邵启祥
- 作品数：198 被引量：526H指数：10
- 供职机构：江苏大学临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金镇江市科技支撑计划(社会发展)项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 硅油分子对瘢痕成纤维细胞抑制作用的实验和临床研究被引量：9
- 2004年
- 目的 :探讨硅油分子对瘢痕成纤维细胞的抑制作用 ,评价硅凝胶贴膜抑制瘢痕增生的临床疗效。 方法 :采用吐温 2 0对硅油进行超声乳化 ,倍比稀释成各种不同浓度 ,分别与成纤维细胞进行混合培养 ,观察其对成纤维细胞的抑制情况 ;以磷酸盐缓冲液 (PBS)及 10 %CSRPMI 16 4 0作对照。采用自身对照的研究方法 ,观察增生性瘢痕在使用含硅油的硅胶贴膜后的临床疗效。 结果 :在 1∶32 0 0～ 1∶12 80 0浓度时硅油分子显示出明显的对成纤维细胞的抑制作用 ,与对照组比差异有显著性意义 (P <0 .0 0 1) ;临床应用硅胶贴膜 3个月以上 ,瘢痕组织各评价指标均优于对照组。 结论 :硅油分子对成纤维细胞的体外抑制作用是明显的 ,临床使用的硅胶膜防治瘢痕增生的机制中 。
- 孙炳伟邵启祥刘昌邰宁正孙晖沈峻
- 关键词：成纤维细胞瘢痕增生
- 类风湿性关节炎患者外周血TH17细胞测定被引量：5
- 2008年
- 目的探讨新的效应T细胞TH17在类风湿性关节炎（RA）患者外周血的分布及意义。方法选取PHA或PMA＋Ion作为刺激剂，建立流式细胞术胞内细胞因子染色的方法，应用该方法检测了35例活动期、30例稳定期RA患者及正常人外周血TH17和TH1细胞百分率。结果PMA＋Ion联合刺激的效果优于PHA。RA患者及正常人T细胞经PMA＋Ion刺激后，CD3^＋CD8^＋T细胞IL-17表达水平较相应未刺激组显著增加（P〈0．05）。而不论是否加刺激剂，活动期RA患者外周血CD3^＋CD8^＋IL-17^＋细胞明显多于稳定期，二者均多于正常对照组（P〈0．05）。RA患者外周血TH1细胞呈现与TH17细胞类似的分布特点。结论活动期RA患者外周血存在TH17细胞的分布异常，TH17细胞可作为评价RA患者细胞免疫功能状态的新指标。
- 焦志军王文红尤海燕陈蕾汪毅李晶邵启祥
- 关键词：TH17细胞类风湿性关节炎流式细胞术
- 不同CD8^+T细胞分化状态对CAR-T实体肿瘤疗效影响的研究进展被引量：1
- 2020年
- T淋巴细胞分化是一个表型和功能不断改变的渐进过程。T细胞不同分化亚群的抗病毒特征已被较为清晰地揭示,然而在抗肿瘤过程中,这些T细胞亚群的作用和功能研究远不够深入,人们对哪些T细胞亚群能在体内有效地杀伤实体肿瘤知之甚少。2017年美国FDA准入了两款抗CD19嵌合型抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor modified T cells,CAR-T)产品上市,为难治性淋巴瘤患者带来了希望。而相较之下,CAR-T在实体肿瘤中的临床应用则相对滞后。近年来深入的T细胞分化研究显示,不同阶段的CD8^+T细胞体内外抗肿瘤效应存在较大差异,幼稚CD8^+T细胞在沿着干细胞样记忆型T细胞向终末效应型T细胞分化的系列进程中会逐渐丧失自我更新、增殖存活、再活化能力,但细胞毒作用却显著增强。这种CD8^+T细胞分化中呈现的效应功能与细胞自我更新、增殖和存活能力的负相关关系,可能是导致CAR-T在体外杀伤效能无法准确反映体内抗实体瘤疗效的重要原因。本文就CD8^+T细胞各分化阶段的特征,以体外靶向杀伤能力评估临床CD8^+CAR-T抗实体瘤疗效的局限性,以及针对这一临床问题可能的解决方案进行了综述。
- 田圩虹吕巧怡刘雪赵杨静王荟王荟
- 关键词：实体肿瘤
- 次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型EL/4细胞系的建立
- 2011年
