陈劲枫 作品数:422 被引量:2,277 H指数:26 供职机构: 南京农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 经济管理 文化科学 更多>>
植物组织培养生理机制的研究进展 被引量:12 2015年 植物形态发生变化时,生理生化特性研究是揭开这一现象的一个重要方面,很多研究已经证实,形态建成的前提是植物生理生化的改变,其生理生化差异导致了不同的形态发生,植物不定芽形成是一个很复杂的现象。本研究就植物组织培养过程中生理生化变化的几个方面加以讨论。 张慧君 陈劲枫关键词:植物组织培养 生理生化 生理机制 不定芽 内源激素 黄瓜亚硝酸还原酶基因(CsNiR)的克隆及对外植体分化的影响 被引量:1 2020年 [目的]本文旨在揭示黄瓜亚硝酸还原酶基因(CsNiR)的表达特征及其在黄瓜再生体系中的功能。[方法]以黄瓜自交系CCMC为试验材料,克隆CsNiR的编码区序列全长,对其进行生物信息学分析;利用本氏烟草表皮细胞瞬时表达系统对CsNiR蛋白进行亚细胞定位,并采用RT-qPCR技术分析CsNiR基因在不同组织中的表达量。对不同基因型黄瓜子叶节外植体的NiR活性与外植体分化率进行相关性分析,测定在不同培养条件下不同基因型黄瓜子叶节外植体CsNiR基因表达量,并统计在不同NH+4/NO-3比例(1∶5、1∶2、1∶1、2∶1)培养条件下外植体分化率情况。[结果]CsNiR基因ORF全长为1752 bp,编码583个氨基酸,具有含血红素蛋白β-化合物区域和4Fe-4S区域的完整NiR蛋白结构。系统进化树分析发现植物中CsNiR高度保守,黄瓜与甜瓜氨基酸序列相似性高达96%。RT-qPCR结果表明,CsNiR基因在黄瓜成熟叶表达量最高,雄花中次之,在茎尖和侧芽等分化组织中表达量最低,具有组织特异性。亚细胞定位结果表明CsNiR主要在细胞膜和叶绿体中表达。对不同基因型黄瓜子叶节的NiR活性与再生率的测定发现,NiR活性与黄瓜外植体分化率显著负相关。在不同基因型黄瓜外植体诱导分化过程中,CsNiR基因的表达在含有诱导激素培养基上的表达量显著低于无诱导激素的培养基,当NH+4/NO-3为1∶5时,黄瓜子叶节外植体分化率最高。[结论]植物中NiR高度保守,CsNiR基因的表达具有特异性,在茎尖等分生组织表达含量最低,NiR活性与外植体分化率呈负相关关系,降低NH+4/NO-3比例有助于提高黄瓜外植体分化率。 夏磊 王团团 段莉莉 李季 陈劲枫关键词:黄瓜 子叶节 外植体 分化率 AFLP Analysis of Cytoplasmic Male-sterile Line and Its Maintainer Line of Pepper 被引量:6 2010年 [Objective] The aim of this study was to analyze the cytoplasmic male sterile line 21A and its maintainer line 21B of peppers by AFLP,and lay the foundation for further studies on molecular mechanism of the cytoplasmic male sterility in peppers.[Method] Cytoplasmic male sterility(CMS)line 21A and its maintainer line 21B were analyzed by AFLP to obtain the specific amplified fragments of cytoplasmic male sterile line 21A,while the specific amplified fragments were recovered or sequenced,and analyzed by BLAST... 罗向东 戴亮芳 陈劲枫 王述彬关键词:PEPPER 适于cDNA-AFLP的黄瓜幼叶总RNA快速高效提取方法 被引量:11 2007年 为了快速高效地提取黄瓜幼叶总RNA,满足于cDNA-AFLP实验的要求。对Trizol试剂提取总RNA的方法进行了改进,所提RNA经琼脂糖电泳检测,其28S、18S、5S3条带清晰,完整性好,每0.1g幼叶可获得RNA100~150μg,产率高;经反转录、双链cDNA合成和cDNA-AFLP检测,证实提取的RNA能满足反转录和cDNA-AFLP对RNA质量和数量的要求。 