连永乐
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：福建农林大学植物保护学院生物农药与化学生物学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金福建省教育厅科技项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- 稻瘟病菌—假定几丁质酶多克隆抗体的制备及其检测被引量：2
- 2014年
- 为检测几丁质酶的表达,制备稻瘟病菌的一假定几丁质酶多克隆抗体,探索其可能运用。将稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)几丁质酶基因克隆入融合表达载体pET-32a,并在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中进行诱导表达。表达菌株经0.5 mmol/L IPTG诱导4~6 h后,用Ni^(2+)-NTA亲和柱纯化蛋白,得到可溶的几丁质酶-His融合蛋白。以该融合蛋白免疫新西兰雄兔,制备多克隆抗体。ELISA分析表明该抗体效价达1:204.800,特异性良好。用该抗体ELISA检测了稻瘟病菌4个不同田间菌株中,不同的菌株表达量不同。对稻瘟病菌侵染水稻3、5和7d后的病叶进行抗原Western验证,结果表明,稻瘟病菌不同的侵染时间其几丁质酶表达量有明显差异。几丁质酶表达的差异是否与菌株间致病型等生物学和生理学差异有关,目前正在进一步研究。
- 吴丽民连永乐王宗华汪世华鲁国东
- 关键词：稻瘟病菌几丁质酶多克隆抗体ELISA
- 稻瘟病菌MGG14093基因功能的初步研究
- 2015年
- 根据之前的基因芯片分析,发现在稻瘟病菌侵染水稻的过程中,许多基因被诱导表达。MGG14093为其中一个推测为编码分泌蛋白的未知功能基因,在病菌侵染过程中该基因表达量上调2.906。利用生物信息学在线软件对该基因编码蛋白的特性进行初步分析,并通过RT-PCR扩增进一步分析该基因在稻瘟病菌侵染水稻过程中的表达动态,利用基因敲除和过量表达技术对该基因的功能进行初步研究。结果表明:该基因编码蛋白为定位于胞外的分泌蛋白,没有已知的蛋白结构域,但可能存在几处氨基酸活性位点。MGG14093基因敲除和过量表达后,对稻瘟病菌的营养生长、产孢及附着胞分化没有显著的影响,但该基因过量表达后导致病菌的致病力下降,表明该基因可能参与病菌的致病过程。本研究结果为进一步揭示MGG14093基因的生物学功能奠定了基础。
- 吴丽民卞文印胡芳辉连永乐聂雅婷王宗华鲁国东
- 关键词：稻瘟病菌
- 高职院校微生物与基础免疫学教学改革探讨被引量：1
- 2014年
- 为了提高高职院校保健食品专业"微生物与基础免疫学"的课程教学质量和教学效果,提高学生的企业服务能力,根据该课程的特点,探讨了课程的教学目标、教学内容、教学方法、实验以及考核方式等环节的改革点及其相应的改革措施,以培养适合企业生产所需的新型高技术人才。
- 吴丽民连永乐侯巧玲胡巧云刘美龙
- 关键词：高职院校教学改革