- 目的:建立稳定的次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine guanine phosphoribosyltransferase,HG-PRT)缺陷型EL/4细胞系,为小鼠T细胞杂交瘤的制备奠定基础。方法:通过乙基甲磺酸(ethyl methanesulfonate,EMS)提高EL/4细胞的基础突变率,用8-氮杂鸟嘌呤(8-Azaguanine,8-AG)从5μg/ml到80μg/ml浓度逐渐筛选出对8-AG有稳定抗性的细胞株EL/4,并对其生物性状与基因表型进行鉴定。结果:通过筛选获得能够耐受高浓度(80μg/ml)8-AG的EL/4细胞,并能长期在20μg/ml 8-AG培养液中正常生长,但不能耐受次黄嘌呤-氨甲蝶呤-胸腺嘧啶(hypoxanthine-aminopterin-thymidine,HAT)培养基(3 d全部死亡),RT-PCR未能从该EL/4细胞中检测出HGPRT基因的表达,由此可见该EL/4细胞的HGPRT基因发生突变或者缺失。将该细胞经克隆后获得单克隆细胞株,并命名为突变的EL/4(mutant EL/4,mEL/4)。该细胞株能与磁珠分离的小鼠脾脏来源的CD4+T细胞在PEG作用下顺利进行融合。结论:成功建立了HGPRT缺陷型EL/4细胞系mEL/4,为制备T细胞杂交瘤奠定了基础。
- 龚文禚娅蒋砚秋潘晓园邵启祥
- 关键词：突变
- 靶向miR-126慢病毒表达载体的构建及意义
- 2014年
- 目的:检测微小RNA-126(microRNA-126,miR-126)在CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)中的表达水平,同时构建基于慢病毒的miR-126反义寡核苷酸序列(antisense oligonucleotides,ASOs)表达载体。方法:实时定量PCR特异性探针法检测miR-126在Tregs中的表达水平;针对miR-126序列,设计合成其ASOs序列,退火后连接至经AgeⅠ酶和EcoRⅠ酶双酶切的pGCsil-LV-GFP载体上,连接产物转化DH5α感受态细胞,对经PCR鉴定为阳性的载体(命名为pGCsil-miR-126-ASOs)进行测序分析;将构建成功的pGCsil-miR-126-ASOs表达质粒和pHelper 1.0、pHelper 2.0质粒共转染293T细胞,浓缩病毒颗粒并测定所获病毒滴度;将制备好的病毒颗粒感染经TGF-β体外诱导培养的小鼠CD4+CD62L+初始T细胞,72 h后用流式细胞仪检测其Foxp3的表达变化。结果:实时定量PCR结果显示miR-126在CD4+CD25+Tregs中的表达明显高于CD4+CD25-T细胞(P<0.01);测序结果证明成功构建pGCsil-miR-126-ASOs重组质粒载体,包装并获得高浓度的慢病毒颗粒,病毒滴度为9×108TU/mL;重组的病毒能明显抑制Tregs的外周诱导(P<0.05)。结论:成功构建miR-126 ASOs的慢病毒表达载体,并获得高浓度的病毒颗粒。
- 杨学艺卢小东邵启祥刘家秀刘娟
- 关键词：CD4+CD25+调节性T细胞反义寡核苷酸慢病毒
- Notch3胞内活化片段抑制小鼠胸腺上皮细胞系增殖
- 2018年
- 目的:研究Notch3信号对胸腺上皮细胞(thymic epithelial cells,TECs)增殖的影响。方法:人工合成Notch3胞内活化片段(NICD3)序列,构建慢病毒载体,并进行酶切和测序验证。将NICD3包装后感染小鼠TECs系m TEC1,荧光显微镜观察记录绿色荧光细胞的数量与可见光下细胞数量并计算感染效率。采用Ed U增殖试剂盒检测m TEC1细胞增殖率。结果:酶切和测序证实成功构建NICD3慢病毒表达载体,荧光显微镜观察表明该质粒能较好地感染m TEC1细胞,感染效率约为20%。Ed U增殖实验显示过表达NICD3可抑制m TEC1细胞增殖(P<0.01)。结论:Notch3信号抑制m TEC1细胞的增殖。
- 李潇涵闵玉娇潘子辉吴皓杰王荟邵启祥
- 关键词：胸腺上皮细胞
- 强力霉素作为促进细胞增殖的药剂上的用途
- 本发明涉及强力霉素作为促进细胞增殖的药剂上的用途。强力霉素对包括新鲜小鼠胸腺、小鼠胸腺髓质上皮细胞系MTEC1、小鼠胸腺皮质上皮细胞系TEC1C8、小鼠胸腺抚育细胞系TNC－R3.1、人胚肾细胞系HEK293和人神经胶质...
