郑雯
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
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- 利用定点突变分析白念珠菌依赖铁基因FRP1启动子元件被引量：1
- 2008年
- 通过对白念珠菌高铁还原酶基因FRP1启动子进行突变分析,确认启动子中特殊调控元件。我们通过分析FRP1起始密码子上游1000bp序列发现在-160和-650处有2个推测的Rim101p结合位点,对其分别进行定点突变,然后构建启动子与报告基因LacZ融合质粒,转化整合到白念珠菌rim101-/-株和野生株中,检测不同缺铁条件下β-半乳糖苷酶活性。结果发现碱性条件,Rim101p能够正向调控FRP1的表达;启动子-160处突变对启动子功能影响较弱,而-650突变使启动子活性大大降低,此结果和双突变的结果相同,表明Rim101p主要通过与启动子-650处结合位点相互作用来调控FRP1的表达。
- 桂磊梁勇魏东盛郑雯邢来君李明春
- 关键词：定点突变白念珠菌
- 利用EMSA方法验证Rim101p与高铁还原酶FRP1的相互作用
- 白念珠菌是一种常见的条件性致病真菌,RIM101途径是白念珠菌中应答环境pH反应的信号传导途径,Rim101p是这一途径的关键蛋白。在酸性pH时,Rim101p是以全长无活性形式存在;在碱性pH时,Rim101p通过蛋白...
- 桂磊郑雯邢来君李明春
- 文献传递
- 白念珠菌pH应答转录因子Rim101p在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2011年
- Rim101蛋白是白念珠菌中pH应答反应的重要转录因子.为进一步研究Rim101p的功能,采用PCR方法获得RIM101基因序列,并将其克隆入表达载体pET-21a,转化大肠杆菌表达菌BL21,通过摸索诱导条件使Rim101p在大肠杆菌中成功表达.EMSA实验结果进一步验证了重组Rim101p的活性.
- 桂磊郑雯邢来君李明春
- 关键词：白念珠菌EMSA
- 白念珠菌铁与钙代谢途径相关基因的功能研究
- 白念珠菌是念珠菌病原体中最常见的条件性致病菌，从宿主中获得铁的能力对于其的定居和存活是必需的。在酿酒酵母中主要靠Aftlp来调节铁代谢基因的表达。研究发现，白念珠菌中也有着与其具有一定同源性的Aft2p，也对白念珠菌铁代...
- 郑雯
- 关键词：白念珠菌钙调神经磷酸酶基因功能
- 文献传递
- 白念珠菌高铁还原酶FRP1基因的功能被引量：4
- 2009年
- 白念珠菌(Candida albicans)获得铁的能力影响细胞的生长和毒力,高铁还原酶是白念珠菌高亲和铁吸收系统的重要组成部分。【目的】构建高铁还原酶FRP1(Ferric reductase protein)基因缺失突变株,对FRP1基因功能进行初步研究。【方法】使用Northern杂交的方法分析FRP1基因在缺铁和富铁条件下的表达。利用PCR介导的基因敲除技术构建frp1缺失突变株,并且对野生型和缺失突变株在细胞高铁还原酶活性以及缺铁条件下的生长情况进行比较分析。【结果】缺铁条件可以诱导FRP1基因的表达。frp1缺失突变株不能在铁缺陷的固体培养基上生长。【结论】FRP1蛋白可能是白念珠菌在缺铁条件下起主要作用的高铁还原酶。
- 梁勇郑雯魏东盛邢来君李明春
- 关键词：白念珠菌
