- 论载脂蛋白E及其基因多态性与中医痰瘀证候的关系被引量：45
- 2002年
- 就个体而言 ,基因型是相对恒定的 ,也是先天具有的 ,而中医证候的表现是可变的 ,个体间存在着普遍性的较大差异 ,因此 ,同一疾病的证候具有多样性。但就总体而言 ,许多基因具有的多态性变化与某些疾病的发生有密切相关性 ,而某一病症的不同中医证候发生频率在一定范围内的分布则是相对稳定的 ,中医临床证候的多样性和复杂体系正好是基因多态性与临床表型多样性关系最好的研究对象。因此 ,我们推测 ,中医证候多样性及发生频率与特定基因多态性间可能存在某种关联 ,此种关联可能是证候形成与体质类型或先天禀赋关系的分子基础 ,也可为中医同病异治、异病同治等提供分子水平上的依据。
- 宋剑南陈杲
- 关键词：基因多态性痰瘀证候载脂蛋白E中医体质
- 沥水调脂胶囊在体外对弱氧化型低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞增殖的影响被引量：10
- 2003年
- 目的 :探讨沥水调脂胶囊治疗动脉粥样硬化的作用机理和弱氧化型低密度脂蛋白在动脉粥样硬化由痰致瘀过程中的作用。方法 :以甲醇除蛋白后的沥水调脂胶囊含药血清和弱氧化型低密度脂蛋白 (mox LDL)处理血管平滑肌细胞 (VSMC) ,用3 H TdR掺入法检测DNA合成率。结果 :低浓度的除蛋白含药血清 (5 %、10 % )在 5、10 μg ml的nox LDL处理VSMC细胞组中与对照组比较 ,差异均无显著性意义 ;高浓度除蛋白含药血清 (2 0 % )对两个不同浓度的mox LDL诱导的VSMC增殖均有明显的抑制作用 (抑制率分别为 4 0 %、4 2 % ,P <0 0 5 ) ;其作用方式与维生素E相似。结论 :沥水调脂胶囊呈浓度依赖方式抑制mox LDL诱导的VSMC增殖 ,其机制可能与该药的抗氧化作用有关 ,进一步提示氧化损伤是由痰致瘀过程中的关键环节 ,以及抗氧化可能是阻止由痰致瘀的主要手段。
- 陈杲宋剑南史国峰刘卫红陈冰
- 关键词：沥水调脂胶囊体外血管平滑肌细胞增殖动脉粥样硬化
- 沥水调脂胶囊对氧化型低密度脂蛋白诱导内皮细胞凋亡的影响被引量：7
- 2003年
- 目的 :探讨沥水调脂胶囊血清对氧化型低密度脂蛋白 (ox LDL)诱导内皮细胞凋亡的影响。方法 :复制氧化型低密度脂蛋白 (ox LDL)诱导血管内皮细胞凋亡模型 ,采用流式细胞术、形态学观察、DNA片段琼脂糖凝胶电泳等方法 ,观察沥水调脂胶囊含药血清对氧化型低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞凋亡的作用。结果 :2 0 0 μg mlox LDL作用于培养的人脐静脉内皮细胞 2 4h后 ,凋亡率明显升高 ,Hoechst 3334 2染色 ,荧光显微镜上可观察到早、中、晚期各种典型的凋亡细胞 ,DNA电泳可见细胞凋亡特有的梯形条带。沥水调脂胶囊血清使内皮细胞凋亡率明显下降 ,DNA凋亡带减弱。结论 :沥水调脂胶囊对ox LDL诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡有一定的抑制作用。
- 刘卫红宋剑南陈杲李玉梅池旭生
- 关键词：痰瘀同治氧化型低密度脂蛋白细胞凋亡
- 不同程度氧化修饰的低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞增殖的影响
- 2003年
- 目的 研究不同程度氧化修饰的低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞增殖的影响。方法 氧化低密度脂蛋白的制备参照Takauya等报道方法。测得天然低密度脂蛋白弱氧化型低密度脂蛋白和氧化型低密度脂蛋白的硫代巴比妥酸反应物质值分别为 0 .37、2 .5 8和 6 .6 7μmol g。消化培养法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的原代培养。常规传代取第 3和第 4代细胞用于实验和生物学鉴定。用含 0 .1%小牛血清的DMEM培养基培养 2 4h使细胞静止后 ,用包含 5 0 0mg LB、10mg L胰岛素、2 0mg L转铁蛋白、2 5mg L硒酸钠的DMEM培养基代替进行培养。