- 陈慰峰邵启祥张毓
- 文献传递
- 多西环素作用前后小鼠胸腺上皮细胞蛋白质表达谱的变化
- 2011年
- 目的:探讨多西环素(doxycycline,Dox)作用前后小鼠胸腺上皮MTEC1细胞系蛋白质表达谱的差异,为阐明多西环素对胸腺细胞作用的机制奠定基础。方法:利用表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术(surface enhanced laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)分析H4和WCX2芯片捕获的多西环素作用前后差异蛋白表达谱,然后利用蛋白质序列数据库搜索和分析表达改变的蛋白。结果:SELDI-TOF蛋白芯片中H4芯片捕获了13种表达增高蛋白,5种蛋白表达降低。WCX2芯片捕获了14种表达增高蛋白,4种蛋白表达降低。共有5种蛋白在两种芯片中均显示表达增高,其中与细胞增殖和凋亡有关的蛋白为硫氧还原蛋白(thioredoxin,Trx)。结论:多西环素对MTEC1细胞的蛋白表达具有调控作用,有可能促进MTEC1细胞抵抗凋亡。
- 禚娅刘慧蒋砚秋何大澄陈慰峰邵启祥
- 关键词：多西环素蛋白质芯片
- 神经酰胺的功能及其在肿瘤发生发展中的作用被引量：5
- 2014年
- 神经酰胺(ceramide)是一种重要的细胞间信号分子,对细胞增殖、凋亡、分化等生命活动具有重要调节作用。近年来,越来越多的研究表明神经酰胺与肿瘤的发生发展高度相关。为了进一步了解神经酰胺,对神经酰胺的结构、分布、合成、生物学作用、抗肿瘤作用以及可能机制等方面进行综述。
- 陈路芳卢小东邵启祥覃文新
- 关键词：神经酰胺生物学作用抗肿瘤作用
- hFOXP3-Δ E251的克隆及在大肠杆菌中的表达
- 2010年
- 目的:构建和表达带HIV-TAT穿膜序列(Protein transduction domain,PTD)的人FOXP3突变体PTD-hFOXP3-Δ E251,为研究人FOXP3的功能奠定基础。方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法,从人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)总RNA中扩增得到人FOXP3(hFOXP3)的cDNA,然后再利用重叠PCR技术扩增获得hFOXP3-ΔE251基因实变体片段。将该重组突变体插入表达载体pET28a-PTD中,构建表达质粒pET28a-PTD-hFOXP3-ΔE251,然后转化感受态细菌E.coli Rosetta(DE3),最终采用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β -D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达。结果:SDS-PAGE电泳分析发现,经0.5mM IPTG诱导8h后,可高效表达重组的融合蛋白,表达产物以包涵体形式存在。结论:成功制备了带穿膜序列的人FOXP3ΔE251突变体融合蛋白,为更好地研究人FOXP3的功能与特性奠定了实验基础。
- 蔺昕许逊宗扬勇邵启祥
- 关键词：基因克隆大肠杆菌
