陈堃
- 作品数：36 被引量：27H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 一种肠道病毒71衣壳蛋白1抗原、制备方法及免疫检测试剂
- 本发明公开了一种采用大肠杆菌优势密码子拼接的肠道病毒71(EV71)衣壳蛋白1(VP1)抗原基因序列。本发明直接由32条短的基因引物片段，通过退火延伸PCR技术，获得改造后的VP1基因，无需EV71病毒模板；改造后的VP...
- 修冰水陈堃张贺秋王国华宋晓国
- HCV IgM抗体检测试剂的研制及其在丙型肝炎检测中的应用被引量：1
- 2010年
- 目的 建立生物素标记HCV多表位嵌合抗原HCV IgM抗体捕获检测方法,探讨在急、慢性丙型肝炎检测中的意义.方法 克隆表达HCV多表位嵌合抗原并标记生物素,链酶亲和素标记HRP,以抗人IgM单克隆抗体包被酶联板,研制出BA-ELISA HCV IgM捕获检测试剂.同时检测68例急性丙型肝炎和20例15～25年慢性丙型肝炎患者及34例健康献血员血清IgG和IgM.结果 68例急性丙型肝炎IgG和IgM检出率分别为97.05%（66/68）和48.53%（33/68）;20例慢性丙型肝炎IgG和IgM检测率分别为100%（20/20）和95%（19/20）.慢性丙型肝炎IgG和IgM 两种检测方法比较差异无统计学意义（P＞0.05）;34例健康献血员血清IgG和IgM特异度均为100%.结论 研制的新型抗HCV IgM检测试剂可用于急、慢性丙型肝炎检测,具有较高的敏感度和特异度.抗-HCV IgM不能作为HCV感染的早期诊断指标,不能区分近期与既往感染,IgM存在时间至少25年.
- 陈堃王国华宋晓国冯晓燕朱翠侠何竞修冰水张贺秋
- 关键词：丙型肝炎HCVIGM
- 基于化学发光肠道病毒71型IgM抗体检测试剂的研制及初步应用被引量：1
- 2011年
- 目的在肠道病毒71型(EV71)重组外壳蛋白VP1的基础上建立以化学发光为基础的IgM抗体检测技术,并与普通TMB显色酶联免疫吸附法比较,评价其临床应用前景。方法采用抗IgM单克隆抗体及辣根酶标记的重组VP1抗原,在此基础上建立EV71-IgM捕获法化学发光检测技术,并对比化学发光检测技术与普通酶联检测技术在45份EV71抗体阳性和30份阴性血清中的反应情况。结果化学发光法、普通酶联免疫吸附法、市售EV71-IgM检测试剂分别能与38份、19份、26份EV71抗体阳性血清发生阳性反应,灵敏度分别为84.4%、42.2%和57.8%;化学发光法灵敏度显著高于其他两种,差异有统计学意义(P<0.05);3种检测方法与阴性血清均无阳性反应。结论在EV71-VP1重组抗原的基础上建立的EV71-IgM捕获法化学发光检测技术具有很高的灵敏度,并有很好的临床应用前景。
- 陈堃宋晓国张向颖杨锡琴王国华冯晓燕何竞张贺秋修冰水
- 关键词：肠道病毒71型VP1基因化学发光
- 新型布尼亚病毒抗原ELISA检测方法建立及初步评价被引量：1
- 2013年
- 目的 建立发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒抗原检测方法,并进行初步临床评价.方法 克隆表达新型布尼亚病毒核蛋白（NP）,分别免疫家兔和小鼠,制备多抗和单抗,以单抗包被酶联反应板,多抗偶联辣根过氧化物酶（HRP）,建立双抗体夹心免疫酶联方法,将获得的NP蛋白进行系列稀释,制作标准曲线,评价其检测灵敏度.分别检测48份临床发热伴血小板减少综合征和48份健康献血员血清.结果 建立的发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒抗原检测方法检测灵敏度为1 pg/ml,48份临床疑似病人检出阳性7例（14.58%）,48份健康血清样品1例阳性,特异度98%.结论 建立发热伴血小板减少综合征新型布尼亚病毒抗原检测方法可用于发热伴血小板减少综合征新型布尼亚病毒早期检测.
- 陈堃何竞修冰水王国华宋晓国朱翠侠杨锡琴冯晓燕张贺秋
- 关键词：发热伴血小板减少综合征新型布尼亚病毒
- 一种丙型肝炎病毒特异性抗原及其在血清分型中的应用
- 本发明公开了一种丙型肝炎病毒特异性抗原及其在血清分型中的应用。具体公开了一对含有丙型肝炎病毒(HCV)膜区的型别特异性嵌合抗原序列，还公开了利用该抗原进行丙型肝炎病毒血清中分型检测的方法。本发明主要采用免疫酶联检测技术，...
