郭松辉
- 作品数：10 被引量：22H指数：3
- 供职机构：云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室更多>>
- 发文基金：云南省科技攻关计划云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 禽流感病毒型及亚型特异性免疫酶染色技术的研究
- 2008年
- 在获得禽流感病毒型及亚型特异性单克隆抗体的基础上,研究建立型及亚型特异性免疫酶染色技术,用于检测或鉴定禽流感病毒.优化反应条件,确定单克隆抗体及辣根过氧化物酶标记二抗的最佳工作浓度,进行敏感性、特异性、重复性及稳定性分析,并与病毒分离鉴定比较.结果表明该方法敏感、特异,具有良好的重复性和稳定性,可用于检测临床组织样品、鸡胚及细胞培养物中的禽流感病毒.
- 金卫华宋建领张文东赵毅王金萍李作生冯子良胡媛媛郭松辉张应国范泉水宋学林邱薇张富强
- 关键词：禽流感病毒免疫酶染色
- H5N1亚型禽流感病毒NP基因的克隆与表达被引量：1
- 2007年
- 根据已知H5N1亚型禽流感病毒NP基因序列设计、合成PCR克隆引物。自H5N1阳性病料中提取总RNA,反转录后采用高可信度DNA聚合酶,经PCR扩增NP基因,采用Invitrogen定向表达系统进行克隆表达,纯化获得N末端携带多聚组氨酸标签的重组NP蛋白,分子质量约66.0ku。采用单克隆抗体和阳性血清经ELISA、免疫印迹分析重组蛋白的免疫反应性。结果表明:所获得的重组NP蛋白在ELISA分析中均能与阳性血清和单克隆抗体发生特异性结合,但在免疫印迹分析中仅与阳性血清发生特异性结合。
- 胡媛媛宋建领张富强郭松辉王金萍
- 关键词：禽流感病毒H5N1亚型核蛋白
- 禽流感病毒M1蛋白表(拟)位分析
- 禽流感病毒属于正粘病毒科流感病毒属 A 型流感病毒成员。禽流感病毒基因组由8个分节段的单股负链 RNA 组成,编码10种病毒功能蛋白。病毒第7节段 RNA 转录过程中,经剪接、编辑合成两条不同
- 宋建领张富强王金萍郭松辉
- 关键词：禽流感病毒单克隆抗体特异性结合噬菌体
- 文献传递
- 禽流感病毒型及亚型特异性免疫荧光技术的研究被引量：1
- 2007年
- 在获得禽流感病毒型及亚型特异性单克隆抗体的基础上,建立型及亚型特异性免疫荧光技术,用于检测或鉴定禽流感病毒.优化反应条件,确定单克隆抗体及异硫氰酸荧光黄标记二抗的最佳工作浓度,进行敏感性、特异性、重复性及稳定性分析,并与病毒分离鉴定比较.结果表明:该方法敏感、特异,具有良好的重复性和稳定性,可用于检测临床组织样品、鸡胚及细胞培养物中的禽流感病毒.
- 宋建领张文东王金萍李作生冯子良胡媛媛郭松辉张应国范泉水宋学林邱薇张富强
- 关键词：禽流感病毒免疫荧光
- 禽流感病毒H9亚型特异性抗原捕捉ELISA检测方法的研究被引量：8
- 2008年
- 采用禽流感病毒多克隆抗体及H9亚型特异性单克隆抗体,研究建立H9亚型特异性抗原捕捉ELISA检测方法,用于检测H9亚型禽流感病毒.优化了反应条件,确定了包被抗体、检测抗体及酶结合物的最佳工作浓度,对该方法的敏感性、特异性、重复性及稳定性分析,并与RT-PCR方法比较.通过使用该方法对野外样品进行检测.结果表明该方法敏感、特异,具有良好的重复性和稳定性,可用于检测临床样品、鸡胚培养物及细胞培养物中的H9亚型禽流感病毒.
- 宋建领张文东王金萍李作生冯子良胡媛媛郭松辉张应国范泉水宋学林邱薇张富强
- 关键词：禽流感病毒
- 禽流感H5亚型病毒抗原性差异及ELISA检测方法的研究
- 禽流感(Avian influenza,AI or bird flu)是由 A 型流感病毒(Influenza virus type A)引起的一种禽类的感染性疾病综合征。禽流感病毒感染后引起的临床症状和病理变化,因感染...
