韦良孟
- 作品数：32 被引量：30H指数：3
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家肉鸡产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鸭RIG-1基因的PCR扩增及其序列分析被引量：6
- 2012年
- 维甲酸诱导基因1(RIG-1)是细胞质中侦测病原相关分子模式的识别受体。论文旨在扩增北京鸭RIG-1编码基因,并对其进行序列分析。通过PCR方法,从北京鸭脾脏中扩增得到RIG-1基因cDNA,并使用LaserGene分子生物学分析软件进行序列分析。结果发现北京鸭的RIG-1基因cDNA开放阅读框全长2 802bp,编码933个氨基酸。结构预测发现鸭RIG-1结构与哺乳动物类似,N端有两个串联CARD区,中间为DExD/H解旋酶区,C端为抑制区,各功能区起重要作用的氨基酸较为保守。同源性及进化树分析发现鸭RIG-1与鹅和斑马鱼的同源性最高分别为93.7%、78.4%,与哺乳动物同源性高于50%,与其他鱼类的同源性低于50%。成功扩增出北京鸭RIG-1基因cDNA编码序列,为鸭RIG-1的深入研究奠定了基础。
- 程玉强焦培荣韦良孟钟自富廖顺娣袁润余贾宝琴罗开健廖明
- 关键词：聚合酶链反应天然免疫
- C、D型产气荚膜梭菌和腐败梭菌二价二联类毒素疫苗的创制及其效果评价被引量：1
- 2022年
- 羊肠毒血症、羊快疫发病急死亡快,一般采用免疫接种疫苗的方式才可以有效防控。本研究将C型产气荚膜梭菌的外毒素、D型产气荚膜梭菌外毒素和重组腐败梭菌α毒素按一定比例混合,经甲醛灭活乳化后制成二价二联类毒素疫苗。参照《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》分别对疫苗进行了安全性检验、无菌检验和免疫效力检验等。6~7月龄的绵羊接种本疫苗21 d后,通过间接ELISA和毒素中和试验检测绵羊血清中抗体效价。免疫效果显示,绵羊血清中抗C型产气荚膜梭菌毒素的抗体效价为1:3200,抗D型产气荚膜梭菌毒素的抗体效价为1:6400,抗腐败梭菌毒素的抗体效价为1:6400;而中和效价分别为1:400,1:800和1:800。说明本实验所制备的疫苗效价较高,且安全可靠,能够为绵羊提供可靠的抗感染保护。该二价二联复合类毒素疫苗是国内首创,使疫苗的抗原成分由菌体上升为毒素蛋白,具有鲜明的创新。
- 韦良孟李昌明翁鸿宇王秀媛王芳戴培强柴同杰
- 关键词：羊肠毒血症羊快疫产气荚膜梭菌
- 鹅MDA5基因的克隆、序列分析及其组织分布研究
- 在2002 年,MDA5 被发现是一种干扰素诱导的RNA 解旋酶,它在人的黑色素瘤细胞中有双链RNA依赖的ATP 酶活性和抑制黑色素瘤生长的性质MDA5 能够识别并结合5’ 带有三磷酸基团的单链RNA(ssRNA)分子和...
- 韦良孟焦培荣宋亚芬韩翡曹蓝任涛廖明
- 两株H6N2亚型鸡源禽流感病毒的分离鉴定被引量：2
- 2012年
- 本研究利用血凝抑制试验(HI)、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、基因测序等方法,对广东省某活禽交易市场进行流行病学调查时获得的两株非H5、H9亚型禽流感病毒65株和C7株进行了亚型鉴定。结果表明这两株病毒均具有血凝活性,且能被抗H6亚型禽流感病毒标准阳性血清特异性抑制。用针对禽流感病毒的M基因、H6亚型禽流感病毒HA基因、N2亚型禽流感病毒NA基因特异性鉴定引物对65株和C7株进行RT-PCR扩增,分别获得特异性目的片段。测序及BLAST分析表明两株分离株与H6N2亚型禽流感广东分离株的HA基因和NA基因核苷酸序列相似性均高达95%以上。将该两分离株鉴定为H6N2亚型禽流感病毒,并命名为A/Chicken/Guangdong/65/2009、A/Chicken/Guangdong/C7/2009。
- 贾宝琴焦培荣韦良孟单芬袁润余徐成刚廖明
- 关键词：禽流感病毒
- 腐败梭菌α毒素蛋白单克隆抗体制备
- 2022年
- 将腐败梭菌参考株增殖、鉴定,使用饱和硫酸铵沉淀法粗提腐败梭菌天然α毒素,并通过SDS-PAGE方法对其进行检测。将扩增的α毒素目的片段和经酶切的p ET-21a(+)载体同源重组,将构建好的重组质粒转入到BL21(DE3)感受态细胞中,并筛选阳性克隆株。在优化的表达条件下,对α毒素重组蛋白进行了大规模的表达。免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用间接ELISA方法进行阳性杂交瘤细胞筛选。制备及纯化腹水,进行效价、浓度、纯度及特异性测定。结果表明,本研究成功表达了可溶性腐败梭菌α毒素蛋白,大小约为46 kDa,筛选出的单抗3 E8和单抗6B12对重组蛋白效价检测结果均为1:256 000,对天然α毒素的效价检测结果均为1:128 000;纯度均已达到85%以上;单克隆抗体的浓度分别为3E8:2.27 mg/ml,6B12:1.96 mg/ml;均能够与腐败梭菌重组α毒素、天然α毒素特异性结合,而与产气荚膜梭菌α毒素无交叉反应。结论:得到特异性强、稳定性高的单抗3E8和单抗6B12,有助于腐败梭菌病的早期诊断及研究。
- 林静苗润春韩四娥贾青燕伏刚冉智光杨晓雪李明勇柴同杰韦良孟
- 关键词：腐败梭菌Α毒素原核表达单克隆抗体
- 羊腐败梭菌的间接ELISA检测试剂盒
- 本发明公开了一种羊腐败梭菌的间接ELISA检测试剂盒，所述间接ELISA检测试剂盒以腐败梭菌菌悬液为包被抗原。所述腐败梭菌菌悬液由如下方法制备而成：将腐败梭菌菌落接种于培养基中，在37℃厌氧环境中静置培养12‑24h；将...
