多糖蛋白结合疫苗中的1,4-丁二胺含量,并对方法进行验证。方法采用Ion Pac CS17(4 mm×250 mm)分析柱,上样量25μl,以10 mmol/L甲基磺酸淋洗液进行等度洗脱,流速1.0 ml/min,电导检测器检测,Chromeleon色谱工作站记录并分析数据。对该方法进行专属性、线性、准确性、重复性验证,并确定该方法的最低检出限和最小定量限。结果该方法检测1,4-丁二胺专属性较强;在40μg/L^1 mg/L范围内,1,4-丁二胺浓度与色谱峰面积呈良好的线性关系,r2均大于0.999;向A、C、W135、Y群脑膜炎球菌多糖蛋白结合物原液中分别添加低、中、高浓度的1,4-丁二胺,重复测定5次的回收率在97.23%~104.94%之间,重复测定10次的相对标准偏差(RSD)在0.8%~1.8%之间;该方法的最低检出限为5μg/L(信噪比3∶1),最小定量限为40μg/L(信噪比10∶1)。结论离子色谱法简便、快速,灵敏度高,可用于检测脑膜炎球菌多糖蛋白结合疫苗中1,4-丁二胺的含量。; 冯潇马庆华傅元欣魏然高雪军; 关键词：离子色谱法

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