- 宋建领张文东张富强王金萍李作生冯子良胡媛媛郭松辉张应国范泉水宋学林邱薇
- 关键词：单克隆抗体禽流感病毒病毒抗原ELISA
- 文献传递
- 禽流感血凝素基因的研究进展被引量：3
- 2007年
- 高致病性禽流感(AI)是由禽流感病毒(AⅣ)引起的一种急性传染病,AⅣ呈球形,有囊膜。其表面主要有两种糖蛋白,其中血凝素(hemagglufinin,HA)具有重要功能:能凝集红细胞,属I型糖蛋白;具有株和亚型的特异性,是AⅣ型和亚型内新变种判断的主要依据;能结合宿主唾液酸之类的细胞受体;HA在病毒吸附及穿膜过程中起关键作用,HA上裂解位点的序列直接影响AI病毒致病性的高低;HA的变异性很强,它的变异是AI病毒发生抗原变异的主要原因,HA是最主要的抗原物质。因此HA对AⅣ的生物学特征具有十分重要的意义。
- 郭松辉张富强
- 关键词：禽流感血凝素裂解位点
- H5N1亚型禽流感病毒血凝素基因的克隆与表达被引量：5
- 2007年
- 根据已知H5N1亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因序列设计、合成克隆引物.自灭活的云南地方H5N1亚型病毒阳性临床组织样品中提取总RNA,反转录后采用高可信度DNA聚合酶(PyobestTMDNA Poly-merase)扩增HA基因,采用Invitrogen定向表达系统(ChampionTMpET directional TOPO expression system)进行克隆表达,纯化获得N末端携带多聚组氨酸标签的重组HA,分子质量约78 ku.采用阳性血清经免疫印迹及ELISA分析重组HA的免疫反应性,结果表明重组HA能与H5N1亚型病毒抗血清发生特异性结合,具有良好的免疫反应性.
- 王金萍宋建领张文东李作生冯子良胡媛媛郭松辉张应国范泉水宋学林邱薇张富强
- 关键词：禽流感病毒H5N1亚型血凝素
- 禽流感病毒H5亚型特异性抗原捕捉ELISA检测方法的研究被引量：1
- 2007年
- 在获得禽流感病毒多克隆抗体及H5亚型特异性单克隆抗体的基础上,研究建立H5亚型特异性抗原捕捉ELISA检测方法,用于检测H5亚型禽流感病毒.优化反应条件,确定包被抗体、检测抗体及酶结合物的最佳工作浓度,进行敏感性、特异性、重复性及稳定性分析,并与RT-PCR方法比较.同时使用该方法对野外样品进行检测.结果表明:该方法敏感、特异,具有良好的重复性和稳定性,可用于检测临床样品、鸡胚培养物及细胞培养物中的H5亚型禽流感病毒.
- 张文东宋建领王金萍李作生冯子良胡媛媛郭松辉张应国范泉水宋学林邱薇张富强
- 关键词：禽流感病毒
- 禽流感病毒M1蛋白型特异性表位分析被引量：5
- 2008年
- 目的对流感病毒基质蛋白1(M1)型特异性表位进行定位研究。方法采用针对禽流感病毒M1蛋白的型特异性单克隆抗体,淘选M13噬菌体展示的12肽随机肽库,进行M1蛋白表(拟)位分析。采用ELISA、竞争性ELISA、免疫印迹分析不同噬菌体拟位与单克隆抗体的免疫反应性。结果筛选获得共有序列NxPHLR,定位于M1蛋白222-224位(HPN)、229-230位(LR)氨基酸区域。含有NxPHLR基序的噬菌体拟位能与单克隆抗体发生特异性结合,且此结合能被天然病毒抗原抑制或阻断,表明拟位多肽真实模拟了天然病毒蛋白与单克隆抗体结合的抗原决定簇或表位。结论M1蛋白222-230位氨基酸(HPNSSARLR)序列构成了流感病毒型特异性表位。
- 宋建领张文东张富强范泉水张应国李作生邱薇王金萍郭松辉
- 关键词：单克隆抗体表位