加入 10mg L的低密度脂蛋白、弱氧化型低密度脂蛋白和氧化型低密度脂蛋白后 ,用氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法分别检测 11～ 12、15～ 16、19～ 2 0和 2 3～ 2 4h的DNA合成率。结果 在刺激后 12h弱氧化型低密度脂蛋白组DNA合成率明显高于氧化型低密度脂蛋白和低密度脂蛋白两组 (分别为P <0 .0 5和P <0 .0 1) ,氧化型低密度脂蛋白组明显高于低密度脂蛋白 (P <0 .0 5 )。在 16h各组的DNA合成率均较 12h增加 ,弱氧化型低密度脂蛋白组与另两组比较差异更明显 ,而低密度脂蛋白组反比氧化型低密度脂蛋白组高 ,但差异无显著性意义。到 2 0h 。
- 陈杲宋剑南史国峰陈冰牛晓红金红
- 关键词：氧化修饰低密度脂蛋白血管平滑肌细胞病理生理学细胞培养
- 沥水调脂胶囊对弱氧化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白1及血管内皮细胞P选择素表达的影响被引量：6
- 2003年
- 目的 通过探讨健脾祛痰方药沥水调脂胶囊含药血清对弱氧化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞表达的单核细胞趋化蛋白 1及血管内皮细胞表达P选择素的影响 ,阐明沥水调脂胶囊抗炎防治动脉粥样硬化作用机理。方法 1.脐静脉内皮细胞的培养 :取新鲜脐带 ,用Ⅱ型胶原酶消化脐静脉内皮细胞后 ,用含有 2 0 %的胎牛血清的M199培养基接种。实验用第 3代。 2 .脐动脉平滑肌细胞的培养 :取新鲜脐带 ,剥离出脐动脉 ,用Ⅳ型胶原酶联合胰酶 ,分二步消化 ,用 2 0 %的胎牛血清的DMEM培养基接种 ,实验用第 3代 ,实验时用无血清培养基。 3.弱氧化低密度脂蛋白的制备 :用铜离子体外氧化法获得 ,用硫代巴比妥法测硫代巴比妥酸反应物值及琼脂糖电泳 ,测定氧化程度。 4 .含药血清的制备 :用沥水调脂胶囊按成人剂量的 8倍 ,灌喂大鼠 ,取大鼠血清 ,用或不用甲醇沉降蛋白后用冻干机冻干 ,临用时用三蒸水将其稀释至用蛋白沉降前的原体积或血清原体积。 5 .用细胞酶联免疫法测定内皮细胞表面P选择素的表达或酶联免疫法测定平滑肌细胞培养上清液中单核细胞趋化蛋白 1的含量。结果 含 2 0 %的除蛋白含药血清对弱氧化低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞表达的单核细胞趋化蛋白 1具有一定的抑制作用。含有 10
- 史国峰宋剑南陈杲牛晓红金红
- 关键词：沥水调脂胶囊血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白1血管内皮细胞P选择素
- 沥水调脂胶囊对氧化型低密度脂蛋白影响内皮细胞Bcl-2、Bax、p_(53)和caspase-3蛋白表达的调节被引量：1
- 2003年
- 目的 :研究沥水调脂胶囊抑制氧化型低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞凋亡的机制。方法 :沥水调脂胶囊含药血清和ox LDL与人脐静脉内皮细胞 (hUVEC)共同孵育 15h ,用免疫荧光标记结合流式细胞仪分别测定Bcl 2、Bax、p53 和caspase 3蛋白表达量。结果 :发现ox LDL可使hUVECBcl 2蛋白表达降低 ,Bax、p53 和caspase 3蛋白表达量升高 ,而沥水调脂胶囊可使ox LDL对Bcl 2、p53和caspase 3的上述作用明显减弱 ,但对Bax未见明显影响。结论 :沥水调脂胶囊抑制ox LDL诱导的血管内皮细胞凋亡 ,可能是从正反两个方面、多条途径调节与凋亡密切相关的基因表达以及保护细胞结构功能有关。
- 刘卫红宋剑南李玉梅庞大本池旭生陈杲
- 关键词：沥水调脂胶囊氧化型低密度脂蛋白内皮细胞CASPASE-3蛋白癌基因
- 沥水调脂胶囊对轻度修饰低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞丝裂原活化蛋白激酶信号转导的影响被引量：2
