赖前成
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
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- 重组慢病毒介导超极化激活的环核苷酸门控阳离子通道4基因转染BMSCs的实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨重组慢病毒（1entivirus，LVs）介导超极化激活的环核苷酸门控阳离子通道4（hyperpo。larization．activatedcyclicnucleotide．gatedcationchannel4，HCN4）基因转染大鼠BMSCs构建生物起搏细胞的可行性。方法选取3～5周龄SD大鼠，采用改良全骨髓贴壁培养法分离培养BMSCs。以LVs作为转染载体，增强绿色荧光蛋白（enhancedgreenfluorescentprotein，EGFP）为标记，构建LVs．HCN4．EGFP病毒液。取第3代BMSCs分别转染LVs—HCN4．EGFP病毒液（实验组）和LVs．EGFP空白病毒液（对照组），荧光显微镜观察转染24、48、72h后两组绿色荧光表达情况，72h时Westernblot检测HCN4蛋白表达；电生理检测实验组转染72h后BMSCs的起搏电流。结果实验组BMSCs形态正常、生长良好；48h后荧光显微镜下可见散在的绿色荧光，转染效率约10％；72h荧光表达稍增多，转染效率为20％～25％。对照组未见绿色荧光表达。Westernblot检测示转染72h后，实验组可见与HCN4蛋白相对分子质量相同的条带表达，而对照组仅有微弱表达；实验组蛋白条带灰度值为33．75±0．41，显著高于对照组的23．39±0．33（t=17．524，P=-0．013）。实验组转染后的BMSCs检测到起搏电流，并能被CsCl完全阻断，符合起搏电流特点。结论重组LVs介导HCN4基因成功转染大鼠BMSCs，并检测到HCN4蛋白表达及起搏电流。
- 于风旭方易冰刘炫赖前成贾建博廖斌
- 关键词：BMSCS慢病毒转染起搏电流
- 体外循环再灌注血清对人肾小管上皮细胞的损伤作用
- 2012年
- 目的通过改良缺血再灌注模型,观察体外循环血清对人肾小管上皮细胞损伤的作用。方法以人近曲肾小管上皮细胞(HK-2)为研究对象,根据是否应用体外循环血清将细胞分为空白组:不含人血清的培养基;对照组:含正常人血清的培养基;实验组:含体外循环血清的培养基,进行缺氧复氧培养。通过流式细胞仪检测肾小管细胞凋亡情况,免疫组化检测Caspase-3蛋白表达。结果实验组凋亡率及Caspase-3均高于对照组及空白组(P<0.05);空白组和对照组凋亡率及Caspase-3表达差异无统计学意义。结论体外循环血清可诱导HK-2细胞凋亡,其机制可能与激活胞内Caspase-3有关。
- 赖前成邓永花万居易伍长学王波廖斌
- 关键词：人肾小管细胞体外循环CASPASE-3
- 体外循环再灌注血培养诱导肾小管细胞凋亡及乌司他丁的保护作用研究被引量：3
- 2012年
- 目的探索乌司他丁对体外循环血清致人肾小管上皮细胞损伤的保护作用。方法以人近曲肾小管上皮细胞HK-2为研究对象,根据是否应用体外循环血清将细胞分为空白组:不含人血清的培养基;对照组:含正常人血清的培养基;试验组:含体外循环血清的培养基,进行缺氧复氧培养,通过流式细胞仪检测肾小管细胞凋亡情况,免疫组化检测caspase-3蛋白表达;乌司他丁组:以改良的缺血再灌注方式处理肾小管上皮细胞的过程中,施加乌司他丁干预。结果流式细胞仪检测结果显示,体外循环血清处理后,4组肾小管上皮细胞HK-2凋亡率比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中试验组较空白组、对照组、乌司他丁组均明显升高,差异有统计学意义(P=0.00)。4组caspase-3蛋白积分分光光度值(IOD)值比较差异有统计学意义(P<0.05);其中试验组较空白组、对照组、乌司他丁组均明显升高,差异有统计学意义(P=0.00)。结论乌司他丁可通过抑制caspase-3激活,减轻体外循环缺血再灌注血清对HK-2损伤作用。
- 邓永花赖前成万居易伍长学王波廖斌
- 关键词：乌司他丁体外循环细胞凋亡CASPASE-3
- MicroRNA在心脏疾病的研究进展
- 2013年
- microRNAs的发现及其功能的研究,是近年来生命科学研究中的重大进展之一。大量研究发现microRNAs在心脏发育和心脏疾病发生过程中发挥重要作用。这些microRNAs调控靶蛋白和在心脏疾病的相关生物学功能迅速更新,心脏组织特异性的microRNAs也不断被发现。本文回顾了近年来与心脏常见疾病相关的MicroRNAs研究,总结相关靶蛋白调控机制以及潜在作用,展望临床应用前景。
- 赖前成于风旭廖斌
- 关键词：MICRORNA心脏疾病心律失常缺血心脏发育
- 微小RNA在小鼠窦房结与心房肌、心室肌表达差异性的研究被引量：2
- 2014年
- 目的通过分析昆明小鼠窦房结与心房肌、心室肌中差异表达的微小RNA（microRNA，miRNA），探讨参与调控向窦房结细胞分化的miRNA。方法60～90日龄健康昆明小鼠190只，雌雄不限，体重35～45g。取其中10只经预实验确认窦房结解剖定位方法后，切取余180只小鼠窦房结及左心耳（心房肌）、心尖处（心室肌）组织。取标本行HE染色观察；提取总RNA进行基因芯片分析，筛选差异表达miRNA，并进行基因功能关联性分析。结果小鼠窦房结解剖定位以界沟为纵轴线，上腔静脉与右心房交界处2．0mm×1．5mm×1．0mm范围；HE染色示窦房结组织细胞少，几乎无横纹，细胞质淡染，细胞核大而圆，细胞周围较多纤维结缔组织，其间可见窦房结动脉。基因芯片检测结果显示窦房结与心室肌、心房肌相比，差异表达miRNA共39个，其中上调miRNA12个，下调miRNA27个。根据靶基因构建差异miRNA与靶基因的调控网络，可得到网络中起核心调控作用的miRNA和被miRNA调控的关键靶基因。结论小鼠窦房结组织存在的差异表达miRNA可能参与了胚胎干细胞向窦房结细胞分化过程的调控。
- 方易冰文智邓明彬赖前成于风旭唐小军伍长学牟光容廖斌
- 关键词：微小RNA差异表达基因窦房结心房肌心室肌小鼠