- 修冰水张贺秋王国华宋晓国陈堃冯晓燕何竞凌世淦杨锡琴
- 文献传递
- 新型布尼亚病毒抗体检测方法的建立及初步应用被引量：1
- 2014年
- 目的:建立新型布尼亚病毒IgG抗体ELISA检测方法。方法:用基因工程重组表达的新型布尼亚病毒NP抗原包被酶联板,建立间接ELISA法检测新型布尼亚病毒IgG抗体,并进行特异性和灵敏度评价,健康人群中检测结果计算临界值(均值+3标准差)。检测70例发热伴血小板减少综合征患者恢复血清和69份健康人血清样品。结果:在70份患者血清样品中,检测出新型布尼亚病毒IgG抗体阳性51例,阳性率为72.14%(51/70);69份健康人血清样品中,检测出1份阳性,特异性为98.6%(1/69)。结论:建立的新型布尼亚病毒IgG抗体ELISA检测方法特异性强、灵敏度高,可用于新型布尼亚病毒感染的检测及流行病学调查。
- 陈堃何竞修冰水王国华宋晓国朱翠侠杨锡琴冯晓燕张贺秋
- 关键词：新型布尼亚病毒IGG抗体
- CpG联合铝佐剂对HCV免疫原体液免疫作用的影响被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨胞苷酸鸟苷寡脱氧核苷酸(CpG ODN)联合铝佐剂对丙型肝炎病毒(HCV)重组免疫原的体液免疫作用。方法:采用高交叉HCV-HVR1和E1重组蛋白与CpG ODN、铝佐剂组合,免疫BALB/c小鼠后以ELISA、酶联免疫斑点测定、流式细胞术、免疫沉淀等方法检测相关体液免疫指标和免疫血清多抗的交叉反应性。结果:CpG联合铝佐剂激发了最高的特异性抗体滴度;佐剂通过提高抗体分泌细胞数量、增加脾脏中记忆B细胞数量、增加脾淋巴细胞IL-6、IL-10分泌浓度实现体液免疫增效;CpG则能提高免疫效率,联合铝佐剂时显著提高浆细胞数量;12份HCV阳性血清中有10份可与多抗HVR1 IgG发生免疫沉淀。结论:CpG和铝佐剂联合应用具有协同作用,多抗HVR1 IgG具有较好的交叉反应性。
- 湛娜修冰水王国华陈堃白冠中宋晓国朱翠霞戴振华杨锡琴张贺秋
- 关键词：丙型肝炎病毒体液免疫免疫佐剂
- 传染病诊断用基因工程抗原高效制备技术平台的建立与应用
- 张贺秋修冰水冯晓燕凌世淦杨锡琴王国华宋晓国陈堃朱翠侠靳鹏葛学铭刘明毛盺周逸张成林
- 该项目属于生物医药技术开发类领域。重大传染病对人类健康造成极大威胁，研制高质量病原微生物诊断试剂在重大传染病诊断及预警预报体系中发挥着重要作用。然而，中国免疫诊断试剂用的关键抗原普遍存在灵敏度低、特异性差、产量低、研发周...
- 关键词：
- 关键词：传染病诊断基因工程
- 狂犬病毒表位区段抗原在疫苗免疫效果评价中的应用价值
- 目的评价狂犬病毒表位区段抗原在疫苗免疫效果评价中的应用价值。方法通过生物信息学筛选确定优势表位抗原区段,对其进行克隆表达,以间接ELISA方法初步检测了其在疫苗免疫效果评价中的应用价值。结果获得了狂犬病毒糖蛋白表位区段抗...
- 冯晓燕王国华宋晓国陈堃修冰水何竞杨锡琴朱翠侠张贺秋
- 文献传递
- 抗结核分枝杆菌抗原优势肽段单克隆抗体的制备和初步鉴定
- 2012年
- 目的:制备和初步鉴定抗结核分枝杆菌抗原优势肽段的单克隆抗体。方法:以两种优势肽段的融合抗原PGEX-4T-2/38kD-ESAT6-CFP10和PGEX-4T-2/Mtb8.4-MPT64-Mtb16.3-Mtb8作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合后,通过有限稀释法筛选阳性克隆,经ELISA和Western blotting分析单抗的特性和特异性。结果:获得17株结核分枝杆菌抗原优势肽段特异单克隆抗体杂交瘤细胞株,经间接ELISA方法测定,杂交瘤细胞培养上清效价为28～212,接种小鼠的腹水效价为216～220。Western blotting结果显示,每株单抗均能特异性的识别融合蛋白的优势肽段。结论:制备了针对抗结核分枝杆菌抗原优势肽段的单克隆抗体,为结核分枝杆菌的快速诊断和抗原性分析奠定了基础。
- 戴振华王国华冯晓燕张立陈堃宋晓国朱翠侠白冠中张贺秋
- 关键词：结核分枝杆菌单克隆抗体