- 2004年
- 轻度修饰低密度脂蛋白 ; 血管平滑肌细胞[摘 要 ] 为了探讨健脾祛痰化瘀方———沥水调脂胶囊对轻度修饰低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞丝裂原活化蛋白激酶信号转导的影响 ,采用血清药理学通法制备含药血清 ,以甲醇除蛋白预处理 ;以Cu2 + 氧化制备轻度修饰低密度脂蛋白 ;用磷酸化抗体以WesternBlot方法分析c junN端激酶 1、细胞外信号调节激酶 1和 2的磷酸化。结果发现 ,2 0 %含药血清可明显降低 0 .5h和 1h轻度修饰低密度脂蛋白诱导的c junN端激酶 1磷酸化 (P <0 .0 5 ) ,而对细胞外信号调节激酶 1和 2无明显影响。结果提示 ,降低c junN端激酶 应激活化蛋白激酶信号可能是沥水调脂胶囊抑制血管平滑肌细胞增殖的机制之一。
- 陈杲宋剑南陈冰金红牛晓红
- 关键词：中药学WESTERNBLOT检测丝裂原活化蛋白激酶血管平滑肌细胞
- 沥水调脂胶囊对弱氧化型低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞c-jun、c-fos、c-myc mRNA表达的影响被引量：1
- 2003年
- 目的 :探讨沥水调脂胶囊抑制血管平滑肌细胞增殖的机制。方法 :用消化法获取血管平滑肌细胞 (VSMC) ,DMEM培养 ,以甲醇除蛋白后的沥水调脂胶囊含药血清、弱氧化型低密度脂蛋白(mox LDL)和vitE分组处理细胞 ,RT PCR扩增c jun、c fos、c myc ,用凝胶成像分析仪分析琼脂糖电泳结果 ,与GAPDH对照进行半定量分析。结果 :在处理后 30min含药除蛋白血清和vitE对mox LDL诱导VSMCc fos、c jun、c mycmRNA表达均无明显影响 ,在 1h、2hvitE组与对照组比较均有明显差异 (P <0 0 5 )。含药除蛋白血清组c myc、c fos在 1h、2h与对照组比较无明显差异 ,c jun则明显降低 (P <0 .0 5 ) ,与vitE的作用不相同。结论 :降低JNK/SAPK途径信号途径可能是沥水调脂胶囊抑制VSMC增殖的机制之一。
- 陈杲宋剑南刘卫红史国峰陈冰
- 关键词：沥水调脂胶囊血管平滑肌细胞含药血清
- 不同预处理的沥水调脂胶囊含药血清对弱氧化型低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞增殖的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨用不同方法处理的含沥水调脂胶囊药物血清对弱氧化型低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞增殖的影响。方法 :用3 H TdR掺入法观察不同浓度 3种含药血清对 2种浓度mox LDL诱导VSMCDNA合成率变化的影响。结果 :除蛋白含药血清可抑制mox LDL诱导的VSMCDNA合成率增加 ,而未经处理和灭活含药血清无明显影响。结论 :在血管平滑肌增殖研究中 。
- 陈杲宋剑南陈冰金红牛晓红
- 关键词：沥水调脂胶囊含药血清血管平滑肌中药制剂药理实验
- 不同程度氧化修饰的低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞增殖的影响
- 2004年
- 目的研究不同程度氧化修饰的低密度脂蛋白在诱导血管平滑肌细胞增殖时的影响。方法采用消化法培养血管平滑肌细胞,Cu2+氧化制备弱氧化型低密度脂蛋白(moxLDL)和氧化型低密度脂蛋白(oxLDL),用3HTdR掺入法检测血管平滑肌细胞DNA合成率。结果在比较nLDL和moxLDL、oxLDL诱导VSMC增殖时,发现moxLDL组和nLDL组相似,DNA合成率先上升到最高后快速下降,但moxLDL组始终明显高于nLDL组,oxLDL组则随着时间的推移呈上升趋势。结论moxLDL与nLDL、oxLDL在诱导VSMC增殖时具有不同的作用方式,其差异与其所含的过氧化脂质种类及不同的受体途径两种因素有密切关系。
- 陈杲宋剑南陈冰牛晓红金红
- 关键词：血管平滑肌细胞增殖氧化型低密度脂蛋白动脉粥样硬化