- 柴同杰林静韦良孟
- 文献传递
- 2020年山东省部分地区鸭圆环病毒感染情况分析被引量：5
- 2021年
- 为了解山东省部分地区2020年6~12月份鸭圆环病毒与其他病原体感染的情况,本实验室对从聊城、东营、德州、潍坊、济宁地区送检的130份样品进行了PCR鉴定及药敏试验,其中病毒检测包括:鸭圆环病毒(DuCV)、腺病毒(FAV)、鸭细小病毒(DPV)、禽流感病毒(AIV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)、新型鸭呼肠弧病毒(NDRV)和鸭肝炎病毒(DHV)。结果表明:在130份样品中,76份样品检测出病毒,其中DuCV检出43份,约占56.58%。86份样品检出细菌,占总样本数28.46%;DuCV与细菌混合感染37份,占DuCV阳性样本数86.05%。细菌单纯感染时敏感药物有四种,分别为盐酸环丙沙星、硫酸庆大霉素、氨苄西林钠、阿莫西林;细菌和DuCV混合感染时敏感药物只有两种,分别为硫酸庆大霉素和阿莫西林。说明DuCV在山东省部分地区存在着不同程度的流行,同时与细菌混合感染情况严重且增加了细菌的耐药性。
- 高攀攀李玲子韦良孟庄晓峰刘金龙朱瑞良魏凯
- 关键词：鸭圆环病毒检出率
- 新型冠状病毒亚单位疫苗研制及其高效免疫增强剂的筛选被引量：1
- 2023年
- 旨为推动新型冠状病毒(2019-nCoV)亚单位疫苗的开发并探索筛选适用于该疫苗的高效免疫增强剂,本试验分别诱导表达2019-nCoV-S和2019-nCoV-N两个蛋白,经纯化后测定目的蛋白含量,并分别加入不同浓度的松花粉多糖(PPPS)(200、400、800 mg/mL)作为佐剂制备基因工程亚单位疫苗,黄芪多糖佐剂作为对照。选取100只SPF级BALB/c小鼠随机分为10组,每种亚单位疫苗使用5组,免疫疫苗后检测各组小鼠免疫指标,探讨PPPS对2019-nCoV-S和2019-nCoV-N两种亚单位疫苗的免疫增强效果。结果显示,重组表达并纯化的目的蛋白分别在55.68 kD和45.64 kD处出现单一条带,经鉴定表达正确,蛋白质量浓度分别为1.12 mg/mL和0.66 mg/mL。用制作成的含佐剂亚单位疫苗免疫小鼠后发现400 mg/mL PPPS对两种疫苗的免疫效果均有显著的提升效果,并且效果优于黄芪多糖佐剂。综上所述,两种重组蛋白均能诱导较高的抗体水平,PPPS可以作为2019-nCoV亚单位疫苗的候选佐剂。
- 王祥锟宋学宏刘金龙郭培红庄晓峰韦良孟周凡张树宇高攀攀魏凯
- 关键词：新型冠状病毒基因工程亚单位疫苗免疫佐剂
- 一种腐败梭菌的培养方法
- 本发明公开了一种腐败梭菌的培养方法，是将腐败梭菌菌种接种于腐败梭菌培养基中，放置在厌氧培养箱中进行厌氧培养；所述腐败梭菌培养基，由以下重量份的原料制成：脑心浸液肉汤35‑40份、葡萄糖2‑4份、L‑半胱氨酸0.6‑0.8...
- 柴同杰翁鸿宇韦良孟李昌明
- 文献传递
- 羊腐败梭菌的间接ELISA检测试剂盒
- 本发明公开了一种羊腐败梭菌的间接ELISA检测试剂盒，所述间接ELISA检测试剂盒以腐败梭菌菌悬液为包被抗原。所述腐败梭菌菌悬液由如下方法制备而成：将腐败梭菌菌落接种于培养基中，在37℃厌氧环境中静置培养12‑24h；将...
- 柴同杰林静韦良孟
- 文献传递
