赵丽剑
- 作品数：4 被引量：9H指数：1
- 供职机构：长春生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程生物学更多>>
- 重组CHO细胞HBsAg纯化工艺的优化被引量：1
- 2003年
- 目的 :优化重组CHO细胞HBsAg纯化工艺。方法 :由乙肝病毒S基因转化的中国仓鼠卵巢 (CHO)细胞培养收液 ,经初步提纯、密度梯度离心、凝胶过滤层析可得到HBsAg纯品。结果 :通过凝胶过滤层析收取HBsAg活性峰 ,控制HBsAg活性峰的收量 ,并把HBsAg活性峰的下降段再收集起来重新层析 ,改进后可使HBsAg的总回收率达到 6 0 %以上 ,而且牛血清蛋白残余量达到 10ng ml以下 ,HBsAg纯度 97%以上。结论 :重组CHO细胞HBsAg纯化工艺改进后 ,使HBsAg在产量及质量上均有明显提高。
- 李德娟陈万革赵丽剑江波赵睿王智宇谷丽娟何巍
- 关键词：重组CHO细胞HBSAG纯化工艺凝胶过滤层析卵巢细胞乙肝疫苗
- 氢氧化铝佐剂配制工艺的优化被引量：7
- 2010年
- 目的优化氢氧化铝[A(lOH)3]佐剂配制工艺。方法对A(lOH)3配制工艺中的反应温度、氢氧化钠(NaOH)溶液的滴入速度、气体流量和反应终点pH值进行优化,观察配制的A(lOH)3溶液的状态。分别以原工艺和优化工艺配制的A(lOH)3溶液为佐剂制备重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞),比较二者的外观和效力。结果优化的A(lOH)3配制工艺为:反应温度70～72℃;NaOH溶液滴入速度185ml/min,10个点滴入;气体流量0.2bar;反应终点pH值5.80±0.05,以该工艺配制的A(lOH)3胶体颗粒大小均匀,呈淡淡的蓝白色,不发生沉淀。以优化工艺配制的A(lOH)3溶液为佐剂制备的重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)无沉淀,为均匀的胶体,成品放置3年外观无显著变化;疫苗效力略有提高,但不显著。结论优化了A(lOH)3溶液佐剂的配制工艺。
- 李德娟何巍张睿付琳娜赵丽剑王宇金立杰
- 关键词：氢氧化铝乙型肝炎疫苗佐剂
- 重组CHO-C_(28)细胞生长动态的研究
- 2004年
- 观察CHO C2 8细胞在大生产过程中 ,生长状态曲线 ,为细胞培养过程中换液及培养条件提供依据。人为控制培养液中血清含量、加液量、pH值等条件。从生产种子 2 2代左右开始传代 ,经 5～ 6 d形成致密细胞单层 ,一般维持换液次数为 30次左右。如果生产种子代次高 ,其维持换液次数也相应减少 ,根据不同换液次数细胞增殖数量不同 ,总结出重组CHO C2 8细胞生长动态曲线。并根据换收液的HBsAg滴度 ,绘出换液次数和HB sAg相关曲线。结论 :7～ 2 3次换液期间 (缓慢生长期 )HBsAg收获最高。
- 周长军陈万革董雪林赵丽剑杨文冲周安广赵小琳
- 关键词：CHO-C28细胞HBSAG
- 应用国产激流式生物反应器培养表达HBsAg的重组CHO细胞被引量：1
- 2012年
- 目的采用国产激流式生物反应器培养表达HBsAg的重组CHO细胞。方法分别应用美国NBS公司的Celligen310型生物反应器和国产AP20SC型激流式生物反应器(单个细胞培养袋和4个细胞培养袋)连续灌流培养重组CHO细胞,连续培养35 d,每24 h收获1次,采用ELISA法测定细胞收获液中HBsAg的滴度。结果 Celligen 310型生物反应器培养重组CHO细胞分泌的HBsAg在2.0μg/ml水平上可持续8 d,至第18天达最高水平(2.16μg/ml),第35天收液中HBsAg含量为1.12μg/ml;国产AP20SC激流式生物反应器单个细胞培养袋培养重组CHO细胞分泌的HBsAg在2.0μg/ml水平上可持续9 d,第18天达最高水平(2.20μg/ml),第35天收液中HBsAg含量为1.08μg/ml,与Celligen 310型生物反应器相比,收液中HBsAg含量在2.0μg/ml水平持续时间无明显差异;国产AP20SC激流式生物反应器4个细胞培养袋培养重组CHO细胞分泌的HBsAg在2.0μg/ml水平上可持续13 d,与该生物反应器单个细胞培养袋相比明显延长,第21天达最高水平(2.14μg/ml),第35天收液中HBsAg含量为1.5μg/ml,明显高于单个细胞培养袋培养的细胞。结论国产AP20SC型激流式生物反应器可代替进口生物反应器对传代细胞进行大规模培养,用于人用疫苗的生产。
- 李志强张睿王宝忠赵丽剑王宇董海波吕学用李德娟刘瑞
- 关键词：重组CHO细胞