杨寅桂 庄勇 娄群峰 刘强 曹清河 陈劲枫关键词:RNA提取 黄瓜叶片 CDNA-AFLP 黄瓜异戊烯基转移酶基因(CsIPT2)的克隆及特征分析 被引量:3 2014年 为了分析黄瓜异戊烯基转移酶基因(CsIPT2)在果实发育不同模式中的转录变化以及对不同激素的转录应答情况,对CsIPT2基因进行了克隆和序列分析,再利用荧光定量PCR技术分析该基因在黄瓜单性结实自交系EC1和非单性结实自交系8419s-1果实发育过程中的表达情况,并分析了CsIPT2对不同激素的应答反应。结果表明:CsIPT2基因全长843 bp,共编码280个氨基酸,蛋白空间结构模型与蛇麻IPT蛋白极其相似。该基因不仅在授粉后的黄瓜果实发育中表达量上调,而且在黄瓜天然单性结实前期和人工诱导的单性结实后期表达量均有增加,推测该基因在促进黄瓜果实发育过程中发挥着重要作用,同时也可能参与了黄瓜单性结实的调控过程。GA、ET、6-BA、ABA和NAA 5种激素都能够诱导该基因的上调表达。其中GA处理后3 h基因表达量最高,ET、6-BA、ABA和NAA诱导的表达峰值出现在处理后6 h。随着NAA处理浓度的增加基因的表达量上调幅度增大。 张停林 崔利 李季 郭勤卫 娄群峰 徐建 陈劲枫关键词:黄瓜 克隆 单倍体甜瓜离体繁殖的方法 被引量:1 2007年 以单倍体甜瓜无菌苗的顶芽和腋芽为外植体进行离体繁殖研究。结果表明:单倍体甜瓜最佳增殖培养基为MS+6-BA0.5mg.L-1,最适生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg.L-1,增殖系数为3.57。染色体计数表明没有倍性变化发生。 张永兵 伊鸿平 贾媛媛 冯炯鑫 吴明珠 陈劲枫关键词:甜瓜 单倍体 离体繁殖 抗南方根结线虫黄瓜-酸黄瓜渐渗系的筛选及鉴定 被引量:6 2011年 采用温室盆栽苗期人工接种鉴定技术,通过对黄瓜—酸黄瓜种间杂交后代群体进行抗南方根结线虫鉴定、形态学观测和分子生物学鉴定,筛选出抗南方根结线虫的黄瓜—酸黄瓜渐渗系ILs-10-1。抗性鉴定结果表明,渐渗系ILs-10-1对南方根结线虫的抗性表现稳定;田间农艺性状和形态学观测发现,其具有小叶、短果、棕色瘤刺、多分枝的特点,性状表现介于双亲之间;SSR分子标记分析结果表明,从302对SSR引物中筛选出的1对引物SSR18648,能够在渐渗系ILs-10-1中稳定重复地扩增出野生亲本酸黄瓜的特异DNA片段,从分子水平上证实了渐渗系ILs-10-1为野生黄瓜与栽培黄瓜发生渐渗杂交的种间杂交后代。 叶德友 钱春桃 陈劲枫关键词:黄瓜 渐渗系 南方根结线虫 形态学鉴定 SSR标记 一种黄瓜-酸黄瓜二体附加系的创制、鉴定方法 本发明公开了一种黄瓜‑酸黄瓜二体附加系的创制、鉴定方法,属于植物生物技术育种领域。该方法首先利用黄瓜‑酸黄瓜种间杂交异源四倍体与二倍体栽培黄瓜回交两次得到黄瓜‑酸黄瓜单体异附加系,再通过黄瓜‑酸黄瓜单体异附加系自交,经分... 娄群峰 李梦雪 刘昱希 陈劲枫辣(甜)椒细胞质雄性不育系减数分裂和雄配子发生过程 被引量:33 2004年 运用减数分裂制片技术和石蜡切片法观察了辣椒细胞质雄性不育系21A和保持系21B以及甜椒细胞质雄性不育系金A和保持系金B减数分裂和雄配子发生的整个过程。结果表明,不育系和保持系都能进行正常减数分裂,中期I的染色体构型为9个环状二价体和3个棒状二价体,后期I和后期II都均等分裂,形成了正常的四分孢子(n=12)。保持系的四分孢子经过单核和双核期后形成成熟花粉粒。雄性不育系从小孢子单核靠边期开始异常,绒毡层细胞径向异常膨大,挤压花粉粒,致使小孢子在形成双核之前完全裂解,导致不育。 王述彬 罗向东 戴亮芳 钱春桃 陈劲枫 刘金兵 潘宝贵关键词:辣椒 细胞质雄性不育 减数分裂 45S与5S rDNA在甜瓜属11个物种染色体上的比较定位 为了研究甜瓜属栽培种与野生种物种之间的亲缘及进化关系,利用荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH),将核糖体45S rDNA与5S rDNA采用缺口平移法标记探针... 张云霞 何玉华 王筠竹 杨树琼 娄群峰 李季 陈劲枫关键词:甜瓜属 染色体定位 亲缘关系 文献传递